杆状病毒介导LacZ基因转染体外培养的人虹膜色素上皮细胞

目的:研究重组杆状病毒(baculovirus)载体介导β-半乳糖苷酶基因(LacZ)对体外培养虹膜色素上皮(IPE)细胞的转染和表达情况.方法:将质粒pCMV-β中的CMV-LacZ表达盒插入杆状病毒表达载体pFast BacI的Eco RI/Hind Ⅲ位点,构建重组质粒pBac-β,并利用Bac-to-Bac表达系统在Sf9细胞中产生出重组杆状病毒BV-β.将MOI为200的BV-β感染经酶消化加显微法分离培养的IPE细胞,24 h后进行X-gal染色.在显微镜下观察IPE中LacZ表达阳性的情况,记录阳性细胞所占的百分比.结果:限制性酶切分析及测序结果表明,我们已成功构建表达质粒pBac-β及重组杆状病毒BV-β.X-gal染色证实杆状病毒介导LacZ在细胞中的表达呈蓝色,弥漫于整个胞浆.感染后24 h时表达阳性率达85%.结论:重组杆状病毒可有效介导报告基因在体外培养的IPE细胞中表达,为利用杆状病毒构建可供移植的基因工程化虹膜色素上皮细胞提供了实验依据.

一氧化氮合酶在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及意义

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及意义.方法:建立结扎颈总动脉的大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,60只SD大鼠被随机分为缺血再灌注组和对照组.每组按再灌注后不同时间段相应分为1 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h小组,每小组5只大鼠,以免疫组织化学法(SABC法)检测视网膜组织中iNOS的表达情况.结果:在缺血再灌注损伤1 h时,未见到iNOS的表达,在缺血再灌注6 h时,iNOS开始表达,至第24小时表达强,第48小时开始减弱,但第72小时仍有表达.而对照组视网膜中未能检测到iNOS的表达.结论:iNOS可能在视网膜缺血再灌注损伤中发挥重要作用.

IL-1ra对IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞合成糖胺多糖的抑制作用

目的:明确白介素1受体拮抗剂(IL-1ra)是否对白介素1α(IL-1α)诱导的眼眶成纤维细胞合成糖胺多糖(glycosaminoglycans,GAG)有抑制作用,探讨IL-1ra在Graves'眼病(GO)治疗及预防中的临床应用前景.方法:以下述方法分别处理培养的GO患者和正常人眼眶成纤维细胞:IL-1α 30 U/ml或/和不同浓度的IL-1ra孵育48 h;用IL-1α 30 U/ml处理后,再加入IL-1ra 75 ng/ml共孵育不同时间(24 h、48 h、72 h).用[3H]葡萄糖胺掺入法测定[3H]GAG的产量.结果:IL-1α 30 U/ml明显刺激GO患者和正常人成纤维细胞合成GAG,增加率达46.6%～127.9%(平均103.5%,P<0.001).与IL-1α 30 U/ml克分子浓度比为25∶1、40∶1和100∶1的IL-1ra,分别抑制IL-1α诱导的GO患者和正常人成纤维细胞合成GAG达(30.93±11.46)%、(59.34±9.3)%和(83.15±8.56)%(P<0.005).在24 h、48 h、72 h时,IL-1ra分别抑制IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞合成GAG(24.18±6.3)%、(60.48±12.83)%和(73.04±7.14)%(前两组相比,P<0.001;后两组相比,P=0.159).结论:IL-1ra能够剂量和时间依赖性地抑制IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞合成GAG,IL-1ra可望用于GO的治疗和预防.

眼调节各因素与眼屈光不正的相关性

目的:评价与眼屈光不正状态可能相关的各项眼调节功能状况,探讨眼屈光不正与眼调节之间的相关性.方法:分别对47名学生94只眼进行屈光不正、调节幅度、调节灵敏度、调节准确度(双眼交叉柱镜FCC法)检查.然后将各项结果与屈光不正状况进行相关性统计分析.结果:被检者的屈光不正度平均值为(-2.46±2.28)D,调节幅度均值为(7.90±2.95)D,调节灵敏度为(17.28±4.92)次/min,调节准确度均值为(0.58±0.60)D,其中调节幅度与眼屈光度有显著相关性(r=0.377,P≤0.05);调节准确度与眼屈光度有显著相关性(r=-0.471,P≤0.05).结论:眼的屈光不正与眼调节幅度和眼调节滞后量有显著相关;眼的调节灵敏度与屈光不正无明显关系.提示我们可通过训练调节幅度和准确度来减缓近视加深.

