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柠檬酸镱诱导肝癌细胞HepG2凋亡作用及蛋白质表达变化研究
目的 研究稀土配合物柠檬酸镱([YbCit2]3-)诱导人肝癌HepG2细胞株凋亡的作用及其机制.方法 用DMEM培养基培养人肝癌细胞株HepG2细胞,以DMEM无血清培养细胞为对照组,以0.01～5.00 mmol/L[YbCit2]3-无血清培养基培养组为处理组,应用四噻唑蓝(MTT)法检测[YbCit2]3-对HepG2细胞生长的影响;以2.00 mmoL/L[YbCit2]3-无血清培养基培养组为处理组,Hoechst 33258染色法考察[YbCit2]3-对细胞的作用,采用差异蛋白质组学及H2O2、线粒体膜电位检测的方法研究[YbCit2]3-对HepG2细胞作用的可能机制.结果 2.00～5.00 mmol/L浓度范围内处理72 h,[YbCit2]3-能抑制HepG2细胞的生长,半数抑制浓度(IC50)值为(2.46 ±0.23)mmol/L.2.00 mmol/L[YbCit2]3-处理HepG2细胞48、72 h,Hoechst 33258染色检测表明其作用是诱导HepG2细胞凋亡.HepG2细胞经2.00 mmol/L[YbCit2]3-处理72 h后,通过双向电泳分离和质谱鉴定,鉴定出14个差异表达蛋白质点,包括丝切蛋白1、过氧化物氧化还原酶6、S100钙结合蛋白A6、蛋白酶26s非ATP酶亚基13亚型3等在细胞中分别参与抗凋亡、氧化还原、细胞增殖、蛋白降解等过程的蛋白质.2.00 mmol/L[YbCit2]3-分别作用HepG2细胞24、48 h后,细胞线粒体膜电位检测红绿荧光比值对照组为2.45 ±0.28,24 h组为1.56 ±0.23,48 h组为1.16 ±0.18,与对照组比,差异具有统计学意义(F=23.97,P=0.001);胞内H2O2检测荧光强度对照组为20.00 ±2.08,24 h组为40.00 ±5.50,48 h组为48.00±2.03,与对照组相比,差异具有统计学意义(F=48.40,P=0.000),表明[YbCit2]3-作用后线粒体膜电位下降,H2O2产生增加.结论 [YbCit2]3-可通过调节胞内氧化应激水平和线粒体凋亡途径诱导HepG2癌细胞凋亡.
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手术联合放射性核素90Sr-90Y或曲安奈德治疗兔耳增生性瘢痕的疗效
目的 探讨手术联合90Sr-90Y(以下简称90 Sr)照射或曲安奈德注射治疗增生性瘢痕的佳方案及安全性.方法 将兔耳增生性瘢痕随机分为8组:A组直接行放射性核素90Sr照射,B组手术修薄后2d行90 Sr照射,C组手术修薄后1周行90 Sr照射,D组直接注射曲安奈德,E组手术修薄后1周注射曲安奈德,F组直接注射生理盐水,G组手术修薄后1周注射生理盐水,H组为空白对照.观察各组的组织学变化.结果 (1) 90Sr照射组(A、B、C组)与曲安奈德注射组(D、E组)成纤维细胞数、胶原纤维面密度值、微血管数、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性颗粒吸光度值均明显低于生理盐水组(F、G组)和空白对照组(H组);其中B组明显;A、C、D、E各组差异无统计学意义.(2)90Sr照射各组黑色素颗粒面密度值明显低于其他各组,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)90Sr照射各组未发现异型细胞.结论 (1)90Sr及曲安奈德可以抑制兔耳增生性瘢痕的增生,二者疗效差异无统计学意义.(2)对增生性瘢痕早期进行90 Sr干预可取得较好效果.(3)经90 Sr照射易引起色素脱失,但一般不会引起癌变.
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代谢平衡法与粪便监测法评价藏族成年男子膳食锌吸收率的比较
目的:比较代谢平衡法(MB)和粪便监测法(FM)评价藏族成年男子膳食锌(Zn)吸收率.方法:进行14d人体现场代谢试验,受试者于D5晚一次性口服浓集67Zn的稳定性同位素示踪剂4.0 mg及稀土元素镱(Yb)1.0 mg,口服卡红标记、并收集D4～12的粪便和尿液样品,同时收集膳食、饮水样品;用感耦等离子体质谱仪测定粪样67Zn/68Zn的比值,并用原子吸收分光光度计分析所收集样品中的锌含量,比较用两种方法测定该人群膳食Zn吸收率的结果.结果:MB和FM评价藏族成年男子膳食Zn吸收率分别为(23.8±3.9)%、(21.4±4.3)%,二者的差异(配对t检验)和相关性(Pearson)均有统计学意义;未吸收的Zn示踪剂和Yb经胃肠道排出情况几乎一致,主要在口服后5d内排出. 结论:14 d代谢试验评价膳食Zn吸收率时,MB略高于FM,后者的试验期可依据Yb的排出情况缩短至4～5 d.两种方法评价的结果都表明藏族成年男子膳食Zn吸收尚可.
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微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定蛇床子中16种稀土元素
目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定蛇床子中16种稀土元素(钪、钇、镧、铈、镨、钕、钐、铕、钆、铽、镝、钬、铒、铥、镱、镥)的含量.方法:蛇床子(12批)经微波消解后采用ICP-MS测定,射频功率为1 300W,采样深度为6.8 mm,辅助气、等离子体气和载气流速分别为1.0、16.0和1.17 L· min-1,雾化室温度为2℃;通过在线加入内标铼(Re)和铑(Rh)元素的方法来校正基质效应和干扰.结果:各元素在各自检测质量浓度范围内线性关系良好(r均不低于0.999 3),检出限为0.03～0.32μg·kg-1,回收率为90.1％～105.7％,重复性RSD值为0.9％～3.1％.不同产地的蛇床子中各元素含量差别较大.结论:经方法学验证,本法可用于蛇床子中16种稀土元素的检测,为其质量控制提供参考依据.
