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蒲葵子总黄酮提取工艺的优化及其体外抗肿瘤活性
目的 优化蒲葵子总黄酮提取工艺,并评价其体外抗肿瘤活性.方法 以提取时间、超声功率、乙醇体积分数、液料比为影响因素,总黄酮提取率为评价指标,星点设计-效应面法优化提取工艺.然后,MTT法检测总黄酮对SGC7901、HepG2、A549细胞的抑制作用.结果 佳条件为提取时间30 min,超声功率80 Hz,乙醇体积分数65%,液料比30∶1,总黄酮提取率11.59%.与阴性对照比较,总黄酮对3种肿瘤细胞均具有显著抑制作用(P <0.05,P<0.01),并呈量效关系,48 h内大抑制率分别为83.77%、93.33%、74.39%.结论 该方法稳定可靠,可用于提取具有较强体外抗肿瘤活性的蒲葵子总黄酮.
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雷公藤内酯醇对小鼠腹腔巨噬细胞杀伤活性的影响
雷公藤内酯醇(triptolide,TP)是从卫矛科雷公藤属木质藤本植物雷公藤(tri-pterygium wilfordii hookf)中分离到的二萜内酯化合物,又称雷公藤甲素.近年的研究相继发现TP有抗炎、抗生育、抗肿瘤、抗菌免疫抑制活性[1].但其在免疫抑制过程中对巨噬细胞杀伤活性的影响却未见报道.本文以小鼠腹腔巨噬细胞为细胞模型,观察了TP对其杀伤活性的影响,旨在为进一步研究TP的药理作用提供实验基础.
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紫七软肝方含药血清对巨噬细胞条件培养液诱导肝星状细胞活化后增殖的影响
目的:探讨以清化湿热瘀毒法组方的紫七软肝方含药血清对巨噬细胞条件培养液诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化增殖的影响.方法:体外应用巨噬细胞条件培养液培养诱导HSC-T6活化,在2.2、1.1、0.55 9·ml-1质量浓度的紫七软肝方含药血清分别对其作用24h、48h和72h后,MTT法检测其对HSC-T6增殖的影响.结果:紫七软肝方含药血清对活化后HSC-T6具有显著的抑制作用(P<0.01),且优于黄芪一贯煎方组,高浓度紫七软肝方组的抑制作用优于秋水仙碱组,中、低浓度组不及秋水仙碱组.结论:肝纤维化病程中“湿热瘀毒”为疾病病理因素,根据“清化湿热瘀毒法”拟制的紫七软肝方对肝星状细胞的活化增殖有一定抑制作用,可能是其抗肝纤维化的作用机制之一..
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水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721的影响
目的:研究水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法:采用MTT法研究水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及时效量效关系;并通过PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法观察水红花子黄酮类成分作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及细胞凋亡率.结果:水红花子黄酮类成分能调节SMMC-7721人肝癌细胞株Gl/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且具有明显的时效及量效关系.结论:水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,且抑制作用和时间剂量成线性关系,其作用机制为抑制肿瘤细胞的增殖和诱导该细胞的凋亡.
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血清浓度对TGF-β1刺激成纤维细胞增殖的影响
目的 比较低血清浓度(0.4%)和正常血清浓度(10%)培养条件对TGF-β1刺激成纤维细胞增殖的影响.方法 原代大鼠皮肤成纤维细胞分别采用0.4%和10%血清浓度培养,加TGF-β1刺激细胞后,分别用BrdU ELISA法检测细胞增殖情况,噻唑蓝(MTT)比色法制作细胞生长由线.结果 0.4%和10%血清浓度下,250pg/ml TGF-β1均促进成纤维细胞增殖(P<0.01),并促使生长曲线的峰值提前和增加.而25ng/ml TGF-β1均抑制成纤维细胞增殖(P<0.05),并导致生长曲线峰值的滞后和降低.结论 血清浓度对大小荆量TGF-β1刺激成纤维细胞增殖变化无明里影响.
关键词: 血清 TGF-β1 细胞增殖 MTF法 BrdU ELISA法