近视伴高眼压症的眼压与中央角膜厚度的关系

目的:探讨近视眼患者中高眼压症的眼压与中央角膜厚度的关系及其临床意义.方法:用超声角膜测厚仪及非接触眼压计对14例28眼近视伴高眼压症患者的中央角膜厚度和眼压进行测定,并采用SPSS 10.0作统计分析.结果:14例28眼的眼压范围为20～29 mmHg,平均(23.88±2.26)mmHg;中央角膜厚度为533～670 μm,平均(586.50±31.91)μm;屈光度为-0.75～-3.50 D,平均-(1.50±0.69)D.应用SPSS(10.0)软件进行相关分析:眼压与厚度经回归分析,直线方程式为:Y(中央角膜厚度)=445.151+5.920 X(眼压);眼压与屈光度的相关系数r=0.355,P＞0.05.结论:眼压与中央角膜厚度成正相关,与屈光度无相关性.近视眼中高眼压症的眼压升高与中央角膜厚度增加有关,提示近视眼伴高眼压症患者的真实眼压可能是正常的,只是由于中央角膜厚度的增加而使眼压的测量值升高.检测中央角膜厚度有助于更正确地估计实际的眼压值.

同侧颈淋巴结切除抑制鼠角膜移植免疫排斥反应

目的:探讨同侧颈淋巴结切除对角膜移植排斥反应的抑制作用.方法:建立大鼠同种异体角膜移植模型,36只SD鼠为受体,18只Wistar鼠为供体,受体鼠再分为A、B、C三组,其中A组为对照组,B组为双侧颈淋巴结切除组,C组为同侧颈淋巴结切除组,每组12只鼠,其中10只用于角膜移植免疫排斥反应的裂隙灯下观测,2只用于角膜植片病理学检查.对各组角膜存活情况进行评分比较,评价疗效.结果:B、C两组角膜植片平均存活天数(mean survive time,MST)分别是(46.30±9.464)d和(44.43±7.604)d,明显高于A组(10.71±1.567)d,差异有显著性(P<0.01).而B、C两组之间比较,差异无显著性(P>0.05).移植术后2 w,A组大鼠的角膜排斥反应各参数均明显高于B、C两组(P<0.01),而B、C两组之间比较,差异无显著性(P>0.05).病理检查提示A组角膜组织水肿,基质层明显增厚,胶原纤维排列紊乱,有较多的新生血管形成,而B、C两组仅发现内皮细胞密度较正常角膜降低.结论:双侧颈淋巴结切除与同侧颈淋巴结切除两种方法均能有效抑制角膜移植排斥反应,后者在减少手术创伤的同时,并不降低对排斥反应的抑制作用.

PRK术后泪液中EGF、TGF-β1、IL-1α含量的变化

目的:探讨表皮生长因子(EGF)、转化型生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-1α(IL-1α)三种与角膜关系密切的细胞因子于PRK手术前后在泪液中的含量,并寻求其术后短期内的变化规律.方法:于PRK术前及术后1 d,2 d,10 d及1个月在患者下睑结膜囊内抽取泪液标本.采用双抗体夹心ABC ELISA法进行检测.结果:在PRK术前至术后1个月的随访期间,EGF和IL-1α无明显变化(P>0.05).术后第1天泪液中TGF-β1含量较术前降低(P<0.05).结论:PRK手术前后EGF和IL-1α无明显变化,可能是该种细胞因子对维持细胞稳态起作用,或是通过其他细胞因子发挥作用.而TGF-β1在术后1 d含量较术前下降,致使其对EGF的抑制作用相对减低,给细胞增殖移行提供机会,尽快恢复其屏障功能,之后TGF-β1又恢复至术前水平,与其他因子形成新的动态平衡,共同调节术后角膜创面的修复愈合.

