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广金钱草化学诱变植株表型及SRAP遗传差异
目的:选育优良广金钱草品种(系).方法:采用迭氮钠(NaN3),甲基磺酸乙酯(EMS)和秋水仙素佳剂量对广金钱草种子进行诱变处理,初步筛选出13株表型变异的广金钱草植株,对广金钱草变异植株及对照基因组DNA进行相关序列扩增多态性(SRAP)分析.结果:广金钱草在株高、地茎、分枝状况等方面发生大量变异;10对SRAP引物扩增出多态性条带3 285个,平均每对引物扩增出328.5条带,多态性比例平均为96.45％,广金钱草化学诱变植株遗传相似系数范围0.326～0.476,遗传相似系数较低,表明经化学诱变剂处理后广金钱草在基因组水平上存在真实的遗传差异;相似性差异程度大小顺序为V-13＞V-7＞ V-6＞ V-1 1＞V-10＞ V-12＞ V-9＞ V-8＞ V-4＞ V-5＞ V-3＞V-2＞ V-1,表明NaN3在分子水平上对广金钱草的影响比EMS和秋水仙素小;化学诱变处理后广金钱草变异程度高于不同种源地的变异,进一步表明人工诱变育种可以缩短育种年限,提高突变率.结论:该研究揭示了广金钱草化学诱变株表型特异性和遗传多样性,筛选了一些特异资源,为高产优质广金钱草新品种(系)的选育提供重要的科学依据.
关键词： 广金钱草 化学诱变 农艺性状 相关序列扩增多态性分析 -
无活性放线菌野生株抗肿瘤活性突变株的自发突变抗性筛选和化学诱变抗性筛选
目的 由无活性放线菌野生株转化获取活性突变株,为药源活性产物研究拓展新菌株资源.方法 以海洋来源无活性放线菌野生株L35-1为出发菌株,通过自发突变抗性筛选以及化学诱变结合抗性筛选,筛选获得抗性突变株.采用MTT法检测突变株发酵样品对K562细胞的抑制活性.结果 通过自发突变抗性筛选,得到新霉素抗性突变株114株、链霉素抗性突变株68株,其中7株新霉素抗性突变株和3株链霉素抗性突变株样品对K562细胞有抑制作用,在100 μg/ml浓度下抑制率大于20%.通过化学诱变结合抗性筛选,得到硫酸二乙酯诱变链霉素抗性突变株41株、硫酸二乙酯诱变新霉素抗性突变株32株、亚硝基胍诱变新霉素抗性突变株46株,其中1株硫酸二乙酯诱变链霉素抗性突变株和1株亚硝基胍诱变新霉素抗性突变株有抗肿瘤活性,100 μg/ml样品对K562细胞的抑制率大于20%.结论 上述结果初步表明,无活性放线菌野生株可通过抗性筛选转化为活性突变株,因此有可能成为筛选获取药源活性新菌株的重要原始资源.
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接触有机溶剂者微核细胞的观察
微核的测定是短期检测致突变因子的快速、简便的方法.近几年来普遍用于辐射损伤、化学诱变、毒理学研究及血液学等方面.
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酿酒酵母发酵制备RNA的研究
核糖核酸(RNA)是一类重要的生物大分子,在基因表达和蛋白质生物合成中起关键作用,其降解产物核苷酸可用于食品和医药中间体.目前,通常以解脂假丝酵母作为RNA的高产菌株,缺点是其属于致病菌.大量应用于食品工业的酿酒酵母虽然无致病性,但其RNA含量仅为细胞干重的3.0％左右.该研究采用硫酸二乙酯(DES)化学诱变,利用氯化钾敏感性筛选,以期提高酿酒酵母CGMCC NO.2448产RNA的含量.实验从100株突变株中筛选出一株高RNA含量、生长良好的酿酒酵母Y78,细胞质量浓度和RNA质量分数分别为4.5 g/L和5.02％.分批发酵时,在对数生长期,突变株Y78的RNA质量分数高于原始菌株,8h达到大为5.18％,是原始菌株RNA质量分数4.16％的1.25倍.相比原始菌株,Y78对葡萄糖的利用未见明显差异.以0.3,0.4,0.5,0.6h-1的稀释率流加培养基进行连续培养,RNA质量分数高达到6.04％,相比出发菌株,RNA质量分数提高了50.2％.由此表明通过化学处理及发酵工艺优化,提高酿酒酵母中RNA的含量,有利于工业生产RNA.
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广金钱草化学诱变植株产量和质量的研究
目的:研究广金钱草化学诱变植株产量和质量的差异,筛选优良变异株.方法:采用迭氮钠(NaN3)、甲基磺酸乙酯(EMS)和秋水仙素进行广金钱草种子的化学诱变处理,紫外分光光度法和HPLC法测定总黄酮、多糖和夏佛塔苷含量.结果:V-2、V-3、V-5、V-7、V-8、V-9、V-13诱变株的单株产量和三种化学成分含量均明显高于CK,单株产量是CK的1.42～1.80倍,总黄酮含量是CK的1.02～2.28倍,多糖含量是CK的1.20～1.89倍,夏佛塔苷含量是CK的1.12～1.61倍.结论:V-2、V-3、V-5、V-7、V-8、V-9、V-13诱变株具有优质高产的潜能.
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硫酸二乙酯对纤维堆囊菌的诱变育种
本文以纤维堆囊菌(Sorangium cellulosm)ATCC15384的紫外突变株为出发菌株,用硫酸二乙酯(DES)进行化学诱变,终得到了埃博霉素A和B的产量分别为13.93和6.82mg/L的高产菌株,分别比原始菌株提高了6.61和3.04倍.说明使用DES诱变可以显著提高埃博霉素产量.
