首页 > 文献资料
-
大黄粉虫幼虫体内黑色素合成相关蛋白的鉴定
目的 鉴定大黄粉虫幼虫体内与酚氧化酶(PO)诱导的黑色素合成相关的蛋白(MAPs).方法 体外诱导大黄粉虫幼虫血淋巴中黑色素合成反应,对上清液中的蛋白质进行SDS-PAGE分析,比较黑色素合成前后、合成过程中及在苯硫脲存在下蛋白质的变化,对黑色素合成过程中消失的蛋白进行氨基端氨基酸序列分析.结果 6条蛋白带(MAP-1～6)呈时间依赖性地从黑色素合成反应的上清液中消失,苯硫脲可阻断此反应而取消蛋白的消失;氨基端氨基酸序列分析表明MAP-1,2为已知的大黄粉虫卵黄素样蛋白,MAP-3,4,5为未知蛋白,MAP-6为已知的大黄粉虫干燥蛋白.结论 大黄粉虫幼虫血淋巴中至少5种蛋白与PO诱导的黑色素合成反应特异性相关.
-
三叶青脂溶性提取物对A375细胞增殖及黑色素合成的影响
目的 探讨三叶青三氯甲烷提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响.方法 采用MTT比色法,测定不同浓度三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞体外抑制作用；比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素含量；采用光学显微镜法观察其对细胞形态的影响.结果 三叶青三氯甲烷提取物在6 - 500 μg/ml浓度范围内对A375细胞增殖有显著的抑制作用(P＜0.01),且呈时间-剂量依赖性；浓度小于50μg/ml时,对酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加趋势；在100～500μg/ml时,对A375肿瘤细胞有较强的抑制作用；光学显微镜下可见典型凋亡细胞形态学改变.结论 三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成具有抑制作用.
-
紫铆花素对黑色素瘤细胞与角质形成细胞共培养体系中黑色素合成的影响
目的 探讨不同浓度紫铆花素对黑素瘤细胞A375与角质形成细胞Hacat共培养体系细胞增殖、酪氨酸酶(TYR)活性、黑色素合成及酪氨酸相关蛋白1(TRP-1)、酪氨酸相关蛋白2(TRP-2)mRNA表达的影响.方法 建立黑色素瘤细胞A375与角质形成细胞Hacat共培养体系,以不同浓度紫铆花素处理共培养体系48 h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖,氢氧化钠(NaOH)裂解法测定细胞黑色素含量,多巴氧化速率法测定黑色素细胞TYR活性,实时荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测TRP-1、TRP-2基因表达.结果 与细胞共培养体系(即阴性对照组)比较,1.0,5.0μg·mL-1紫铆花素与共培养体系细胞共孵育48 h后,可明显促进共培养细胞增殖(P<0.05或P<0.01),促进黑色素细胞TYR活性(P<0.05或P<0.01);在0.5～50μg·mL-1范围内,紫铆花素可促进共培养体系黑色素合成(P<0.05或P<0.01);在0.1～0.5μg·mL-1范围内,紫铆花素各剂量组TRP-1 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01);在0.5～5.0μg·mL-1范围内,紫铆花素各剂量组TRP-2 mRNA表达升高(P<0.01).讨论紫铆花素可能通过促进TYR活性和TRP-1、TRP-2 mRNA表达增强共培养体系黑色素合成功能.
-
驱虫斑鸠菊粗提物促进人皮肤组织黑色素合成的研究
目的 建立组织培养人皮肤模型并探讨驱虫斑鸠菊提取物[Vernonia anthelmintica(L.)extract,AVE]在该模型下对人皮肤组织黑色素合成功能的影响及可能的作用机制.方法 采用HE染色法观察不同培养条件对组织培养的人皮肤形态的影响,HE染色法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测不同浓度AVE对人皮肤组织毒性的影响,NaOH裂解法、L-Dopa氧化法检测AVE对人皮肤组织黑色素含量及酪氨酸酶活力的影响,免疫组化法和Western blot法观察AVE对组织培养的人皮肤S100和黑色素合成关键蛋白表达的影响.结果 以William's E培养基为基础培养的人皮肤组织结构完整,形态良好.在组织培养的人皮肤模型中,AVE剂量依赖性的促进黑色素合成和酪氨酸酶活性.AVE能够上调黑色素合成关键调控因子MITF及相关蛋白(TYR、TRP-1和TRP-2)与S100的表达.结论 AVE通过上调MITF及其调控的黑色素合成相关蛋白表达与黑色素细胞的增殖促进人皮肤组织的黑色素生成.
