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硫化氢通过缺氧诱导因子1α促进张应力下骨髓间充质细胞的成骨
背景:有研究表明当归多糖有补血活血作用,但其如何改善骨髓造血微环境,促进造血功能成为研究问题热点之一.目的:观察当归多糖对小鼠骨髓造血干细胞及基质细胞表面细胞间黏附分子1水平的影响.方法:建立失血性贫血模型小鼠,随机分为3组,当归多糖低、高剂量组连续腹腔注射等量相应浓度的当归多糖4,6 mg/kg,对照组则同样时间内注射等量的生理盐水,共干预6 d.动态观察小鼠一般情况;全自动血细胞分析仪检测不同时间点小鼠外周血中红细胞的数量;采用磁珠分选和流式细胞术检测骨髓中造血干细胞的数量;MTT法检测骨髓基质细胞的增殖情况;采用流式细胞术检测骨髓基质细胞表面的细胞间黏附分子1的表达.结果与结论:当归多糖对失血性贫血小鼠体质量无明显影响(P>0.05).当归多糖低、高剂量组外周血红细胞数、骨髓CD34+,Sca-1+细胞百分数、骨髓基质细胞数量及其表面细胞间黏附分子1均明显高于对照组(P<0.05),其中高剂量组效果优于低剂量组.结果说明,当归多糖通过促进骨髓基质细胞增殖,增强细胞间黏附分子1的表达,进而促进造血干细胞增殖并影响其功能活动.
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改良亚甲基蓝法测定血浆硫化氢
硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)作为新的气体信号分子参与多系统生理及病理生理功能的调节,并受到学术界广泛关注.但迄今为止,血液中H2S浓度的检测依旧是本领域的一大难题.本文旨在建立一种简易的改良亚甲基蓝分光光度计法,提高亚甲基蓝法检测H2S浓度的敏感性.亚甲基蓝法测定血浆H2S时,大量血浆蛋白会影响测定结果.本方法先加入过量醋酸锌溶液使血浆中游离H2S、HS-、S2-形成ZnS沉淀,并使血浆蛋白变性析出；加入5 mol/L NaOH强碱溶解变性的蛋白,而ZnS沉淀不溶于强碱；离心去除大量蛋白质；再加入0.2％N,N-二甲基对苯二胺盐酸盐溶液使ZnS完全溶解,用三氯乙酸沉淀剩余蛋白质,后用分光光度计法测定H2S浓度.结果显示,各种离子甚至硫酸根离子以及硫代硫酸根离子不影响该方法检测的特异性.而向样本中添加4.5％白蛋白可降低检测数值,表明H2S与蛋白质结合影响本方法的检测,而且该方法不能检测全部与蛋白结合的H2S.该方法回收率为81.9％,表明该方法的精确度基本达到要求.利用该方法检测到65名健康志愿者的冻存血浆样本H2S浓度为(13.93±4.98) μmol/L,且SD大鼠新鲜和冻存后血浆H2S浓度之间没有明显差异.本方法能够较为准确地检测血浆中H2S的含量,具有稳定性好,灵敏度高,操作简单,需要样本少,可实现高通量等优点,能够用于临床及基础研究中血浆H2S的检测.
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新型硫化氢供体GYY4137对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用
目的 观察GYY4137对大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)后的保护作用.方法 45只健康雄性SD大鼠,按随机数字表法分成正常组(A组)、缺血再灌注组(B组)和缺血再灌注+GYY4137组( C组). B组和C组大鼠建立肾脏缺血再灌注模型,C组在再灌注同时腹腔注射GYY4137(100 μmol·kg-1).方法 苏木精和伊红(HE)染色观察肾脏组织病理改变;测定丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、血肌酐( Scr)和尿素氮( BUN)含量;采用原位缺口末端标记检测肾小管上皮细胞凋亡指数(AI);反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾脏组织中的Bax,Bcl-2和caspase-3的表达情况.结果 B组可见肾小管扩张,肾小管上皮细胞坏死等表现,经GYY4137 治疗后明显改善;A组,B组和C组的凋亡指数分别为(4. 58 ± 0. 43)% 、(23. 52 ± 1.87)%、(10.86 ±0.87)%,SOD活性分别为(235.43 ±5.94)、(115.38 ±3.79)、(162.39 ±3.92) U·mg-1,MDA含量分别为(1.27±0.28)、(3.64±0.53)、(2.33±0.57) nmol·mg-1,Scr分别为(63.26±5.21)、(287.64±10.32)、(106.47±6.29) μmol·L-1,BUN分别为(7.46 ±1.26)、(13.65 ±1.04)、(9.65 ±1.35) mmol·L-1;与A组比较,B组中Bax、caspase-3 mRNA表达水平明显增高,Bcl-2表达水平降低(P<0. 05).和B组比较,C组中Bcl-2表达水平增高和Bax、caspase-3表达减低(P<0. 05).结论 GYY4137可减轻氧化应激水平和抑制凋亡,从而在肾脏组织IRI过程中发挥保护作用.
