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神经上皮细胞转化基因1对细胞辐射敏感性的影响及其机制探讨
目的 探讨神经上皮细胞转化基因1(Net1)对细胞辐射敏感性的影响及相关的分子作用机制.方法 运用实时荧光定量PCR检测辐射后细胞中Net1基因表达水平的变化;采用RNAi干扰技术抑制细胞中Net1的表达,用克隆形成率分析细胞的辐射敏感性;利用免疫共沉淀技术发现Net1的结合蛋白.结果 电离辐射损伤后,细胞中的Net1 mRNA水平显著上升(t=-10.52,P＜0.05);与对照组相比,siRNA沉默细胞中的Net1表达后明显增加了细胞的辐射敏感性(t=15.31、11.65,P＜0.05);无论在正常状态下还是在细胞受到辐照后,Net1都能与非同源末端连接修复蛋白Ku70、Ku80和DNA-PKcs结合.结论 Net1对细胞的辐射防护作用可能是通过与非同源末端连接修复蛋白相互作用来调控辐射损伤修复实现的.
关键词： 神经上皮细胞转化基因1 辐射敏感性 DNA双链断裂 非同源末端连接 -
shRNA干扰沉默Net1基因对电离辐射损伤反应的影响
目的 研究神经上皮细胞转化基因1(NET1)在电离辐射损伤反应中的生物学功能.方法 运用RNA干扰技术,在细胞中特异性沉默Net1基因,然后通过集落存活实验和免疫印迹法研究抑制Net1表达对细胞的电离辐射损伤反应的影响.结果 Net1敲低表达的细胞对电离辐射的敏感性增强,表现为更多细胞发生了凋亡,并且在γ射线照射后,毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白(ATM)和细胞周期检查点激酶2(Chk2)的磷酸化水平也比对照细胞增强.结论 Net1对于受到电离辐射的细胞有一定的保护作用,很可能在电离辐射损伤修复中具有重要作用.
关键词： 电离辐射 RNA干扰 细胞凋亡 神经上皮细胞转化基因1 -
食管鳞状细胞癌NET1的表达和淋巴管浸润与病理的相关性
目的 探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中神经上皮细胞转化基因1(neuroepithelial cell transforming gene 1,NET1)的表达及D2-40标记的肿瘤淋巴管浸润与病理之间的相关性.方法 采用Western印迹法检测ESCC组织及正常食管组织中NET1蛋白的表达情况,免疫组织化学法检测ESCC中NET1及D2-40的表达情况,观察D2-40标记的淋巴管内癌细胞浸润(lymphatic vessel invasive,LVI)的情况,分析NET1、LVI与临床病理指标之间的关系及患者5年生存率的差异.结果 NET1在ESCC组织中阳性表达率(++/+++)为61.3％ (20.4％/40.9％) (49/80),正常食管组织中表达阳性率为10.5％ (2/19),2例均为弱阳性(+),LVI在ESCC组织中的阳性率为36.3％ (29/80),NET1高表达、LVI阳性与ESCC的淋巴结阳性转移、临床分期呈正相关(P＜0.05),与肿瘤的神经血管侵犯相关(P＜0.05),而与性别、年龄、组织学分级无明显相关性(P＞0.05).NET1高表达与LVI阳性密切相关(P=0.012),NET1高表达或LVI阳性的ESCC患者术后的生存率明显降低,而且同时存在NET1高表达和LVI阳性的ESCC患者术后5年生存率低.结论 联合检测NET1及LVI可以提高对食管鳞癌患者的术后临床病理分期及预后的判断的准确性.
关键词： 神经上皮细胞转化基因1 D2-40 食管鳞状细胞肿瘤 淋巴管浸润 -
肝细胞肝癌中神经上皮细胞转化基因1及皮质肌动蛋白表达及其意义
目的 探讨肝细胞肝癌(HCC)神经上皮细胞转化基因1(NET-1)及皮质肌动蛋白表达水平与HCC患者预后的关系.方法 用免疫组化SP法检测103例石蜡标本HCC组织及57例癌旁组织中NET-1和皮质肌动蛋白表达,分析其与临床病理特征和生存率之间的关系.结果 HCC组织中,NET-1和皮质肌动蛋白阳性表达率分别为85.96％和73.68％,高于癌旁组织的59.60％和28.10％(P＜0.01).HCC组织NET-1表达与肿瘤大小、分级、TNM分期和肝硬化背景有关(P＜0.05或P＜0.01).皮质肌动蛋白表达与肿瘤包膜完整性、脉管转移、TNM分期有关(P＜0.05或P＜0.01).HCC中,NET-1和皮质肌动蛋白表达呈显著正相关(r=0.280,P＜0.05).NET-1和皮质肌动蛋白表达均阳性组5年生存率低于两者均阴性组(27.78％ vs.54.54％) (P＜0.05).结论 HCC中的NET-1和皮质肌动蛋白表达增加,可作为评价HCC肿瘤分级、分期及判断预后的重要参考指标.
关键词： 肝细胞肝癌 神经上皮细胞转化基因1 皮质肌动蛋白
