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市售烤鱼片中河鲀毒素检测及鲀毒鱼鱼种的鉴定
目的 检测北京和青岛市售烤鱼片样品中的河鲀毒素(TTX),并对TTX阳性样品的鱼种进行鉴定.方法 用ELISA方法检测烤鱼片样品中的河鲀毒素,并提取TTX阳性样品的线粒体基因组DNA,利用DNA条形码的线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因对鱼种进行鉴定,构建分子进化树进行聚类分析.结果 在所检测的90份样品中,TTX阳性者58份(64％),含量范围0.10 ～ 63.81 mg/kg.阳性样品中,有24份(41.3％)被鉴定出含有鲀毒鱼,且21份(87.5％)样品为剧毒的月尾兔头鲀.结论 北京和青岛市售部分烤鱼片中TTX阳性并检出含有鲀毒鱼,建议生产厂家严把原料关,防止鲀毒鱼混入,监管部门应加强对市售烤鱼片标签标识的监管.
关键词： 烤鱼片 鲀毒鱼 河鲀毒素 细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因 -
基质分散固相萃取净化-亲水液相色谱-串联质谱法检测织纹螺与贝类中河鲀毒素
目的 针对海产品常见中毒原因分析需求,建立基质分散固相萃取净化-亲水液相色谱-串联三重四极杆质谱(HILIC-MS/MS)快速定性定量检测织纹螺和贝类中河鲀毒素的新方法.方法 1.0g样品经0.1％乙酸溶液沸水浴提取后,用50 mg亲水亲油平衡填料(HLB)和5 mg石墨化碳黑(GCB)吸附剂吸附净化,后经乙腈蛋白沉淀后过0.22 μm聚四氟乙烯(PTFE)滤膜,亲水液相色谱柱(150 mm×2.0 mm,3μm)分离,电喷雾离子化,选择反应监测(SRM)模式检测,基质匹配外标法定量.结果 在2.0 ～ 40.0 ng/ml浓度范围内,河鲍毒素呈现良好的线性关系,相关系数r2≥0.999;以3倍基线噪声所对应的浓度为检出限时,河鲀毒素的方法检出限可达10.0μg/kg;在25、100和200 μg/kg的加标水平时,方法回收率为74.2％ ～ 87.9％,相对标准偏差为2.3％～9.1％.应用本方法对浙江沿海地区市售织纹螺和贝类样品进行检测,15份织纹螺中有14份检出河鲀毒素,检出率为93.3％,含量范围为0.04 ～ 15.75 mg/kg,60份贝类样品均未检出河鲀毒素.结论 该检测方法准确、快速、易操作,能满足典型海产品中河鲀毒素的公共卫生应急检测或日常监测要求.
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免疫亲和柱净化-亲水液相色谱-串联质谱法测定水产食品中河鲀毒素
目的 本文采用免疫亲和柱选择性吸附样品溶液中的河鲀毒素,建立了测定水产食品中河纯毒素(TTX)的亲水液相色谱-串联质谱分析方法.方法 样品以含1％乙酸的甲醇溶液提取,磷酸盐缓冲溶液稀释,再经免疫亲和柱富集和净化后进样分析.目标物以TSK-gel Amide-80亲水色谱柱(150 mm×2.0 mm,5μm)分离,乙腈-0.1％甲酸水溶液(含5 mmol/L乙酸铵)梯度洗脱,采用电喷雾离子源,选择反应监测(SRM)正离子模式检测,溶剂标准曲线校正,外标法定量.结果 TTX在1～1 000μg/L范围内线性良好,方法的检出限为1μg/kg,定量限为3 μg/kg,在3～300μg/kg范围内加标回收率为73.6％～95.2％,相对标准偏差(RSD)为5.37％ ～10.7％.结论 该方法可有效消除复杂基质样品中普遍存在的基质抑制效应,操作简便,色谱保留时间稳定,灵敏度高,准确度和重复性好,适用于烤鱼片、风味鱼干等水产食品中河鲍毒素的测定.
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免疫亲和柱净化-高效液相色谱-串联质谱法测定鱼肉和肝脏中河鲀毒素
目的 采用免疫亲和柱净化鱼肉和肝脏中的河鲀毒素,建立高效液相色谱-三重四级杆质谱串联(LC-MS/MS)方法检测鱼肉和肝脏中的河纯毒素,为水产品中的河纯毒素检测提供方法依据.方法 选用Zic-Hilic色谱柱(150 mm×2.1mm,5μm),以10 mmol/L甲酸铵-0.1％甲酸-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离.样品用1％乙酸-甲醇沉淀蛋白提取,上清液加入PBS缓冲液后经免疫亲和柱净化,将洗脱液氮吹至干定容后上机测定.多重反应监测(MRM)方式检测.结果 河纯毒素的线性范围为1.0 ～1 000.0 ng/ml,鱼肉和肝脏中河纯毒素的检出限分别为0.3和0.2μg/kg,回收率在52.4％～72.6％之间.结论 本方法特异性强、提取效果好、无基质抑制效应,适用于鱼肉和肝脏中河鲀毒素的痕量检测.
