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β-半乳糖酶文献资料
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诱导型启动子在谷氨酸棒杆菌ATCC13032中调控强度的分析
目的 研究诱导型启动子Ptrc、Ptac、ParaBAD、Prha、Ptet在谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)AT℃C13032生长迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期的相对转录强度.方法 在待测启动子后连接报告基因β-半乳糖酶基因LacZ克隆入质粒pMBBL,并转入谷氨酸棒杆菌ATCC13032.取菌体生长迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期四个时期诱导和不诱导的细胞,经超声波粉碎后,检测半乳糖酶的酶活.结果 通过菌株生长曲线,确定3、11、24和48 h为菌种生长迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期的取样时间点.启动子在不同生长时期转录强度不同,以Ptrc为例,转录强度由强至弱依次为诱导培养24h＞48h＞11 h＞3h;添加诱导剂条件下,培养11h启动子表达相对强度由强至弱依次是Ptrc＞ Ptet＞ParaBAD＞ Ptac＞ Prha.结论 各种诱导型启动子的表达强度在有无诱导剂的条件下显著不同.
