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  • 疏风解毒颗粒防治手足口病的体内外药效学研究

    作者:郭姗姗;金亚宏;王意忠;高英杰;时宇静;马荣;刘方舟;钟菊迎;田雪川;崔晓兰

    目的:通过观察疏风解毒颗粒在体内对手足口病病毒EV71感染BALB/c乳鼠模型的保护作用和在体外对EV71等肠道病毒的抑制作用,评价疏风解毒颗粒防治手足口病的药效.方法:采用疏风解毒颗粒3岁儿童临床2倍、等倍和1/2倍剂量(14.08,7.04,3.52 g·kg-1)分别对手足口病病毒EV71H株感染的BALB/c乳鼠手足口病动物模型进行预防性给药(ig,3d)和治疗性给药(ig,5d),观察乳鼠感染的严重程度、死亡数,计算动物死亡率和生命延长率;采用疏风解毒颗粒在体外对Vero细胞无明显毒性的5个剂量,对人手足口病病毒EV71H株,柯萨奇病毒B3株,B4株,B5株的致Vero细胞病变的抑制作用进行观察.结果:疏风解毒颗粒对手足口病病毒EV71感染的乳鼠模型具有明显的预防和治疗作用,可降低感染程度和死亡率,具有明显的保护和延长生命的作用;疏风解毒颗粒在无明显毒性的浓度下,在体外对人手足口病病毒EV71 H株、CoxB3株、CoxB5株均具有明显的抑制作用.结论:疏风解毒颗粒在体内外均具有较好的防治手足口病的作用.

  • 复方一枝蒿颗粒对防治手足口病的体内外药效学研究

    作者:郭姗姗;马雪萍;潘昕;高英杰;崔晓兰

    目的:通过观察复方一枝蒿颗粒在体内外对肠道病毒的抑制作用,评价复方一枝蒿颗粒防治手足口病的药效作用。方法采用复方一枝蒿颗粒的3岁儿童临床2倍、等倍和1/2倍剂量分别对肠道病毒EV71 H株感染的Babl/c乳鼠手足口病动物模型进行预防性给药和治疗性给药,通过观察乳鼠感染的严重程度、死亡数,来计算动物死亡率、死亡保护率和生命延长率;采用细胞病变的CPE法观察复方一枝蒿颗粒对肠道病毒EV71 H株,BrCr株,柯萨奇病毒B3、B4、B5株的抑制作用;采用real time PCR法观察复方一枝蒿颗粒对肠道病毒EV71 BrCr株在RD细胞中增殖的抑制作用。结果复方一枝蒿颗粒对肠道病毒EV71 H株感染的乳鼠模型具有明显的治疗作用,其可降低感染程度和死亡率,具有明显的死亡保护和延长生命的作用;复方一枝蒿颗粒在无明显毒性的浓度下,对肠道病毒EV71 H株、BrCr株具有明显的抑制作用,其能明显抑制EV71 BrCr株在细胞内的增殖。结论复方一枝蒿颗粒在体内外对手足口病均具有较好的治疗作用,其作用机制可能与抑制肠道病毒在细胞内增殖有关。

  • Balb/c乳鼠心肌细胞的分离和体外培养方法的优化

    作者:张中海;包琳;史巧云;李晓波;钟照华

    目的 探讨Balb/c乳鼠心肌细胞分离和培养方法,优化出Balb/c乳鼠心肌细胞分离和培养的方法.方法 取乳鼠心脏,采用胰酶和胶原酶Ⅱ消化方法分离乳鼠心肌细胞,比较消化次数和消化时间对原代乳鼠心肌细胞培养的影响.结果 原代培养的Balb/c乳鼠心肌细胞生长迅速、自行搏动,细胞形态完整,细胞内肌丝、线粒体清晰.分离细胞时消化次数好控制在不多于6次,每次消化时间不超过20min.2h差速贴壁可以提高心肌细胞纯度,经肌动蛋白鉴定,心肌细胞达94.6%.结论 本研究优化了分离和原代培养Blab/c乳鼠心肌细胞的方法.

