首页 > 文献资料
-
检测鲜草莓中GⅡ型诺如病毒的两种富集方法比较
目的 建立鲜草莓中GⅡ型诺如病毒(NoV GⅡ)的实时荧光RT-PCR检测方法,评价磁珠富集法和PEG(聚乙二醇)沉淀法对检测草莓中NoV GⅡ的适用性,对北京地区采集的18份草莓样品进行检测.方法 参照ISO/TS 15216-1《实对荧光RT-PCR方法测定食品中甲型肝炎病毒和诺如病毒水平方法》合成检测NoV GⅡ的特异性引物和探针,分别采用磁珠富集法和PEG沉淀法富集病毒,然后提取RNA,建立实时荧光RT-PCR检测方法,并对提取条件进行优化.结果 磁珠富集法的高回收率为1.730％(PBS缓冲液),PEG沉淀法的高回收率为1.682％(TGBE缓冲液),18份草莓样品均未捡出NoV GⅡ.结论 通过磁珠富集法和PEG沉淀法建立的病毒检测的富集方法均适用于鲜草莓中NoV GⅡ的检测.
关键词： 实时荧光RT-PCR 鲜草莓 GⅡ型诺如病毒 磁珠富集法 聚乙二醇沉淀法 -
聚乙二醇沉淀法在流感病毒气溶胶检测中的应用
目的 初步探讨聚乙二醇(PEG)沉淀法对流感病毒气溶胶的浓缩效果.方法 于2012年12月-2013年1月随机选取南京市5家商场超市和3家综合医院,采集室内可能含流感病毒的气溶胶样品,气溶胶经过不同的吸收液浓缩量、PEG-6000和NaCI加入量进行浓缩后提取RNA,以一步法逆转录巢式PCR检测甲型流感病毒.结果 当PEG-6000和NaCI终浓度为7％和2.9％(m/V)浓缩10、20 ml吸收液以及PEG-6000和NaC1终浓度为14％和5.8％(m/V)浓缩10ml吸收液时,甲型流感病毒的阳性检出率分别为17.5％,60％,30％,差异有统计学意义(P=0.008).结论 PEG沉淀法可应用于流感病毒气溶胶的浓缩,并利于流感病毒的检出.
-
水源中肠道病毒及胃肠炎病毒检测方法的研究进展及意义
人肠道病毒及胃肠炎病毒借助水体传播可能引起水源影响区域的疫情暴发.尤其对免疫力发育尚不完全的儿童和免疫缺陷人群,这些病毒感染可能会引起严重的临床症状和并发症.因此,做好水源中肠道病毒及胃肠炎病毒的检测和监测,将对这些病毒所致疾病的防范和控制有重要意义.本文综述了目前国内外针对水体中的病毒浓缩和检测所做的相关研究,包括从水样中浓缩、纯化病毒的不同方法及建立在分子生物学和细胞培养基础上的病原检测方法.这些研究为进一步建立行业标准和实验室检测规范提供了重要的参考和技术依据.
-
应用聚乙二醇沉淀法及凝胶层析分离法诊断胰岛素自身免疫综合征的价值探讨
1例65岁男性因"反复心慌、四肢无力1年余"入院,生化结果提示为高胰岛素性低血糖症,多次查胰岛素自身抗体阴性,胰腺影像学未见异常.聚乙二醇沉淀法及凝胶层析分离法检测到该患者血清中有胰岛素-胰岛素自身抗体复合物,因此诊断为胰岛素自身免疫综合征.通过饮食调整及三餐口服拜唐苹,患者上述症状发作次数显著减少.
关键词： 胰岛素自身免疫综合征 低血糖症 聚乙二醇沉淀法 凝胶层析分离法 -
用聚乙二醇沉淀法筛检巨催乳素血症及临床意义分析
目的探讨聚乙二醇沉淀法筛测巨催乳素血症的临床意义.方法用聚乙二醇沉淀法,对260例高催乳素血症患者血清进行小分子催乳素的回收率及LH、E2浓度测定,区分巨催乳素血症和真高催乳素血症,回顾性分析两者的临床体征.结果真高催乳素血症及巨催乳素血症在聚乙二醇处理前两组催乳素浓度无显著性差异(P＞0.05);处理后两组催乳素浓度有显著性差异(P＜0.05);真高催乳素血症的LH、E2浓度低于巨催乳素血症组及正常对照组;两组患者均表现月经紊乱、闭经、溢乳,但前者发生的显著高于后者.结论真高催乳素血症及巨催乳素血症临床上难于区别,用聚乙二醇沉淀法能有效区分两者,减少对真高催乳素血症的误诊.
-
超速离心法与聚乙二醇沉淀法提取人多发性骨髓瘤细胞来源外泌体的比较
目的:鉴定比较超速离心法和聚乙二醇(PEG)沉淀法提取人多发性骨髓瘤细胞来源外泌体.方法:人多发性骨髓瘤细胞系RPMI 8226经去除外泌体无血清培养24 ～ 48 h培养后,分别使用超速离心法和PEG沉淀法进行外泌体的提取,分别测定两种方法所得外泌体的蛋白含量,并进行电镜鉴定比较.结果:超速离心法所提取外泌体测得实际浓度为(1.095±0.031)μg·μL-1,沉淀法所提取外泌体实际浓度为(2.069±0.086)μg·μL-1,组间比较,差异具有统计学意义(P＜0.001);超速离心法测得外泌体蛋白总量(109.513±3.113)μg,沉淀法所提取外泌体测得蛋白总量(206.883±8.580)μg,组间比较,差异具有统计学意义(P＜0.001).电镜下超速离心法分离外泌体清晰可见,沉淀法提取的外泌体含有较多杂质,影响电镜观察.结论:超速离心法方法简单,耗时少,外泌体纯度高,可用于外泌体的蛋白、DNA和免疫功能研究.沉淀法耗时较长,所得外泌体杂质蛋白含量多,不适用于外泌体蛋白分析,可用于RNA分析.
-
038 免疫化学法测定系统性红斑狼疮患者循环免疫复合物中DNA水平
近年来,人们应用各种方法对自身免疫性疾病患者循环免疫复合物(IC)进行检测,试图阐明免疫复合物和自身免疫性疾病临床症状之间的关系.但这些方法都是非特异性的,如聚乙二醇沉淀法,不能把含有免疫球蛋白(Ig)的聚合体和含有自身抗原抗体的免疫复合物分开.本文作者应用免疫化学法定量检测系统性红斑狼疮(SLE)患者循环IC中的DNA水平,并对它和狼疮活动性之间的关系进行探讨.
