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氟化钠对小鼠睾丸间质瘤细胞StAR和P450scc mRNA表达的影响
目的 观察氟化钠对小鼠睾丸间质瘤细胞( mLTC-1)中类固醇急性调节蛋白(StAR)和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc) mRNA表达水平的影响.方法 利用小鼠mLTC-1细胞为模型,用实时定量PCR法测定细胞中StAR和P450scc mRNA表达水平.采用放射免疫法测定细胞培养基上清中孕酮分泌量.结果 与对照组比较,12、16和20μg/ml氟化钠浓度组的StAR和P450scc mRNA的表达量以及孕酮分泌量明显降低(P＜0.05).结论 氟化钠可以抑制mLTC-1细胞StAR和P450scc mRNA的表达,进而影响mLTC-1细胞孕酮的合成.
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膜联蛋白5对雄性SD大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响
目的 研究注射膜联蛋白5后雄性SD大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450 cholesterol side-chain cleavage enzyme,P450scc)和3β-羟类固醇脱氢酶(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)表达的改变,初步探讨膜联蛋白5影响睾酮分泌的机制.方法 将20只SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组又分为7.5μg/kg组、15μg/kg组和30μg/kg组,每组5只.对照组大鼠腹腔注射等量的pH 8.0Tris-HCl,实验组腹腔注射不同剂量的膜联蛋白5,1次/d,连续20d.用RT-PCR方法分别检测对照组和各实验组SD大鼠睾丸组织中睾酮合成相关的StAR、P450scc和3β-HSD mRNA的表达变化,并用Western blot方法检测以上3种物质蛋白质水平的变化.结果 与对照组相比,在mRNA水平上,7.5μg/kg组和15μg/kg组大鼠睾丸组织P450scc mRNA表达分别增加了25.9%[(0.68±0.04) vs (0.54±0.03),P<0.01]和27.8%[(0.69±0.04) vs (0.54±0.03),P<0.01];3β-HSD mRNA表达分别升高了32.9%[(1.05±0.07) vs (0.79±0.10),P<0.01]和53.2%[(1.21±0.07) vs (0.79±0.10),P<0.01];而30μg/kg组表达差异无统计学意义;在蛋白水平上,15μg/kg组大鼠睾丸组织P450scc蛋白表达提高了34.2%[(0.37±0.04) vs (0.28±0.02),P<0.01],7.5μg/kg组和15μg/kg组的3β-HSD表达也分别增加了14.7%[(1.53±0.10) vs (1.34±0.05),P<0.01]和24.4%[(1.67±0.14) vs (1.34±0.05),P<0.01];而StAR的表达无论在转录水平还是在蛋白水平上,较对照组差异均无统计学意义.结论 膜联蛋白5可通过调节P450scc与3β-HSD的表达来调节睾酮合成.
关键词： 膜联蛋白5 类固醇急性调节蛋白 胆固醇侧链裂解酶 3β-羟类固醇脱氢酶 -
类脂性肾上腺皮质增生症1例
类脂性肾上腺皮质增生症(lipoid congenital adrenal hyperplasia,LCAH)是类固醇激素合成过程中严重和罕见的一种遗传病,临床呈现失盐、肾上腺皮质功能减退、男性假两性畸形和女性性幼稚等表现.
关键词： 类脂性肾上腺皮质增生 类固醇急性调节蛋白 突变 -
蛇床子素对TM3小鼠睾丸间质细胞增殖及雄激素合成与分泌的影响
目的:研究蛇床子素对体外培养的睾丸间质细胞雄激素合成与分泌的影响.方法:以TM3小鼠睾丸间质细胞为实验对象,采用1 ～ 320μmol/L蛇床子素干预TM3细胞24h、48h和72h,以MTT检测细胞增殖;采用5～80μmol/L蛇床子素干预TM3细胞24h和48h,RT-qPCR技术检测雄激素合成酶相关基因mRNA表达;采用80 μmol/L蛇床子素干预TM3细胞15rain～ 12h,RT-qPCR技术检测即刻早期基因mRNA表达,并运用Western blot方法检测CYP17A1蛋白表达,ELISA方法检测细胞分泌液睾酮含量.结果:与对照组(Con)比较,160～320μmol/L蛇床子素作用48h和72 h均显著抑制TM3细胞增殖.不同浓度蛇床子素干预TM3细胞24h和48h后,与对照组比较,40μmol/L和80μmol/L蛇床子素显著促进类固醇急性调节蛋白(Star)基因表达;80 μmol/L蛇床子素显著促进胆固醇侧链裂解酶(Cypll a1)基因表达;大于20μmol/L蛇床子素显著增强细胞色素P45017α1羟化酶(Cyp17a1)基因表达、尤其是干预48h上调幅度更大,但是对CYP17A1蛋白表达无明显作用;也显著促进3β类固醇脱氢酶(Hsd3b2)基因表达;大于10μmol/L蛇床子素干预24h可显著促进黄体生成素受体(Lhr)基因表达.此外,80μmol/L蛇床子素干预12h可显著促进Star和Nr4a2基因表达,作用15min～1h即可显著增强Nr4a1基因表达.且蛇床子素可升高TM3细胞睾酮水平.结论:蛇床子素具有促进小鼠睾丸问质细胞雄激素合成与分泌的药理作用.
