首页 > 文献资料
-
肺动脉高压患者肺组织S1PR1/2/3的表达
目的 探讨肺动脉高压患者肺组织1-磷酸鞘氨醇受体1/2/3(sphingosine-1-phosphate receptor1/2/3,S1PR1/2/3)的表达变化,为肺动脉高压发病机制的深入研究奠定基础.方法 人的肺组织来源于黑龙江省医院,其中对照组取自右下肺叶球形性变实施肺叶切除患者的肺组织,病变组取自患有特发性肺动脉高压尸检患者的肺组织,应用免疫印迹及实时定量PCR技术检测S1PR1/2/3的表达变化.结果 原发性肺动脉高压患者肺组织S1PR1/2/3蛋白的光密度值分别为2.00±0.03,0.86±0.13,0.94±0.03,mRNA的绝对定量值分别为3.90±0.42,2.50±0.37,92.08±11.26,较对照组蛋白的光密度值(0.88±0.29,0.27±0.07,0.54±0.06)及mRNA的绝对定量值(1.44±0.33,1.12±0.15,1.63±0.56)明显增高(P＜0.01).结论 原发性肺动脉高压患者肺组织S 1PR 1/2/3的表达上调,提示S1PR1/2/3在肺动脉高压发病过程中可能发挥了重要的作用.
-
S1PR2和S1PR3通路激活Rac1参与HGF诱导的血管内皮屏障保护作用
目的 观察肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)介导的1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)和1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)通路是否通过激活Ras相关C3肉毒素底物1(Rac1)增加血管内皮屏障保护功能.方法 培养人肺动脉内皮细胞,应用小RNA干扰技术静默S1PR2/3后,给与HGF处理并应用GTP酶沉降及Western blot检测技术检测人肺血管内皮细胞GTP-Rac1活性变化.结果 静默S1PR2或S1PR3后,给与HGF处理,GTP-Rac1活性较S1PR2或S1PR3未静默组明显减弱.结论 HGF介导的S1PR2和S1PR3通路通过激活Rac1增加血管内皮屏障保护功能.
-
1-磷酸鞘氨醇(S1P)在心室重塑过程中对梗死区血流恢复及血管新生的作用研究
目的 观察不同时间周期大鼠心肌梗死模型心肌组织中1-磷酸鞘氨醇(S1P)受体在梗死区的基因表达情况,探讨其在心肌梗死后心室重塑过程中对梗死区血流恢复及血管新生的作用.方法 采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)的方法,造成大鼠左室大面积心梗,建立大鼠心肌梗死模型,分别于术后6、12、24 h观察心肌梗死后心室重塑过程中血流的变化情况.然后处死大鼠,取其心肌组织,提取组织中的RNA,采用实时定量荧光技术(PCR)测定心肌组织中S1P受体mRNA在梗死区的表达情况.结果 术后6h,大鼠心肌血流量和心肌微血管壁通透性随时间节点的增加均明显降低;术后12 h,这种趋势趋缓.术后6h,S1P1受体mRNA的表达水平呈明显下降趋势;与对照组相比,结扎梗死大鼠梗死区的S1P2受体mRNA在术后各时间节点表达水平均明显下降.术后6h,结扎梗死大鼠梗死区的S1P3受体mRNA表达显著增强,但术后12 h出现较为明显的表达抑制现象.结论 大鼠心肌梗死后的心肌血流恢复和新生血管早期可能与S1P1受体mRNA下调有关,随后与S1P2受体mRNA、S1P3受体mRNA逐渐上调有关.
-
1-磷酸鞘氨醇受体的研究进展
1-磷酸鞘氨醇S1P(Sphingosine 1-phosphate,S1P)是调节细胞内外多种生物学功能的重要信号分子之一,作用于S1P受体后,在很多生理和病理过程中发挥重要的调节作用。 Sphk-S1P-S1PR信号通路及其在炎症、肿瘤、动脉粥样硬化、自体免疫系统疾病、神经系统疾病等多种疾病中的作用已成为目前研究的热点之一。越来越多的S1 P受体调节剂被研发。
-
FTY720-P对成骨细胞分化成熟的作用
目的 以FTY720-P作用于成骨细胞后,分析相关蛋白和基因表达的变化,明确FTY720-P对成骨细胞的作用机制.方法 取Wistar大鼠乳鼠颅盖骨进行成骨细胞原代培养.将不同浓度的FTY720-P(0、200、300、400 ng/mL)作用于成骨细胞,MTT试验和流式细胞术进行生长速率和细胞周期的检测,碱性磷酸酶(ALP)染色和钙化结节染色对比FTY720-P用药前后对细胞形态学功能的影响,并分别采用ELISA、Western blot和Real Time RT-PCR检测相关蛋白和基因的表达.结果 MTT显示FTY720-P对细胞生长影响不大.流式细胞术结果提示,细胞阻滞在G2期,对周期影响不大.ALP染色显示对照组蓝紫色颗粒更加明显;茜素红染色可见数量较多和更加明显的钙化结节.PCR结果中ALP的表达是下调的,骨钙素(OCN)和胰岛素样生长因子(IGF)的表达是上调的;而在ELISA实验中,OCN和IGF的分泌是增加的,Western blot检测中,胞外胶原蛋白I型分泌也增加,而在ALP活性实验中,胞内ALP活性是降低的.结论 FTY720-P可以促进成骨细胞细胞外基质的成熟和矿化,但对细胞增殖和周期没影响.
-
S1P受体激动剂FTY720干扰孕鼠体内DC分布从而诱导妊娠免疫耐受
目的 探讨S1P受体激动剂FTY720在降低自然流产模型孕鼠胚胎丢失率进程中的作用及其可能的机制.方法 以自然流产模型孕鼠为研究对象,观察腹腔注射FTY720对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率的影响,RT-PCR检测DC表面S1PR的表达,流式细胞术及免疫组化检测孕鼠外周血及局部组织中DC数量、成熟度及其表面相应趋化因子CCL19及其受体CCR7的表达情况,趋化实验验证FrY720对DC细胞趋化能力的影响.结果 1)FTY720对正常妊娠模型孕鼠的胚胎丢失率无明显影响(P＜0.05),过继转移FTY720能明显降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率(P＜0.05);2)DC表面存在S1P受体的广泛表达,S1P受体激动剂FTY720减少了DC表面趋化因子及其受体的表达(P＜0.05),致使趋化至母胎界面DC的数量显著减少(P＜0.05);3)FTY720对DC细胞的分化及凋亡率均无明显影响(P＞0.05).结论 FTY720可能通过下调DC表面趋化因子受体CCR7的表达而使趋化至母胎界面的DC数量减少,终诱导母胎免疫耐受.
