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  • 美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402作用机制的研究

    作者:王晶;李鑫

    目的 探讨美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402的作用机制.方法 MTT比色法观察美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响,AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法研究美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402凋亡的影响,流式细胞术检测线粒体膜电位,DNA Ladder实验检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达.结果 美洲大蠊提取物可抑制人肝癌细胞Bel-7402增殖,IC50为28.2 μg·mL-1,并可诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡,降低线粒体膜电位.DNA Ladder实验可见明显的梯形电泳图谱,蛋白印迹法显示Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,Caspase-8蛋白表达无明显变化.结论 美洲大蠊提取物可通过线粒体途径诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡.

  • 甲基莲心碱体外抑制人肝癌细胞增殖和侵袭的作用机制研究

    作者:周雅君;时菁;田耕;周汉新;高国全

    目的:探讨甲基莲心碱( neferine, Nef )对人肝癌HepG2和Bel-7402细胞侵袭的影响和作用机制。方法人肝癌HepG2和Bel-7402细胞体外培养,经不同浓度的甲基莲心碱处理后,CCK-8法检测细胞的增殖,Transwell细胞体外侵袭实验观察Nef对细胞侵袭能力的影响;免疫印迹检测Rho相关蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示,与对照组比较,甲基莲心碱干预组抑制人肝癌HepG2和Bel-7402细胞增殖,并呈剂量-效应关系( P<0.05);Transwell细胞体外侵袭实验显示,3μmol·L-1甲基莲心碱明显抑制HepG2和Bel-7402细胞的侵袭;免疫印迹结果显示,3μmol·L-1甲基莲心碱作用HepG2和Bel-7402细胞12 h后,RhoA、RhoC和ROCK表达明显降低。结论甲基莲心碱可体外抑制HepG2和Bel-7402细胞的增殖和侵袭,其抑制肝癌细胞的侵袭可能与抑制RhoA、RhoC和ROCK蛋白的表达有关。

  • 姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α表达的影响

    作者:孙军;李岩

    目的 探讨姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α表达的影响以及蛋白酶体在其中的作用.方法 以0、2.5、5、10、15、20 μmol·L-1的姜黄素处理人肝癌细胞BEL-7402缺氧环境中培养6 h,WST-8法和台盼蓝染色法分析细胞增殖和活力,采用RT-PCR和Western Blot方法检测肝癌细胞中HIF-1α的表达;以0、10 μmol·L-1姜黄素、10 μmol·L-1MG-132、10 μmol·L-1姜黄素+10 μmol·L-1MG-132处理人肝癌细胞BEL-7402缺氧环境中培养6 h,采用WesternBlot方法检测肝癌细胞中HIF-1α的蛋白表达.结果 ①不同剂量的姜黄素对肝癌细胞活力和增殖率的影响与对照组相比差异无显著性;②随着姜黄素浓度的增加,HIF-1α蛋白表达逐渐降低;③不同剂量的姜黄素对HIF-1α mRNA表达的影响与对照组相比差异无显著性;④MG-132能够逆转姜黄素对HIF-1α蛋白的减少.结论 姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白表达是通过转录后机制和蛋白酶体途径.

  • 消瘤汤含药血清干扰细胞生长作用浓度的实验研究

    作者:马晓红;丁艳蕊;王小琴

    目的:从细胞和分子水平探讨消瘤汤抑瘤机理并选择佳含药血清浓度.方法:借鉴西药单体加药浓度梯度方法来确定用于干扰细胞生长的含药血清浓度梯度,消瘤汤高、中、低剂量含药血清12.5%、25%、50%浓度,作用于培养的人肝癌细胞Bel-7402 48h、96h.通过MTT法检测消瘤汤含药血清对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响,用于佳含药血清浓度的筛选.结果:从不同含药血清浓度、不同作用时间下细胞生长OD值来分析:25%含药血清干扰96h对细胞生长抑制效果好.结论:25%含药血清干扰96h可作为后期药物实验的含药血清加药浓度及观察时间筛选的实验依据.

  • 半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用

    作者:黄必胜

    目的 观察并比较半夏蛋白对体外培养的人肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用.方法 应用流式细胞技术,检测半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用,并观察了其诱导凋亡作用的量-效关系.结果 60%硫酸铵沉淀蛋白没有明显诱导Bel-7402细胞凋亡的作用,而30%硫酸铵沉淀蛋白有诱导Bel-7402细胞凋亡的作用.30%沉淀进一步分离结果显示,只有0.1 mol/L NaCl洗脱峰有一定诱导Bel-7402细胞凋亡的作用.结论 半夏蛋白有一定的诱导Bel-7402细胞凋亡作用,其主要成分可能存在于总有机酸部位.

  • 复方斑蝥含药血清抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖的机制研究

    作者:姜新根;肖兰凤;黄树林;刘顺会

    目的 探讨复方斑蝥抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖的作用机制.方法 血清药理学方法制备复方斑蝥血清并处理人肝癌Bel-7402细胞,MTY方法观察其对人肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制作用,RTPCR技术检测其对c-Myc、p53基因表达的影响.结果 复方斑蝥含药血清能够显著抑制Bel-7402细胞的增殖,并下调c-Myc和上调p53基因的表达.结论 复方斑蝥可能通过影响细胞增殖相关基因的表达抑制Bel-7402细胞的增殖,可作为一种抗肝癌中药复方的研究原型.

  • 枸杞多糖诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡及其周期的实验研究

    作者:袁红伟;张富慧;王雪丹;尤小兵;王芳;王珍玉;单铁英;聂晓进;杨书良

    目的:探讨枸杞多糖对人肝癌细胞Be1-7402凋亡及其周期的影响.方法:利用MMT染色在普通光镜下观察细胞凋亡形态学变化并观测枸杞多糖对肿瘤细胞的抑制率;通过流式细胞仪分析人肝癌细胞Bel-7402凋亡率、细胞周期变化.结果:经枸杞多糖作用后的人肝癌细胞Bel-7402出现核固缩、凋亡小体、新月状浓染区等细胞凋亡形态学改变,各剂量LBP组的肿瘤细胞均表现生长抑制,且具有剂量依赖性,1000μg/ml LBP处理组的抑制率达96.02%.药物处理组的肿瘤细胞更多地被阻止于G2/M期,各剂量组均出现明显的凋亡变化,大凋亡率可达21.3%.结论:枸杞多糖可明显抑制人肝癌细胞Be1-7402的生长增殖,诱导细胞凋亡,并能改变该肿瘤细胞周期分布,阻止细胞周期于G2/M期.

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