首页 > 文献资料
-
参莲提取物对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响
目的:探讨参莲(SL)提取物在炎症调节中发挥的治疗性作用及其机制.方法:分别以小鼠巨噬细胞Raw264.7和小鼠腹腔巨噬细胞为实验对象,利用脂多糖(LPS)诱导炎症模型,SL提取物低、中、高剂量(5,10,20 mg·L-1)药物处理24 h,另设空白组,使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)含量及mRNA表达;使用蛋白质免疫印迹法(Western blot)对小鼠Raw264.7核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的p65及磷酸化p65(p-p65)蛋白表达情况进行检测,采用免疫荧光法对小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞NF-κB p65分子进行亚细胞定位观察SL提取物是否能够影响其入核.结果:与空白组比较,模型组小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞TNF-α,IL-1ββ含量及mRNA表达均显著升高,小鼠Raw264.7 p-p65/p65蛋白表达显著升高(P＜0.01),免疫荧光观察显示模型组Raw264.7及腹腔巨噬细胞均可见明显入核行为;与模型组比较,SL提取物低、中、高剂量组明显降低小鼠Raw264.7及腹腔巨噬细胞TNF-α,IL-1β含量及mRNA表达(P ＜0.05,P＜0.01),显著降低小鼠Raw264.7及p-p65蛋白(P＜0.01),SL提取物中剂量组可明显减弱Raw264.7及腹腔巨噬细胞入核行为.结论:SL提取物能够抑制巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与影响巨噬细胞炎性因子的分泌及NF-κB信号通路有关.
关键词： 参莲提取物 核转录因子-κB (NF-κB) 炎症 巨噬细胞 -
参莲提取物对大鼠腹腔肥大细胞释放活性物质的干预作用
目的:探讨参莲提取物对大鼠腹腔肥大细胞释放活性物质的干预作用.方法:提取原代大鼠腹腔肥大细胞,纯化后以5×106个/mL浓度接种于培养板中,加参莲提取物预处理2h后,用C48/80刺激肥大细胞脱颗粒,ELISA法检测细胞上清液以及细胞裂解液中组胺(histamine),类胰蛋白酶(tryptase),以及5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的含量,计算活性物质释放率.结果:模型组较对照组组胺释放率由32.36％升至61.71％ (P ＜0.01),参莲提取物各剂量(100,50,25,12.5 mg·L-1)作用后,组胺释放率分别降至16.24％,26.25％,27.81％,31.50％ (P＜0.01)；模型组较对照组类胰蛋白酶释放率由13.19％升至21.72％ (P ＜0.01),参莲提取物各剂量(100,50,25,12.5 mg·L-1)作用后,类胰蛋白酶释放率分别降至8.60％,15.78％,8.80％,12.15％(100,25,12.5 mg·L-1组P＜0.01,50 mg·L-1组P ＜0.05)；模型组较对照组5-HT释放率没有明显变化,但参莲提取物100,50,25 mg· L-1组显著增加5-HT释放率(P ＜0.01,P＜0.05).结论:参莲提取物对大鼠腹腔肥大细胞有一定的稳定作用.
-
参莲提取物对TNF-α刺激下单核细胞株THP-1功能的影响
目的:观察参莲(SL)提取物对炎症因子刺激下单核细胞功能的影响.方法:SL提取物预孵育,以TNF-α20 μg·L~(-1)为刺激因子,观察SL提取物对单核细胞株THP-1黏附、迁移、摄脂、分泌功能变化的影响.结果:SL1～3(0.5～2 g·L~(-1))可明显降低HUVEC和THF-1的黏附率,与模型组比较有显著性差异.SL1～5(0.125～2 g·L~(-1))均可显著减少THP-1迁移细胞数,与模型组比较有显著性差异.SL1～5(0.125～2 g·L~(-1))均可显著降低细胞内TC值.SL 1(2 g·L~(-1))可显著降低细胞上清中异常增高的IL-6值,同时升高IL-10的含量,其他剂量未见明显作用.结论:SL提取物对TNF-α刺激下单核细胞黏附、迁移、摄脂、分泌功能均有显著影响,其作用可能是SL提取物干预AS早期炎症反应的机制之一.
