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交通相关PM2.5通过钙信号通路调控Jurkat T细胞IL-2的释放
目的 探讨交通相关PM2.5对Jurkat T细胞白介素-2(IL-2)的影响及钙信号通路对IL-2释放的调控作用.方法 以100 μg/ml的PM2.5染毒Jurkat T细胞,以生理盐水为对照组,并用钙调磷酸酶拮抗剂环孢菌素A(CSA)、钙离子螯合剂(EGTA)进行干预,设置空白滤膜组、EGTA组和CSA组平行对照,染毒时间为3、6和24 h.ELISA方法测定细胞上清IL-2水平；QRT-PCR测定细胞钙调磷酸酶(CaN)、活化T细胞转录因子(NFAT)的mRNA表达；免疫荧光法观察NFAT核分布情况.结果 交通相关PM2.5染毒细胞3、6和24 h后,100 μg/ml PM2.5组IL-2水平明显低于空白滤膜和生理盐水组,但高于100 μg/ml PM2.5+CSA组、100 μg/ml PM2.5+EGTA组,差异均有统计学意义(P＜0.05),并且随着时间的延长,IL-2表达水平呈降低趋势.100 μg/ml PM2.5组的NFAT、CaN mRNA表达水平高于对照组、100μg/ml PM2.5+CSA组、100 μg/ml PM2.5+EGTA组,差异均具有统计学意义(P＜0.05).PM2.5能够使NFAT蛋白脱磷酸化而活化,可移位至细胞核内.白介素-2表达水平与NFAT基因、CaN基因表达水平呈负相关,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 交通相关PM2.5可抑制Jurkat T细胞释放IL-2,Ca2+-CaN-NFAT信号通路可能参与调控PM2.5对Jurkat T细胞IL-2的释放.
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环孢菌素-A对男性结核性胸膜炎免疫调节的体外实验分析
目的 通过体外实验探讨钙调神经磷酸酶抑制剂环孢菌素-A对男性结核性胸膜炎免疫调节的影响.方法 选取30例确诊结核性胸膜炎的男性患者为受试对象,于治疗前经无菌术采集胸腔积液,以人淋巴细胞分离液及贴壁培养法分离其中细胞;细胞提纯后经免疫细胞化学染色法检验细胞类型,调细胞浓度为l×106/ml.将每例患者采集的胸腔积液样本等分为3份,分别设立为空白对照组(未予以药物干预)、多抗甲素组(孔内依次加入浓度为0.1μg/ml、10.0μg/ml、50.0μg/ml的多抗甲素)和实验组(孔内依次加入浓度为10.0μg/ml、30.0μg/ml、50.0μg/ml的环孢菌素-A);十二孔培养板内培养液均为2ml,三组均分别设立3个复孔对应3个不同时间点(oh、24h和72h).经酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同时间点各组上清液及培养液中r干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)的浓度差异.结果 免疫化学ABC法鉴定结果显示,30例受试者胸腔积液中分离所得的细胞多数着色,且表现为棕色,有CD4+抗原决定簇,确定为CD4+T淋巴细胞.24h和72h时,三组样本IFN-γ、IL-12水平均较0h显著降低(P＜0.05),但72h检测结果高于24h时,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组和多抗甲素组24h和72h时,不同浓度药物处理后IFN-γ、IL-12水平均明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);24h和72h时,三组样本TGF-β、IL-4水平均较0h显著降低(P＜0.05),且72h检测结果明显低于24h时,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组和多抗甲素组24h和72h时,不同浓度药物处理后TGF-β、IL-4水平均明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 环孢菌素-A对男性结核性胸膜炎患者有一定免疫调节作用,有利于病情转归,可在临床进一步推广.
关键词： 钙调神经磷酸酶抑制剂 环孢菌素-A 结核性胸膜炎 调节作用