接触镜与泪液形态关系的临床评价

目的:观察配戴不同种类接触镜后眼表面泪膜的形态、稳定性及泪液量的变化.方法:对日戴SCL、RGPCL和Ortho-K CL的214名近视患者428只眼,利用表面泪膜观察装置(DR-1)观察戴镜前后眼表泪液膜和戴镜状态下镜上泪液膜的形态分级,同时测定泪膜破裂时间(BUT).利用酚红染色棉丝测定SCL戴镜前后的泪液量,并用折射仪(Atago CL-1)测量SCL含水量的变化.结果:SCL配戴者随戴镜时间延长,BUT明显缩短(P＜0.01),RGP CL和Ortho-K CL配戴者戴镜5年以内,BUT无明显变化(P＞0.05).戴镜后RGPCL,Ortho-K CL和非戴镜正常眼三组间眼表泪膜分级比例差异无显著性,SCL组Ⅰ级比例为6.5%,显著低于其他组(16.1%～23.0%).镜上泪膜,SCL、RGPCL和Ortho-K CL三组均以Ⅳ级为主(分别占54.4%、53.4%和51.5%),SCL Ⅰ级比例仅1.9%,显著低于另二组(分别占6.2%和12.4%).SCL配戴者随戴镜时间延长,泪液量轻度减少,SCL含水量在戴镜1 w后即显著降低.结论:科学配戴接触镜对泪液膜质量无明显影响,但SCL长期使用可能对泪膜有一定干扰作用.

三种基因导入系统对视网膜色素上皮细胞转染效率的研究

目的:以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因,研究lipofectamine 2000、FuGENE6和逆转录病毒载体介导的基因导入系统对视网膜色素上皮细胞的基因转染效率,为视网膜及视网膜相关疾病的基因治疗奠定基础.方法:在体外分离培养人视网膜色素上皮细胞,构建含有EGFP基因的表达载体,分别应用阳离子脂质体lipofectamine 2000、FuGENE6和逆转录病毒三种方法将EGFP基因转染到人视网膜色素上皮细胞中,转染后于48 h在荧光显微镜下观察EGFP的表达情况.结果:三种方法介导EGFP基因在人视网膜色素上皮细胞中表达的阳性比例平均分别为52%、10%和72%.结论:在体外可通过逆转录病毒系统或阳离子脂质体lipofectamine 2000有效地将外源基因导入到人视网膜色素上皮细胞中,其中以逆转录病毒系统转染效率为高.

基底动脉瘤致动眼神经麻痹1例

患者,女,45岁,因"复视3 d,左眼上睑下垂2 d"入院.患者于2003年3月22日晨起发现视物重影,未诊治,第二天晨起则发现左眼完全睁不开,伴左太阳穴皮肤麻木感,同侧眉骨胀痛,即来我科诊治,CT和MRI检查未发现明显异常,门诊以"左侧动眼神经麻痹"收入院.

Alport综合征1例

Alport综合征又名眼-耳-肾综合征,其特征表现为遗传性出血性肾炎、神经性耳聋及眼部病变,多于小儿时发病,逐渐发展至青壮年时期.本病临床较少见,现报告1例.

视网膜及视网膜色素上皮错构瘤1例

目的:报告1例视网膜及视网膜色素上皮错构瘤,并对其临床表现做出具体描述和分析,以期对眼科医师正确诊断本病有所裨益.方法:对1例诊断为"视网膜色素上皮病变"的患者跟踪随访5年,进行常规直接眼底检查、眼底荧光造影和B超检查.结果:本例患者视力在5年内从0.6下降至0.3,眼底镜检查和眼底荧光血管造影无明显变化.结论:视网膜及视网膜色素上皮错构瘤是临床少见病,病史、眼底表现和荧光造影表现是其确诊的依据.

视网膜脱离术后限制性斜视棱镜矫正1例

患者,男性,59岁,右眼无明显诱因视力下降1 w.体检:视力30 cm指数,眼底检查见10点位赤道部马蹄形视网膜裂孔,其旁边与11点位变性区中各有两个小圆裂孔.诊断为孔源性视网膜脱离,行右眼冷凝放液环扎加压术.

