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甘草水提物多成分肝肠吸收代谢差异研究
目的：探讨甘草水提物多成分的肝肠吸收代谢差异。方法利用液质联用技术对甘草水提物的主要成分进行鉴别，并利用在体封闭肠环模型研究大鼠小肠和肝脏吸收代谢的差异。结果甘草水提物中共鉴别出13种主要化学成分。甘草水提物中部分成分可透过肠壁吸收，且在吸收过程中伴随着成分代谢，在血浆样品中共检测到14种新生代谢产物。肝脏可代谢甘草水提物中多种成分，且较肠吸收代谢过程产生更多的代谢产物。结论肝脏是甘草水提物多成分代谢的主要器官，肠道具有一定代谢作用。小肠和肝脏存在明显的吸收代谢差异。
关键词： 甘草水提物 超高效液相色谱-串联质谱 肝肠吸收代谢差异 封闭肠环 -
甘草水提物中miRNA对人免疫细胞基因表达的影响
微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类在转录后水平调节基因表达的非编码小分子RNA,其调控基因表达、影响细胞活性的功能已为人们所重视.近年来miRNA的跨界调控成为新的研究方向,为人们更全面地认识和了解miRNA的功能提供了新的视角.植物miRNA由于通常经过了甲基化修饰,因此较为稳定,不易降解.前期研究表明,甘草干燥药材的水煎剂中存在着丰富的小分子RNA,这为了解甘草的作用机制提供了新的思路.在本研究中,利用从甘草水煎剂中提取的小分子RNA以及合成的miRNA模拟物(mimic)作用于分离自健康人的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),然后利用RT-PCR对其模式识别受体(PRR)基因以及部分转录因子、信号分子和细胞因子的基因表达变化进行了分析.结果表明甘草miRNA对人免疫细胞的基因表达具有明显的调节作用,能够显著抑制T细胞分化相关基因的表达,以及炎症和凋亡相关基因的表达.这为进一步更全面地了解甘草的作用机制以及中药新药的研制带来了新的思路.
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甘草水提物对大鼠C-BSA肾炎模型治疗作用的研究
目的 研究甘草水提物对阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导的系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的治疗作用.方法 制备C-BSA并进行大鼠尾静脉注射诱导肾炎模型,造模成功后给予大鼠口服甘草水提物4周,观察不同剂量甘草水提物对C-BSA诱导的大鼠MsPGN的改善作用.造模和给药期间监测受试大鼠的体重和24 h尿蛋白,给药结束后检测受试大鼠血清尿素氮和肌酐以及IL-2、IL-6、TNF-α和NF-κB水平的变化.结果 与模型组相比,甘草水提物高剂量组和阳性组尿蛋白,血清尿素氮、肌酐和IL-2、IL-6、TNF-α和NF-κB的含量均显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 甘草水提物可以明显改善C-BSA诱导的大鼠MsPGN,其机制可能与抑制NF-κB活性有关.
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甘草水提物对雷公藤甲素致大鼠急性肝损伤的改善作用及对其体内IL-10、TNF-α水平的影响
目的:观察甘草水提物对雷公藤甲素致大鼠急性肝损伤的改善作用及对其体内IL-10、TNF-α水平的影响.方法:60只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁)和甘草水提物低、中、高剂量组.空白对照组、模型组大鼠灌胃等容生理盐水,阳性对照组大鼠灌胃异甘草酸镁药液(13.5 mg/kg),甘草水提物低、中、高剂量组大鼠灌胃甘草水提物药液(120、240、480 mg/kg,以提取物量计),给药体积均为1 mL,每天1次,连续给药7 d.第8天时,模型组、阳性对照组和甘草水提物各剂量组大鼠均一次性灌胃雷公藤甲素药液(0.6 mg/kg)以建立急性肝损伤模型.采用苏木精-伊红染色法检查大鼠肝组织病理学变化;采用酶偶联反应法检测各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的活性;采用Western blotting法检测大鼠肝组织中白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,模型组大鼠肝组织出现明显病理学变化,血清中ALT、AST活性均显著升高,肝组织中TNF-α蛋白表达水平显著升高、IL-10蛋白表达水平显著降低(P<0.01).与模型组比较,甘草水提物各剂量组大鼠肝组织病理学变化程度明显减轻;除甘草水提物低剂量组大鼠血清中AST活性外,甘草水提物各剂量组大鼠血清中ALT、AST活性和肝组织中TNF-α蛋白表达水平均显著降低,肝组织中IL-10蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01).结论:甘草水提物能减轻雷公藤甲素所致大鼠急性肝损伤,其机制可能与下调促炎因子TNF-α的表达、上调抗炎因子IL-10的表达有关.
