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胃癌原发灶和淋巴结转移灶中锌指蛋白139与肿瘤细胞凋亡和生存素及B细胞淋巴瘤/白血病-2的关系及意义研究
目的：探讨胃癌原发灶和淋巴结转移灶中锌指蛋白139（ ZNF139）与肿瘤细胞凋亡、生存素（Survivin）、B 细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl -2）的关系及意义。方法选取2012年1—6月在河北医科大学第四医院外三科行手术切除的35例进展期胃癌患者为研究对象，收集患者胃癌组织及相应的淋巴结转移组织，采用 DNA 原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡指数（AI），反转录-聚合酶链反应（RT - PCR）检测 ZNF139、Survivin、Bcl -2 mRNA 的相对表达水平，蛋白印迹法（Western blotting）检测 ZNF139、Survivin、Bcl -2蛋白表达水平。结果胃癌原发灶 AI（10.8±4.7）高于淋巴结转移灶的（8.7±3.0）（t ＝-2.176，P ＝0.039）。淋巴结转移灶 ZNF139、Survivin、Bcl -2 mRNA 相对表达水平均高于胃癌原发灶（P ﹤0.05）。淋巴结转移灶 ZNF139、Survivin、Bcl -2蛋白表达水平均高于胃癌原发灶（P ﹤0.05）。胃癌原发灶 Survivin mRNA 相对表达水平与 AI 呈负相关（r ＝-0.517，P ＝0.001）；淋巴结转移灶 ZNF139、Survivin、Bcl -2 mRNA 相对表达水平均与 AI 呈负相关（r ＝-0.346、-0.467、-0.511，P ＝0.042、0.005、0.002）。淋巴结转移灶 Bcl -2 mRNA 相对表达水平与胃癌原发灶 Bcl -2 mRNA 相对表达水平呈正相关（r ＝0.791，P ﹤0.001）。在胃癌原发灶中，ZNF139 mRNA 相对表达水平与 Bcl -2 mRNA 相对表达水平呈正相关（r ＝0.482，P ＝0.003）。在淋巴结转移灶中，ZNF139 mRNA 相对表达水平与 Survivin、Bcl -2 mRNA 相对表达水平均呈正相关（r ＝0.436、0.452，P ＝0.009、0.006）；Survivin mRNA 相对表达水平与 Bcl -2 mRNA 相对表达水平呈正相关（r
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抑制锌指蛋白139对胃癌原位移植裸鼠肿瘤细胞凋亡的影响
目的：以人胃癌细胞株 SGC7901原位移植的裸鼠模型为研究对象，探讨抑制锌指蛋白139（ZNF139）对肿瘤生长和凋亡的影响及机制。方法建立 SGC7901原位移植裸鼠胃癌模型。合成针对 ZNF139的小干扰 RNA 质粒，分为实验组、阴性质粒组和空白对照组进行瘤内注射。检测各组肿瘤生长情况；MTT 法检测细胞活性，流式细胞术测定肿瘤细胞的凋亡率，RT －PCR 和 Western blot 方法检测裸鼠胃癌组织中 ZNF139、Bax、Bcl －2基因的表达。结果与空白对照组和阴性对照组相比，实验组肿瘤生长受到明显抑制，肿瘤体积、重量均低于两对照组（P ＜0．05）。 MTT 结果显示，实验组肿瘤细胞活性明显低于空白对照组和阴性对照组（P ＜0．05）。流式细胞术显示，实验组裸鼠胃癌细胞的凋亡率明显高于空白对照组和阴性对照组（P ＜0．05）。 RT －PCR 和 Western blot 结果显示，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组肿瘤组织 ZNF139、Bcl －2的表达下调，Bax 的表达升高（P ＜0．05）。结论抑制 ZNF139基因可以通过降低肿瘤细胞活性、促进凋亡抑制裸鼠原位移植瘤的增长，其机制与 ZNF139基因对 Bax、Bcl －2基因的调控有关。
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下调 ZNF139表达对子宫内膜癌细胞 RL95-2增殖和凋亡的影响及其机制
目的：观察 ZNF139表达下调后子宫内膜癌细胞增殖及凋亡变化，并探讨其作用机制。方法：West-ern blot 及 qRT - PCR 检测子宫内膜癌细胞株中 ZNF139蛋白及 mRNA 表达，采用小干扰 RNA（siRNA）转染RL95-2细胞，对 ZNF139表达进行沉默，MTT 检测细胞增殖，流式细胞术检测凋亡，Western blot 及 qRT -PCR 检测凋亡相关基因水平。结果：各细胞株中 ZNF139蛋白及 mRNA 均有表达，RL95-2细胞中表达高（F =9.345，P ﹤0.05；F =12.269，P ﹤0.01）。MTT 显示，在72h 及96h，siZNF139转染后 RL95-2细胞增殖能力下降（F =12.452，P ﹤0.05；F =14.378，P ﹤0.05）；流式细胞术显示，siZNF139转染后 RL95-2细胞凋亡率升高（F =27.084，P ﹤0.01）；Western blot 显示，在 siZNF139组，凋亡相关基因 MMP -7、p - Akt1及 PI3KCA 蛋白及 mRNA 表达水平低于 MOCK 组及 siNC 组（F =16.342，P ﹤0.05；F =14.651，P ﹤0.05；F =11.269，P ﹤0.05；F =12.342，P ﹤0.05；F =16.173，P ﹤0.05；F =9.672，P ﹤0.05），Akt 蛋白及 mRNA 水平高于 MOCK 组及 siNC 组（F =15.136，P ﹤0.05；F =11.758，P ﹤0.05）。结论：下调 ZNF139表达可通过调控 MMP -7表达及 PI3K/ Akt 信号通路抑制子宫内膜癌细胞增殖，促进其凋亡，ZNF139可作为子宫内膜癌靶向治疗的靶向候选基因。