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从一起河鲀中毒调查探讨河鲀食用安全性的风险管理措施
目的 通过一起河鲀中毒事件的流行病学调查和人群关于河鲀安全性的知识、态度、行为(KAP)调查,探讨河鲀食用安全的风险管理措施.方法 通过病例搜索,调查病例家庭成员进食史及发病情况,采用回顾性队列研究分析发病的高危因素,制作调查问卷调查了解当地村民有关河鲀中毒的知识、态度和行为.结果 共搜索到14例病例,其中1例死亡.症状主要为头晕(100％)、四肢无力(79％)、四肢肌肉麻痹和行走困难(71％)、口舌肢端麻痹(71％)等.食用河鲀是发病的危险因素,加工过程保留鱼肝共同煮食可增加中毒的危险(RR =1.8,95％ CI=1.1 ～3.1).KAP调查发现70％(33/47)的村民近3年曾进食过河鲀,其中88％ (29/33)来源于市场或流动摊贩;98％ (46/47)的村民知道河鲀有毒,94％(44/47)的村民知道国家法律禁止食用河鲀鱼,但仍有94％ (44/47)的人认为其味道鲜美值得品尝.结论 食用混杂于无毒河鲀中的有毒河鲀是导致本次食物中毒的主要原因.居民对河鲀安全性知晓率高但依从性差.
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黄海海域河鲀鱼的毒性检测及卫生学评价
目的:检测黄海海域几种河鲀鱼含有的河鲀毒素(Tetrodotoxin,简称TTX),预防引起自然毒食物中毒.方法:对分布于我国黄海海域的数种河鲀鱼进行毒性检测并作卫生学评价.结果:毒性的大小为假睛东方鲀＞虫纹东方鲀＞铅点东方鲀＞黄鳍东方鲀及月腹刺鲀;对不同部位的毒性进行比较,结果为鱼卵＞鱼肝＞鱼肠＞鱼鳔,而鱼鳍、鱼皮及肌肉毒性极低,鱼胆、鱼心则无毒检出.结论:为防止食物中毒,应加强品种鉴别,以及在烹调过程中剔除有毒脏器.
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超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼丸中的河鲀毒素
目的 建立鱼丸中河鲀毒素(TTX)的超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用测定方法.方法 鱼丸样品中的TTX经酸化甲醇提取,免疫亲和柱净化,氮气吹干后用流动相定容,经Hilic Amide(2.1 mm ×l00 mm,1.8 μm)色谱柱分离,甲醇-0.1％甲酸(含5 mmol/L乙酸铵)溶液作为流动相梯度洗脱,选择电喷雾离子源正离子多反应监测(MRM)模式进行监测,外标法基质标准曲线定量.结果 TTX在HILIC Amide柱上能与杂质良好分离,在2 ng/ml～ 200 ng/ml时,线性关系良好,相关系数为0.999 1.在10 μg/kg、50 μg/kg和100 μg/kg的加标水平下,回收率为72.9％～95.2％,相对标准偏差为2.32％ ～ 5.62％,方法的定量限为10 μg/kg.应用该方法对市售的30份鱼丸样品进行检测,均未检出TTX.结论 该法操作简单快速,准确度和灵敏度高,适合于鱼丸中TTX的检测,具有较好的应用价值.
关键词： 河鲀毒素 鱼丸 超高效液相色谱-串联质谱法 -
新斯的明抢救河鲀鱼中毒呼吸停止1例
病人,男,25岁.因误食煮熟的河纯鱼头、肝脏约500g,2h后感四肢麻木难忍,周身无力,咽部有阻塞感,舌根发硬,语言含糊不清,腹痛、恶心、呕吐胃内容物.无明显胸闷、呼吸困难等.既往身体健康.查体:T 36.6C,P 64min-1,R 20min-1,BP 20/10kPa.精神不振,神志清晰,恐惧表情,查体合作,双瞳孔等大正常,语言欠清,颈无抵抗感,双肺呼吸音清,心率64min-1,律规整,心音有力,各瓣膜区无杂音,腹无压痛,肝脾不大,肠鸣音活跃,上下肢肌力Ⅳ级,肌张力减弱,膝腱反射减弱,病理反射未引出.实验室检查无异常发现.
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河鲀鱼中毒误诊致死亡1例
病儿,男,7岁.因腹部不适、恶心、呕吐4h、被当地医院诊断为急性胃肠炎,给予氟哌酸0.2g口服,效果不好,并逐渐加重,伴腹泻,四肢无力,全身不适,口渴,舌尖麻木.
