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心肌标志物临床应用筛选
心肌肌钙蛋白I、心肌肌红蛋白、超敏C反应蛋白,主要是用于辅助心梗等疾病的诊断和治疗,与心肌肌钙蛋白T及心肌酶谱等形成较为全面的心肌标志物,为心梗等疾病的临床诊断和治疗提供较为全面的实验诊断依据.
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重组人心肌肌红蛋白基因工程菌的构建
目的 构建稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白(rhMb)的基因工程菌株,为临床检测早期心肌损伤及预后提供诊断试剂,促进肌红蛋白诊断标准化的研究.方法 采用RT-PCR技术从人心肌组织总RNA中克隆出全长的人心肌肌红蛋白基因,将其插入到PMD18-T simple克隆载体中,转化DH5α克隆菌株.经酶切和测序对目的基因进行分析,再插入到pET-21a(+)表达载体中,转化BL21(DE3).对诱导表达的目的蛋白行SDS-PAGE和运用锐普心肌梗死仪检测重组蛋白的抗原性并准确定量.结果 测序表明RT-PCR所得的肌红蛋白基因hMb序列与GenBank(NM 005368.2)中报道的序列一致,目的蛋白表达量达菌体总蛋白的15%,重组蛋白抗原性良好.结论 成功构建了稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白基因工程菌株.
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孕鼠使用地塞米松对早产鼠心肌肌红蛋白、心脏重量/体重的影响
目的:研究不同剂量地塞米松(Dex)对早产鼠心肌肌红蛋白、心脏重量/体重的影响.方法:8只SD孕鼠随机分为大、中、小剂量组和安慰组,分别于孕第16、17、18天从孕鼠尾静脉注射2.0 mg/kg、1.0 mg/kg、0.5 mg/kg的Dex及生理盐水,于孕19天剖出胎鼠建立早产鼠模型并测定其心肌Mb含量、心脏重量/体重,从而探讨经孕鼠尾静脉注射不同剂量Dex对早产鼠心肌Mb、心脏重量/体重的影响.结果:大、中、小Dex剂量组心肌Mb含量高于安慰组,且随着Dex剂量的增加对心肌Mb含量的影响逐渐加大,当Dex增加到一定浓度时其对心肌Mb影响不再增加,同时各组心脏重量/体重无明显差异.结论:孕鼠注射Dex后对早产鼠心肌Mb含量有影响,其含量随着Dex剂量的增加而逐渐加大.当Dex增加到一定浓度时其对心肌Mb影响不再增加,同时此方法对早产鼠的心脏重量/体重无明显影响.
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肌红蛋白压电免疫芯片抗体固定方法学研究
目的:构建一种检测心肌肌红蛋白的压电免疫芯片,探讨压电免疫传感技术用于诊断急性心肌梗死等疾病的可行性.方法:设计四通道芯片微阵列,分别应用巯基自组装法、戊二醛交联法、蛋白A法固定心肌肌红蛋白单克隆抗体,从抗体固定量、响应特性等方面比较三种固定方法的优缺点,探讨抗体的佳固定方法,并对抗体固定条件进行优化.观察该芯片检测心肌肌红蛋白的灵敏度、线性范围、精密度与重复性及非特异性反应等.检测临床标本并与酶联荧光法进行对比,评价该方法的临床应用价值.结果:Sulfo-LC-SPDP巯基自组装法芯优于其他两种方法,以此法构建的压电免疫芯片可用于半定量检测心肌肌红蛋白.但限于现有的实验条件,目前尚无法实现精确定量检测.结论:构建的压电免疫芯片具有灵敏度高、特异性好等特点,具有一定的临床应用价值.
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心肌损伤标志物监测在急性心肌梗死中的临床应用
目的 对心肌肌红蛋白(Mb)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)进行定时、定量分析比较,为急性心肌梗死(AMI)的早期诊断、风险预测提供较合理的检测指标.方法 用116例AMI患者在入院后24 h内按时间段0～4h、～8 h、～12 h、～24 h、～48 h、～3 d、～5 d的血清检测cTnI与Mb水平,同时对照46例正常血清进行结果比较并进行评估.结果 AMI中cTnl和Mb联合检测是合理的检测指标.结论 CTnI与Mb联合检测敏感性比单项检测要高.
