首页 > 文献资料
-
糖尿病大鼠局灶脑缺血/再灌损伤与脑组织TGF-β1 mRNA表达
在糖尿病高血糖情况下，明显加重缺血性脑损伤可能与乳酸堆积，兴奋性氨基酸，自由基及Ca2+超负荷有密切关系。已报告转化生长因子(TGF)可以使神经元细胞免受缺氧及兴奋性氨基酸的毒性作用，可以降低鼠和兔局灶脑缺血的梗死体积〔1，2〕，但是对于糖尿病脑梗死后细胞因子如TGF-β1 mRNA变化所知甚少。本研究在糖尿病模型基础上，进行脑局灶缺血及再灌注模型(MCAO)制备，研究糖尿病脑缺血/再灌注后脑组织内TGF-β1 mRNA表达的变化。 一、材料与方法 1.动物模型建立与分组：(1)糖尿病动物模型制备：雄性Wistar大鼠100只，体重200～250 g。禁食12小时，分为两组。实验组一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg，对照组只注射相应缓冲液，自由进食饮水。注射STZ后72小时测血糖大于16.7 mmol/L、尿糖持续阳性者选定为糖尿病模型动物。每周测体重一次，饲养2个月。(2)MCAO模型的制备：按刘亢丁〔3〕改良的腔内线栓法造成脑缺血。分成以下各组：糖尿病及对照组分别缺血2小时，缺血2小时后再灌24小时及假手术组，每组8只。 2.检测指标及方法：(1)梗死体积评定：动物于缺血再灌不同时间点断头处死。从额极开始间隔2.5 mm额状切片，立即置于1% 四氮唑化合物生理盐水中，37℃，30 min。未缺血区呈红色，梗死区呈白色。利用图像分析仪测定梗死面积后计算梗死体积。(2)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测缺血再灌流后脑组织TGF-β1 mRNA含量：组织总RNA的提取采用异硫氰酸胍法。用紫外分光光度计测定所获RNA的A260/A280处的OD比值为1.89±0.08，经电泳每组均见28s及18s核糖体RNA条带，其OD比值接近于2。引物由上海生物工程公司合成。序列为：TGF-β1有义链5'-ACCCGCGTGCTAATGGTGGAC-3'，反义链5'-GAGCAG～GAAGGGTCGGTTCAT-3',产物453bp;r-actin有义链5'-ATGGAAGAAGAAATCGCCGC-3'，反义链5'-ACACGCAG～CTCGTTGTAGAA-3'，产物287bp。应用华美公司提供RT-PCR所需的酶及缓冲液系统，进行TGFβ1 mRNA RT-PCR扩增。电泳后摄片，激光密度扫描仪扫描底片，并计算曲线下峰面积作为PCR产物的含量。
-
黄鼠与大鼠离体心脏预缺血处理对缺血再灌损伤的保护作用
本文用黄鼠和大鼠离体心脏比较了两种预缺血处理方案对随后缺血再灌损伤的作用.用Langendorff方法灌流秋季未入眠的达乌尔黄鼠和Wistar大鼠离体心脏,以冠脉流出液中肌酸激酶(CK)释放活性、心律失常发生率、心功能恢复等为指标,检验不同预缺血处理时间对随后缺血再灌损伤的影响.标本平衡10 min后对照组的两种动物经受缺灌15 min再灌15 min预缺血处理,接着进行两次缺灌10 min再灌10 min.实验组的两种动物经受3次短阵性每阵缺灌5 min和再灌5 min的预缺灌处理,接着进行两次缺灌10 min再灌10 min.结果表明,对照组两种动物在第二次缺灌10 min期内肌酸激酶(CK)释放均较预缺灌期明显增加,两种动物的增加幅度基本一致,再灌10 min期内CK释放也未见明显减小,说明一次性预缺灌15 min对第二次缺灌10 min未表现保护作用.实验组两种动物在第二次缺灌和再灌10 min期内CK释放均较预缺灌期明显下降,且两种动物的下降幅度也基本一致.此外,实验组两种动物的心律失常发生率也都明显低于对照组.两种动物间比较,实验组的黄鼠较大鼠经预缺灌处理后对随后缺血再灌损伤具有更明显的保护作用.上述结果提示,黄鼠和大鼠心脏经3次短阵预缺灌对随后较长时间缺灌和再灌损伤都有明显保护作用,且黄鼠较大鼠更突出.
-
强力宁对家兔心肌缺血再灌注损伤时红细胞内MDA及血浆中TXB2、6-keto-PGF1α含量的影响
以MDA、TXB2、6-keto-PGF1α变化为依据,观察强力宁对家兔心肌缺血再灌注损伤的影响.结果表明,强力宁能抑制兔心肌缺血再灌注后的脂质过氧化反应及花生四烯酸代谢,减轻心肌缺血再灌注损伤.
