首页 > 文献资料
-
皮质肌动蛋白在不同转移潜能乳腺癌细胞中的表达及意义
目的 筛选不同转移潜能的乳腺癌细胞亚系,并探讨皮质肌动蛋白(cortactin)在乳腺癌细胞增殖和侵袭过程中的作用.方法 经过连续人工基质膜侵袭实验后获得高、低转移潜能的乳腺癌细胞亚系,通过透射电镜观察比较两系细胞的超微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测两系细胞增殖能力,流式细胞仪检测两系细胞周期,Transwell侵袭小室模型比较两系的迁移能力.应用免疫细胞化学法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹分析法检测cortactin蛋白在两系细胞中的表达.结果 利用人工基质膜侵袭实验筛选出高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系,并且两系细胞形态上无明显差异.MTT实验显示高转移潜能细胞体外生长速度显著快于低转移潜能细胞(P<0.05).流式细胞仪检测结果显示,高转移潜能细胞亚系与低转移潜能细胞亚系相比,G0/G1期细胞前者比后者少[(52.67±3.69)%vs(64.46±2.79)%],而S期细胞前者比后者多[(30.53±6.19)%vs(24.63±2.04)%].高转移潜能细胞亚系增殖指数(PI)高于低转移细胞亚系[(47.32±3.69)%vs(35.53±2.80)%,P<0.05],侵袭能力显著强于低转移潜能细胞亚系[(61.46±7.08)/35(25.32±4.87)个/视野,P<0.05].免疫组化、RT-PCR和蛋白质印迹分析均显示在高转移潜能细胞亚系中cortactin在基因和蛋白水平的表达均高于低转移潜能细胞亚系(P<0.05).结论 Cortactin的过表达与乳腺癌的增殖和转移过程密切相关.
-
肝细胞肝癌中神经上皮细胞转化基因1及皮质肌动蛋白表达及其意义
目的 探讨肝细胞肝癌(HCC)神经上皮细胞转化基因1(NET-1)及皮质肌动蛋白表达水平与HCC患者预后的关系.方法 用免疫组化SP法检测103例石蜡标本HCC组织及57例癌旁组织中NET-1和皮质肌动蛋白表达,分析其与临床病理特征和生存率之间的关系.结果 HCC组织中,NET-1和皮质肌动蛋白阳性表达率分别为85.96％和73.68％,高于癌旁组织的59.60％和28.10％(P＜0.01).HCC组织NET-1表达与肿瘤大小、分级、TNM分期和肝硬化背景有关(P＜0.05或P＜0.01).皮质肌动蛋白表达与肿瘤包膜完整性、脉管转移、TNM分期有关(P＜0.05或P＜0.01).HCC中,NET-1和皮质肌动蛋白表达呈显著正相关(r=0.280,P＜0.05).NET-1和皮质肌动蛋白表达均阳性组5年生存率低于两者均阴性组(27.78％ vs.54.54％) (P＜0.05).结论 HCC中的NET-1和皮质肌动蛋白表达增加,可作为评价HCC肿瘤分级、分期及判断预后的重要参考指标.
关键词： 肝细胞肝癌 神经上皮细胞转化基因1 皮质肌动蛋白 -
Cortactin在浸润性乳腺癌组织中的表达及其临床意义
[目的]探讨皮质肌动蛋白(Cortactin)在浸润性乳腺癌组织中的表达及临床意义.[方法]通过免疫组化EnVision法检测Cortactin在120例浸润性乳腺癌组织和20例癌旁组织中的表达情况,分析浸润性乳腺癌组织中Cortactin的表达与临床病理学参数的关系.[结果] Cortactin在浸润性乳腺癌组织中的阳性表达率为68.3％(82/120),显著高于癌旁组织15.0％(3/20).Cortactin表达与乳腺癌病理分级、淋巴结转移、TNM分期、ER、PR及Her-2表达有关(P＜0.05).[结论]Cortactin可能参与乳腺癌的发生、发展,为乳腺癌的治疗提供新的靶点.
-
SGC-7901胃癌细胞株皮质肌动蛋白基因干扰稳定细胞株的构建
目的 构建针对cortactin基因干扰的胃癌SGC-7901稳定细胞株.方法 设计3条针对皮质肌动蛋白(cortactin)基因的短发卡RNA(shRNA)序列以及l条对照序列,退火后插入到PLKO.1慢病毒质粒载体中,质粒构建完成后和辅助质粒psPAX2,PCMV-VSVG共转染HEK293T细胞,包装成慢病毒颗粒,感染胃癌SGC-7901细胞株,并使用嘌呤霉素筛选.终筛选出3个细胞株,提取该3株细胞的RNA和蛋白质分别进行实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测cortactin基因的mRNA和蛋白的表达.结果 在3株不同的稳定细胞株中,PLKO.1+shRNA3细胞株cortactin基因的mRNA和蛋白质表达下降为明显,约为对照组的10％.结论 成功构建出针对cortactin基因干扰的胃癌SGC-7901稳定细胞株.
-
PKC-ζ在大肠良恶性组织中的表达及其与Cortactin蛋白的关系
目的 探讨蛋白激酶C-ζ(PKC-ζ)、皮质肌动蛋白(Cortactin)在大肠癌组织、癌前病变组织(腺瘤性息肉)、正常组织中的综合表达及其意义.方法 采用免疫组织化学SP法,检测三种不同组织中PKC-ζ和Cortactin的表达,分析PKC-ζ、Cortactin在大肠癌中的表达意义、与临床病理因素的关系及其两者表达的相互关系.结果 (1)PKC-ζ和Cortactin表达均数大肠癌组织比大肠腺瘤组织及正常组织高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)PKC-ζ与Cortactin的表达均与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤部位、大小和组织类型无关(P>0.05);(3)PKC-ζ的阳性表达与Cortactin的阳性表达正相关(r=0.574,P<0.05).结论 PKC-ζ和Cortactin可作为大肠癌预后判断及肿瘤分期监测的有价值的指标.联合检测PKC-ζ和Cortactin对预测大肠癌的侵袭转移潜能及评估大肠癌病人的预后有重要意义.PKC-ζ与Cortactin可能作为大肠癌检测的肿瘤标记物和治疗的分子靶点.
