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新型液相芯片复合检测5种鼠传病原体方法的建立
目的 建立一种能同时检测5种鼠传病原体:流行性出血热病毒(Epidemic hemorrhagic fever,EHF)、斑疹伤寒立克次体(Rickettsia typhi,TY1)、鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis,YP)、恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi,RST)、钩端螺旋体(Leptospira,Lep)的液相芯片多重检测方法；方法 针对5种病原的全基因组序列,分别设计特异性引物,并将上游引物5'端分别偶联一些特定的核酸片段作为标签(TAG),下游引物5’端标记生物素,PCR扩增后产物与微球进行杂交,后利用液相芯片检测系统分析结果.结果 建立的方法能同时完成对5种病原体Bio-plex100病原体及其中任何1种的检测,特异性好,灵敏度低可达3 fg/test.结论 通过利用偶联有TAG及生物素的引物对,成功建立了可同时检测5种鼠传病原的液相芯片检测方法,具有较高的灵敏度和特异性.该方法对于鼠传病原体的检测具有较好的应用前景.
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肌钙蛋白Ⅰ复合检测在心梗患者的应用价值探讨
有关急性心肌梗塞(AMI)患者检测心肌标志物如:肌酸激酶(CK)、肌红蛋白(MB),心肌肌钙蛋白Ⅰ(CTNI)和肌酸肌酶同功酶MB(CK-MB),以及心肌脂肌酸结合蛋白(FABP)和碳酸酐酶同功酶Ⅲ(CAⅢ)等,均为心肌损伤的标志物,由于以上酶类及特有蛋白的理化性质不同,所以在血中出现的快慢速度也不同.采用敏感,特异性好,检则速度快的有效指标,将会为临床抢救AMI患者提供有力的依据.本文应用心肌肌钙蛋白Ⅰ复合检测板(MB、CK-MB、CTNI)对急性心肌梗塞和不稳定心绞痛及部分正常人群检测结果,作了初步探讨及阐述.
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47个SNPs复合检测方法的建立及其法医学应用
目的 建立47-plex SNPs复合检测方法,评价其在法医学中的应用价值.方法 筛选46个常染色体SNPs和1个Y-SNPs,使用2个检测体系分别对47个SNPs进行单管内复合PCR扩增,采用荧光标记单碱基延伸法和毛细管电泳检测技术进行分型检测;并用建立的方法对260份广东地区无关个体血样进行47个SNPs分型.结果 建立的47-plex SNPs的复合检测体系灵敏度高,种属特异性好;260名个体所有SNPs均能准确分型,群体内基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,累积个人识别率大于0.9999,累积非父排除率为0.999 82,累积偶合率为6.24×10-20.结论 本文47-plex SNPs复合检测方法能同时对47个SNPs进行快速、准确的检测,在法医学个体识别鉴定中具有良好的应用前景.
关键词： 法医物证学 单碱基延伸(SBE) 复合检测 单核苷酸多态性(SNPs)
