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桂皮醛通过PI3K/Akt信号通路抑制TGF-β1诱导的结肠癌细胞LoVo上皮间质转化
目的:探讨桂皮醛对转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的结肠癌LoVo细胞增殖、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其与磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3 K/Akt)信号通路的关系.方法:通过TGF-β1诱导结肠癌细胞株LoVo发生上皮间质转化,使用桂皮醛(0,20,40,80 mg·L-1)干预由TGF-β1诱导的LoVo细胞的增殖,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测桂皮醛对TGF-β1诱导的细胞增殖能力的影响.转移小室(transwell)侵袭实验检测细胞侵袭能力变化.蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)及PI3 K/Akt信号通路关键蛋白的表达.采用PI3K/Akt抑制剂LY290004来验证桂皮醛通过PI3 K/A kt信号通路抑制TGF-β1诱导的EMT.结果:与空白组比较,桂皮醛能有效抑制TGF-β1诱导的增殖及侵袭能力(P＜0.01),显著增加E-cadherin的表达,抑制N-cadherin,Vimentin及TGF-β1刺激的p-Akt和p85的表达(P＜0.01);同时通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活逆转TGF-β1诱导的EMT (P＜0.01).结论:桂皮醛可通过调节PI3K/Akt信号通路抑制TGF-β1诱导的结肠癌细胞LoVo的上皮间质转化,降低其侵袭能力.
关键词： 桂皮醛 结肠癌 上皮间质转化 磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B 转化生长因子-β1 -
促红细胞生成素对棕榈酸诱导肝癌HepG2细胞胰岛素信号通路活性的作用
目的：研究促红细胞生成素（EPO）改善棕榈酸（PA）诱导肝癌HepG2细胞胰岛素信号通路活性的作用及机制。方法以PA（250 nmol/L）及EPO（10 U）或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的组蛋白去乙酰化酶（SIRT1）激动剂白藜芦醇（Rsv,10 nmol/L）干预HepG2细胞，分为6组：对照组、胰岛素组（Ins）、PA组、PA+Ins组、PA+EPO组、PA+Rsv组；将含SIRT1的小干扰RNA（siRNA）转染HepG2细胞，再分为对照组、EPO组、EPO+阴性siRNA组、EPO+siSIRT1组及相应的PA干预组。Western blotting法检测胰岛素受体底物2（IRS?2）、磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）及SIRT1蛋白水平，定量逆转录多聚酶链反应（qRT?PCR）检测SIRT1基因变化。采用独立样本t检验进行两组间均数比较。结果与对照组比较（1.00±0.03），PA组的pIRS?2(Ser731)蛋白升高，pAKT（Ser473）、SIRT1蛋白水平降低（分别为1.25±0.06、0.77±0.02、0.74±0.03，t=6.048、-13.686、-10.649，均P<0.05）。经EPO干预后，与PA组相比，pIRS?2（Ser731）蛋白降低，pAKT（Ser473）、SIRT1蛋白水平升高(分别为0.70±0.03比1.00±0.11、1.60±0.14比1.00±0.08、1.39±0.03比1.00±0.03，t=-4.853、6.330、25.868，均P<0.05)。当使用siRNA下调SIRT1后，生理及PA状态下EPO激活HepG2细胞胰岛素信号通路的作用均被阻断。结论在PA处理的HepG2细胞中，EPO能够通过促进SIRT1蛋白表达，从而激活受损的胰岛素信号通路。