  • B组柯萨奇病毒对心肌细胞感染模式的研究

    作者:张中海;张琦;闫长栋;钟照华

    目的 观察B组柯萨奇病毒(Coxsackie virus B,CVB)在原代心肌细胞中的感染特点,从而研究CVB对心肌细胞的致病机制.方法 原代培养Balb/c乳鼠心肌细胞,并获得纯化的心肌细胞.使用B组柯萨奇病毒嗜心肌毒株3型(CVB3m)攻击原代心肌细胞,观察病毒感染心肌细胞后心肌细胞的细胞病变、超微结构和心肌酶的变化.结果 成功原代培养了Balb/c乳鼠心肌细胞.心肌细胞在病毒感染后,细胞病变(CPE)不明显,与在HeLa等细胞中的典型CPE不同.心肌细胞在CVB3m感染后保持细胞形态和博动超过2周时间.电镜显示心肌细胞结构正常,细胞器数量增加,在心肌细胞胞质中可见晶格样病毒颗粒排列.培养细胞的上清液中心肌酶升高.结论 CVB在原代心肌细胞中表现为持续感染,CVB在心肌细胞中的致病机制不同于HeLa细胞.

  • γ-干扰素干预对乳鼠感染轮状病毒后肝损伤程度的影响

    作者:杨梅;陈兰举

    目的::检测肝脏核因子( NF)-κB的表达,评估γ-干扰素( IFN-γ)对乳鼠感染轮状病毒( RV)后的作用。方法:将乳鼠分为肠道外感染对照组、IFN-γ大小剂量干预组。腹腔注射RV建立2日龄RV肠道外感染模型。用大小剂量(2μg,0.2μg) IFN-γ在BALB/C乳鼠背部皮下注射3 d。模型建立后第5天取材,观察肝脏病理组织学变化,蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测肝脏NF-κB表达。结果:IFN-γ小剂量干预组乳鼠肝脏病理损伤评分较肠道外感染对照组差异无统计学意义( P>0.05)。 IFN-γ大剂量干预组乳鼠肝脏病理损伤评分均较肠道外感染对照组和IFN-γ小剂量干预组明显增高(P<0.01)。蛋白质印迹法和免疫组织化学法显示IFN-γ大小剂量干预组NF-κB表达随IFN-γ剂量的增加而增加(P<0.01)。结论:IFN-γ能刺激NF-κB的表达。肝脏的病理损伤与NF-κB在肝脏的表达量相关。

  • 肠道病毒71型感染对BALB/c乳鼠T淋巴细胞亚群的影响

    作者:宋楠楠;岳盈盈;李志会;李鹏;纪璇;孟红

    目的 观察BALB/c乳鼠感染肠道病毒71型(EV71)后机体的免疫功能状态,为临床治疗提供依据.方法 将30只1日龄BALB/c乳鼠随机分为对照组、实验组1组和实验2组,分别颅内注射20 μL灭活EV71200804株、EV71200804株和EV71200803株;感染后7d后引颈处死小鼠,取胸腺和脾脏,分离淋巴细胞进行T细胞亚群检测.结果 与对照组比较,实验1组胸腺淋巴细胞中CD3+ CD4+、CD3+CD8+和CD3+细胞百分比均明显升高(P均<0.05),实验2组各T淋巴细胞百分比略有升高(P均>0.05);实验1组脾脏淋巴细胞中CD3+ CD4+、CD3+CD8+和CD3+细胞百分比均显著降低(P均<0.01),实验2组CD3+CD4+细胞百分比明显降低(P<0.05)、CD3+CD8+和CD3+细胞百分比无显著变化(P均> 0.05);实验1组和实验2组胸腺CD4+T细胞/CD8+T细胞均略低(P均> 0.05),实验1组脾脏CD4T细胞/CD8T细胞略高、实验2组略低(P均>0.05).结论 EV71感染可引起BALB/c乳鼠T淋巴细胞亚群功能紊乱,且其程度与病毒株有关.

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