-
参莲提取物对兔颈总动脉低剪应力模型血流及血管病理形态的影响
血流动力学的改变对脂质沉积和血管内皮的影响与动脉粥样硬化(artherosclerosis,As)的发生密切相关.本实验以颈总动脉套管和高脂饵食法建立家兔局部低剪切应力As模型,通过检测造模2 4,8周的血流量、切应力、血脂水平及血管病理形态,发现颈总动脉套管法在近心端可形成局部低剪应力；阿托伐他汀和参莲提取物呈时间依赖性和剂量依赖性地增加近心端血流量(P＜0.05),降低血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensity lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平(P＜0.05),减少As模型家兔近心端血管病变程度.本研究首次证实了参莲提取物(丹参和穿心莲组成)对As斑块形成的抑制作用与改善血流有关.
-
参莲提取物对PM2.5染毒RAW264.7细胞损伤的保护作用
观察中药参莲(SL)提取物对PM2.5染毒RAW264.7细胞损伤的保护作用.建立PM2.5染毒致RAW264.7细胞损伤模型.以细胞生长、细胞损伤标记物、氧化应激相关因子及炎性细胞因子为观察指标,评价SL提取物对PM2.5染毒RAW264.7细胞损伤的保护作用.结果表明,PM2.550 mg·L-1作用4,24 h时可致细胞颗粒沉积,抑制细胞生长,可显著增加细胞上清中LDH,NO释放量及细胞内活性氧(ROS)水平.在SL提取物50,25,10 mg·L-1干预作用下,RAW264.7细胞颗粒沉积减轻,细胞上清中LDH,NO,IL-1β,MCP-1释放量显著下降,SOD活性显著有所增加.表明SL提取物对PM2.5染毒RAW264.7细胞损伤有明显保护作用,其作用可能与对细胞的直接保护作用、减少氧化应激及炎症损伤有关.
-
参莲提取物对M1巨噬细胞的影响
该实验探讨参莲提取物对动脉粥样硬化发展中的M1巨噬细胞的影响.MTT法检测参莲提取物对RAW264.7细胞的毒性作用;γ干扰素(IFN-γ)及脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞成M1型巨噬细胞,然后加入高、中、低剂量的参莲提取物(50,25,12.5 mg·L-1)作用,流式细胞术检测M1巨噬细胞膜分子CD86的表达,RT-PCR法检测M1巨噬细胞中iNOS和TNF-α mRNA的水平,ELISA法检测M1巨噬细胞上清中IL-6和TNF-α的含量.结果发现IFN-γ及LPS能诱导RAW264.7细胞极化为M1型巨噬细胞,M1巨噬细胞膜分子CD86的表达、细胞中iNOS和TNF-α mRNA的表达以及细胞分泌的IL-6和TNF-α的含量均有显著性地提高;参莲提取物各剂量均可抑制M1型巨噬细胞膜分子CD86、细胞中iNOS及TNF-α mRNA的表达,降低细胞分泌炎症细胞因子IL-6及TNF-α的含量.通过以上研究表明IFN-γ及LPS能诱导RAW264.7细胞极化为M1型巨噬细胞;参莲提取物对M1型巨噬细胞有一定的抑制作用.
-
参莲提取物对动脉粥样硬化家兔血管病理形态和脂质代谢的影响
目的 观察参莲提取物(由丹参和穿心莲组成)对动脉粥样硬化(artherosclerosis,AS)的影响.方法 以球囊导管内皮损伤术和高脂饵食法建立家兔AS模型,通过胸主动脉油红O大体染色、股动脉HE染色、平滑肌细胞计数等方法观察参莲提取物对AS斑块形成过程中血管病理形态和脂质代谢的影响.结果 辛伐他汀和参莲提取物各剂量均可显著减少AS模型家兔斑块形成面积,降低大内膜厚度值(MIT)和中膜层平滑肌细胞数;参莲提取物1.12、4.48 g/kg剂量组家兔股动脉MIT值明显低于模型组.辛伐他汀和参莲提取物各剂量组可明显降低AS模型家兔血清总胆固醇(TC);参莲提取物2.24、4.48 g/kg剂量组血清三酰甘油(TG)水平明显低于模型组.辛伐他汀可显著提高AS模型家兔高密度脂蛋白胆崮醇(HDL-C),参莲提取物无明显作用.辛伐他汀及参莲提取物各剂量组均可明显降低AS模型家兔低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),与模型组比较具有显著差异(P<0.01、0.05).结论 参莲提取物对AS斑块形成具有显著的预防和治疗作用,其作用与改善脂质代谢有关.
