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30周龄笼养海蓝褐壳蛋鸡盲肠中优良乳酸菌的筛选
目的 对笼养蛋鸡盲肠中的优良乳酸菌进行筛选与鉴定.方法 以30周龄笼养海蓝褐壳蛋鸡盲肠分离纯化得到10株乳酸菌为试验菌,通过发酵产酸力、耐酸性和耐胆盐的筛选试验,获得产酸能力高、对酸和胆盐有高耐受力的乳酸菌,进行生长曲线和产酸曲线及对抗生素的耐受力的测定,并采用APICHL50试剂条对选出的乳酸菌进行鉴定.结果 10株乳酸菌在发酵起始时间点时pH在6.10 ～6.40,经过48 h的发酵阶段,发酵液的pH明显降低;酸性环境和胆盐对各菌株存活率均有抑制.CL1、CL12和CL54生长较快,佳生长和产酸发酵时间是24 h,CL26和CL31生长相对较慢,到32 h时生长曲线达到高点;对抗生素的耐受力检测结果显示,CL1、CL12和CL54对抗生素的耐受力很高,而CL26和CL31对抗生素的耐受力较弱.结论 对CL1、CL12和CL54这三株菌进行种属鉴定.根据API CHL50生化鉴定条说明进行接菌发酵试验,经对照鉴定,CL1为Lactococcus Lactis ssp Lactis1(乳酸乳球菌亚种1),CL12为Pediococcus Acidilactici(乳酸片球菌),CL54为Lactobacillus Brevis1(短乳杆菌1).
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新疆传统发酵乳品中乳酸菌与酵母菌的益生特性
目的 观察新疆传统发酵乳品中分离的14种菌株的生长特点及产酸能力,筛选出具有较强耐胆盐能力,并能在人工胃肠液中存活的菌株.方法 对10株乳酸菌和4株酵母菌进行生长曲线、pH、耐胆盐能力和耐人工胃肠液检测.结果 10株乳酸菌和4株酵母菌具有良好的生长曲线和产酸能力;马乳酒样乳杆菌具有较强的耐胆盐能力;希氏乳杆菌、马乳酒样乳杆菌、乙醇假丝酵母和东方伊萨酵母具有较强的耐人工胃液能力;乳酸乳球菌、哈尔滨乳杆菌、瑞士乳杆菌、马乳酒样乳杆菌、乙醇假丝酵母和东方伊萨酵母具有较强的耐人工肠液能力.结论 10株乳酸菌和4株酵母菌具有优良的益生特性,有望成为益生菌制剂的备用菌株.
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昂立植物乳杆菌耐酸、耐胆盐性能及相关表型、基因型分析
目的从益生菌功能性评价出发,探讨昂立植物乳杆菌(LP-Onlly)的耐酸、耐胆盐性能及其相关的表型和基因型信息.结果 LP-Onlly在耐酸、耐胆盐性能方面,优于其他实验室保存菌株,在pH 3、37 ℃培养3 h后,LP-Onlly活菌存活率达95%以上.在1.0%胆盐的MRS培养液中生长24 h后,LP-Onlly活菌存活率达95%以上.经表型及分子鉴定,LP-Onlly为植物乳杆菌,其16S rDNA序列保存于GenBank, 登录号为AY 590777,与实验室保存的其他植物乳杆菌的基因DNA指纹图谱相似率达71%.
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六株乳杆菌胃肠道定植能力分析
目的 分析确定Lactobacillus Acidophilus(L.acidophilus)1.1等六株乳杆菌胃肠道定植能力强弱.方法 通过模拟人体胃酸环境(pH 3)和高胆盐环境(胆盐含量:0.1％～0.3％),及用胶原蛋白和人结肠癌细胞SW-480模拟人肠道黏附环境,利用MTT法分别测定六株乳杆菌在酸性和高胆盐环境下37℃作用4h后的存活菌率及与黏附介质作用1h后的黏附率.结果 六株乳杆菌均具有一定的耐酸和耐胆盐能力,以及不同程度的胶原蛋白及肠道细胞黏附能力,其中以L.acidophilus 1.2相对为突出.结论 L.acidophilus 1.2等六株乳杆菌均能够不同程度的黏附定植在胃肠道中,发挥其益生作用,是较为理想的胃肠道微生态制剂候选菌株.
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人源乳酸杆菌耐酸耐胆盐能力的测定和鉴定
目的:通过模拟正常人体胃内状态,探讨所筛选4株人源乳酸杆菌耐酸耐胆盐的能力,并进行系统生化鉴定.方法:乳酸杆菌在不同pH值(pH2～4.5)和不同浓度胆盐(0.1%～0.3%)的MRS肉汤中培养4 h后,测定其活菌数及存活率.用API50CHL微量生化反应试剂盒进行菌种鉴定.结果:4株乳酸杆菌能够耐受pH 3的酸度(存活率6.6%～71.8%)和0.3%的胆盐(存活率9.2%～31.8%),其中22号菌和31号菌在pH 4～4.5的环境中能保持生长活性.12号菌和31号菌耐受胆盐的能力较强.经鉴定,其中3株为唾液乳酸菌,1株为植物乳酸菌.结论:株乳酸杆菌均表现出较好的耐酸耐胆盐能力,其中以12号菌耐受能力强,有必要进一步评价其体内生存活性.
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两株耐酸耐胆盐人肠源菌株的鉴定及系统发育分析
目的 对两株来源于健康人肠道的耐酸耐胆盐菌株R92-2和R111进行鉴定和系统发育分析,以筛选优良的宿主菌株为终构建能高效表达和分泌β-半乳糖苷酶的工程菌奠定基础.方法 表型特征分析后,利用163 rDNA 两端的保守序列作为PCR引物,扩增两株菌的168 rDNA序列并测序,测序结果于GenBank中Blastn并构建系统发育树.结果 表型特征分析初步鉴定两株菌为乳酸菌.R92-2 的 16S rDNA 序列与 Weissella cibaria的 16S rDNA 序列同源性为 100%;R111 的163 rDNA序列与Enterococcus faecium 的16S rDNA序列同源性为100%.结论 R92-2 为 Weissella cibaria;R111 为 Enterococcus faecium.两株菌有望用于构建能高效表达和分泌β-半乳糖苷酶的工程菌.
