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艾灸对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞自噬功能的影响
目的:观察艾灸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及自噬相关蛋白LC3、p62表达的影响,探讨艾灸防治CHF的可能机制.方法:SD大鼠随机分为正常组12只与造模组48只,采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF模型,将建模成功的大鼠随机均分为模型组、艾灸组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)组.艾灸组用艾条温和灸双侧“肺俞”“心俞”穴,每日1次,每次20 min,治疗3周.3-MA组按15 mg/kg给予3-MA混悬液腹腔注射,每日1次,共3周.RAPA组按2 mg/kg给予RAPA混悬液灌胃,每日1次,共3周.观察大鼠的一般情况及行为体征;心功能测量仪检测大鼠心率(HR)、心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压大上升或下降速率(±dp/dtmax);HE染色法观察心肌病理变化;Western blot法检测心肌细胞自噬相关蛋白LC3及p62表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞出现肿胀、空泡,肌纤维断裂、溶解,排列紊乱;与模型组比较,艾灸组和3-MA组大鼠心肌细胞的数量正常,心肌纤维排列相对整齐,RAPA组心肌细胞出现肿胀、空泡,心肌纤维断裂、溶解,排列紊乱等状况.与正常组比较,模型组HR和LVEDP明显升高(P＜0.01),CO、LVSP及±dp/dtmax明显下降(P＜0.01),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/工明显升高(P＜0.01),而p62表达明显下降(P＜0.01).与模型组比较,艾灸组和3-MA组HR和LVEDP明显下降(P＜0.05),CO、LVSP及±dp/dtmax明显升高(P＜0.05),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显降低(P＜0.01),p62表达明显升高(P＜0.01),而RAPA组LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P＜0.01),p62表达明显降低(P＜0.01).结论:艾灸可以改善CHF大鼠心肌损伤,其作用可能与降低心肌细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ、升高p62蛋白表达水平,发挥类似于3-MA的自噬抑制作用,抑制心肌细胞过度自噬、减轻心肌损伤有关.
关键词： 艾灸 慢性心力衰竭 心肌细胞自噬 微管相关蛋白1轻链3 选择性自噬接头蛋白p62
