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电针"足三里""肾俞"穴对T2DM大鼠GLUT2、GCK的影响
目的:探讨电针不同穴位对2型糖尿病大鼠的疗效差异及其机制.方法:40只雄性SD大鼠随机选取8只作为空白组,其余大鼠予高糖高脂饲料喂养50 d后,按35 mg/kg质量比腹腔注射2%链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)溶液进行T2DM造模,并将造模成功的32只大鼠随机分为模型组、电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组,每组8只.各电针组分别取双侧"足三里""肾俞"穴进行电针治疗,电针参数为2 Hz,2 mA连续波20 min/次,1次/d,6 d/周,连续4周.于干预前及干预后,检测各组大鼠灌胃前空腹血糖(Fasting Blood Glucose,FBG)、体质量及OGTT实验.末次干预结束,处死大鼠取血,取胰腺组织,采用放免法测血清胰岛素(FINS),计算胰岛素分泌指数(HOMA-B),Real-time PCR检测胰腺中葡萄糖转运蛋白-2(Glucose Transporter-2,GLUT2)、葡萄糖激酶(Glucokinase,GCK)的mRNA表达水平,HE染色观察胰腺的形态变化.结果:干预4周后,除空白组体质量显著增加(P<0.01),其余各组体质量均显著减轻(P<0.01);模型组FBG显著高于干预前、空白组(P<0.01),格列美脲灌胃组显著低于模型组(P<0.01),两电针组比较模型组均有下降趋势(P>0.05);葡萄糖耐量实验(Oralglucose Tolerance,OGTT)实验结果与FBG同步;电针足三里组、格列美脲灌胃组FINS显著低于空白组、模型组及电针肾俞组(P<0.01);模型组HOMA-B显著低于空白组(P<0.01),各干预组比较模型组均有上升趋势(P>0.05);模型组GLUT2的mRNA表达水平显著低于空白组(P<0.01),电针足三里组、电针肾俞组显著高于模型组(P<0.05,P<0.01);模型组GCK的mRNA表达水平显著低于空白组(P<0.01),各干预组均显著高于模型组(P<0.01,P<0.05),且电针足三里组显著高于格列美脲灌胃组(P<0.01).HE染色:模型组胰岛边界不清,体积明显变小,胰岛细胞数量减少且排列杂乱,细胞肿胀、坏死,可见细胞空泡变性.3个干预组与模型组比较,有不同程度的改善,胰岛边界较模型组清晰,体积增大,胰岛内细胞数量增加,排列也较均匀,细胞空泡变性减少.结论:电针足三里、肾俞穴可能是通过上调GLUT2、GCK mRNA的表达水平而改善T2DM大鼠的胰岛B细胞的分泌功能、保护胰岛B细胞的形态、降低FINS水平,其中足三里穴的效果更优.
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青少年起病的成人型糖尿病相关基因新突变位点的发现
目的 发现新的青少年起病的成人型糖尿病 (MODY) 相关基因或已知的相关基因的新突变位点,为临床上MODY的诊断提供依据.方法 以已知的MODY临床特征为筛选标准,从北京协和医院内分泌科就诊的患者中选取4例,提取其基因组DNA并进行全外显子组测序,用PCR及Sanger测序法对测序结果进行验证.结果 在2例患者中分别发现了MODY相关基因GCK和HNF4α的新的突变位点c.1348G>T (p.Ala450Thr) 和c.758G>A (p.Arg253Gln).结论2例患者均为MODY患者,所发现的MODY相关基因中的突变位点均为首次发现.
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单基因突变导致的糖代谢异常的遗传学分类及临床提示
单基因突变导致的高血糖/低血糖是一种特殊类型糖代谢异常. KCNJ11、ABCC8、HNF1A、HNF4A、GCK、HNFIB、线粒体m.3243A等基因突变导致的糖尿病可以根据其临床表现不同,处理方法也不尽相同.
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MODY的研究进展
青少年发病的成年型糖尿病(MODY)是2型糖尿病中的一种异质性单基因疾病,特点是常染色体显性遗传.随着基因定位克隆和候选克隆等技术的发展,多个2型糖尿病的易感性特定缺陷基因及其标记位点已被阐明.讨论了肝细胞核转移因子(HNF)-4α、葡萄糖激酶(GCK)、HNF-1α、胰岛素启动因子(IPF)-1的基因缺陷和有关MODY的发病机制.
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石斛合剂对老年糖尿病大鼠GCK、GLUT-2的影响
目的:观察石斛合剂(DC)对老年糖尿病大鼠血糖、GSP水平以及GCK、GLUT-2表达的影响,探讨其治疗糖尿病的作用机制.方法:Wistar雌性大鼠分为正常组(9只)、模型组(12只)、石斛合剂低剂量组(12只)、石斛合剂高剂量组(12只)、二甲双胍对照组(10只),检测各组大鼠血糖、GSP水平,取胰腺组织,免疫组化检测GLUT-2、GCK阳性面积、IOD.结果:与模型组比较,石斛合剂低、高剂量组血糖、GSP水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01),GCK、GLIT-2阳性面积、IOD显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:DC具有使胰岛GCK与GLUT-2表达上调的作用,可能是石斛合剂调节糖代谢作用的机制之一.
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脂肪酸对大鼠原代肝细胞GCK与SREBP-1c基因的影响
目的 探讨3种不同外源性脂肪酸对大鼠原代肝细胞糖代谢相关的葡萄糖激酶(GCK)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)基因表达的影响,为饮食预防糖尿病提供参考依据.方法 用改良二步胶原酶灌注法提取SD大鼠的肝脏细胞并进行培养；根据预实验的结果确定脂肪酸的用量；分别用0、3.2和12.8 g/ml的软脂酸(PA)、油酸(OA)和二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞6h;采取RT-PCR法检测GCK mRNA和SREBP-1c mRNA的表达量.结果 ①高剂量脂肪酸(12.8 μg/ml)处理时,PA组和OA组GCK mRNA表达量较对照组分别升高了40.14％和36.58％,SREBP-1c mRNA表达量较对照组分别升高了48.59％和29.12％,差异均有统计学意义(P＜0.05).②低剂量脂肪酸(3.2 μg/ml)处理时,PA组和DHA组SREBP-1c mRNA表达量较对照组分别降低了23.13％和17.64％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 外源性脂肪酸的种类和剂量都能够影响大鼠原代肝细胞中GCK和SREBP-1c基因的表达.