-
三叶青提取物对A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响
目的 探讨三叶青乙醇提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响.方法 采用MTT比色法,测定不同浓度三叶青乙醇提取物对A375细胞体外抑制作用；比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素含量.结果 在质量浓度为1～625μg/ml范围内,随着三叶青乙醇提取物浓度增大可抑制A375细胞的增殖(P＜0 01)；三叶青乙醇提取物浓度在1～5 μg/ml时,对酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加趋势；而在25 ～625 μg/ml时,对A375细胞有一定毒性.结论 三叶青乙醇提取物在一定浓度范围内(1～ 625 μg/ml)能抑制A375细胞的增殖,且呈剂量依赖关系.
-
马鞭草经皮透过液对B16黑色素瘤细胞的作用
目的 研究马鞭草经皮透过液对B16黑色素瘤细胞的作用,在细胞水平上验证其具有美白活性.方法 使用MTT法测定马鞭草经皮透过液对B16细胞增殖的影响;L-Dopa氧化法测定经皮透过液对B16黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性的影响;NaOH裂解法测定细胞内黑色素含量的影响;DAPI染色法检测细胞凋亡情况.结果 马鞭草经皮透过液对B16黑色素瘤细胞的增殖、酪氨酸酶活性以及细胞内黑色素含量均有抑制作用,且其浓度越高抑制作用越强.结论 马鞭草经皮透过液不仅影响B16黑色素瘤细胞的增殖,同时也影响细胞内酪氨酸酶的活性以及黑色素的合成,提示马鞭草具有对皮肤美白活性的功效,对开发成天然美白产品具有良好前景.
-
和厚朴酚对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖以及黑色素合成的影响
目的 探讨和厚朴酚对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖以及细胞内黑色素合成的影响.方法 体外培养小鼠B16细胞,MTT法检测和厚朴酚对B16细胞增殖的影响;DAPI染色法观察和厚朴酚对B16细胞细胞形态的影响;NaOH裂解法检测和厚朴酚对黑色素含量的影响.结果 和厚朴酚浓度为5、10、20、40、80 μmol/L 作用B16细胞,在不同的用药时间12、24和48 h,和厚朴酚对B16细胞增殖的IC50分别为23.4、13.1和11.4 μmol/L;同时和厚朴酚作用B16细胞12 h后,经DAPI染色,B16细胞呈现典型的凋亡形态;另外采用20、40、80 μmol/L的和厚朴酚分别作用B16细胞,B16细胞内黑色素合成量也呈现降低的趋势.结论 和厚朴酚能有效地抑制B16细胞增殖,且其抑制作用具有时间和浓度依赖性;药物作用后的B16细胞呈现凋亡形态并出现凋亡小体;和厚朴酚对B16细胞内黑色素合成也呈现抑制作用但不明显.
-
胶原三肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响
目的:研究胶原三肽对B16黑素瘤细胞的影响,探讨其美白作用与机制.方法:本文以B16黑素瘤细胞作为受试细胞,以浓度为10μg/m1曲酸作为阳性对照,研究胶原三肽对其增殖、细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响.结果:胶原三肽浓度范围为50～400μg/m1时对B16黑素瘤细胞增殖无明显影响,但均能显著抑制黑色素合成.且400μg/ml胶原三肽抑制酪氨酸酶活性具有极显著性.结论:胶原三肽具有一定的美白功能.
-
菟丝子水提物对黑色素合成的影响
目的 研究菟丝子水提物对黑色素合成的影响.方法 以斑马鱼胚胎为模型,检测不同浓度的菟丝子水提物对斑马鱼胚胎黑色素细胞形态、酪氨酸酶活性、黑色素含量的作用,及酪氨酸酶表达的情况.结果 菟丝子水提物可以降低斑马鱼胚胎酪氨酸酶活性,减少黑色素的生成,作用强度与药物浓度呈依赖性,2mg/mL菟丝子水提物与50μg/mL熊果苷作用相似,但对酪氨酸酶蛋白表达并无明显影响.结论 菟丝子水提物可以作用于斑马鱼胚胎黑色素细胞的酪氨酸酶,抑制黑色素合成.