FD Nd:YAG激光光凝治疗视网膜裂孔

目的:探讨激光在视网膜裂孔的光凝治疗中的作用,以及视网膜脱离术后行眼底激光光凝治疗对其手术的补充作用和在光凝中的技术问题.方法:对36例视网膜裂孔的患者用FD Nd:YAG(532 nm)激光进行视网膜光凝治疗.结果:36眼视网膜裂孔的患者中,治疗有效28眼,占77.8%.结论:用FD Nd:YAG(532 nm)激光对视网膜裂孔的患者进行视网膜光凝治疗效果显著.

角膜缘缺陷症及其治疗新进展

角膜上皮的完整是透明角膜的基础,当各种原因造成角膜缘的部分或全部缺损,则可导致角膜上皮修复不良,表现为角膜持续的糜烂或溃疡、结膜上皮长入和新生血管形成等,即角膜缘缺陷症.本研究就角膜缘缺陷症的病因、发病机制、组织学特点、临床表现、诊断和治疗方案的进展作一综述.

实验性近视眼的主动补偿机制

近视眼动物模型的建立为人类近视眼发病机制的研究提供了一条新途径.目前的研究表明,实验性近视眼的发生是视网膜成像质量下降刺激眼球主动生长的结果.眼球的主动生长过程主要表现为巩膜的生长重塑和脉络膜厚度变化,因此对这两个方面的变化机制作一综述.

第四届中国(上海)国际眼科学术研讨会、第四届中国(上海)国际视光学术研讨会、第二届上海国际早产儿视网膜病变及小儿眼科研讨会(征文通知)

卫生部视觉科学研究重点实验室成立

温州医学院附属眼视光医院面向全国诚聘眼科专业人才

温州医学院眼视光学院编写普通高等教育十五国家级规划教材

《眼视光学杂志》2003年第5卷1～4期总目次(卷终)

白内障患者手术前后立体觉的变化

目的:研究白内障患者手术前后立体觉的变化.方法:分别对31例正常人(对照组1)、30例轻度老年性白内障患者(对照组2)及93例白内障术后患者(实验组)检查立体觉.结果:对照组1的立体觉检查结果明显优于对照组2(P<0.05),对照组2的立体觉检查结果明显优于实验组(P<0.05).结论:白内障明显影响患者的立体觉.目前白内障手术时机选择较晚,患者术后立体觉短期内难以重建.早期行白内障手术有利于患者获得满意的立体视觉.

不同光学结构人工晶状体的像差

目的:比较不同光学结构的人工晶状体植入人眼后的单色光像差,为人工晶状体的设计提供理论依据.方法:采用Gullstrand Ⅰ号模型眼为基础,运用光路追迹程序计算不同光学结构的人工晶状体植入人眼后成像的5种单色光像差,运用Microsoft Excel软件对计算结果做曲线图.结果:不同光学结构的人工晶状体均存在单色光像差,其中球差的影响明显.结论:一些特定结构的人工晶状体具有较好的成像质量.

抗晶状体蛋白的特异性抗体免疫示踪研究

目的:了解针对晶状体组织的特异性抗体到达眼前节的途经、部位及其对晶状体生理功能的影响.方法:采用荧光标记抗体,观察被动免疫动物眼前节组织中荧光反应的变化,测定晶状体调节力和进行眼前节裂隙灯检查.结果:特异性抗体(IgG)首先到达睫状体部,而后出现在晶状体囊膜、虹膜和角膜内皮上;眼前节抗体含量峰值与裂隙灯观察的房闪、KP同时出现;晶状体上皮细胞的损伤与晶状体的调节力下降则出现于转移免疫后2 w.结论:针对晶状体组织抗原的特异性抗体可通过体循环先到达睫状体部,然后随房水而作用于晶状体上皮细胞.

眼内应用γ-干扰素防治白内障的实验研究

目的:探讨γ-干扰素眼内应用时对眼组织的毒性反应,为γ-干扰素的临床应用提供实验依据.方法:前房注药组:大耳白兔15只,分为5组,向前房内注入γ-干扰素0.2 ml,浓度分别为50万IU、25万IU、12.5万IU和6.25万IU,对照组注射平衡盐液0.2 ml.晶状体囊袋内注药组:大耳白兔12只,分为4组,右眼经透明角膜切口行超声乳化晶状体摘除术并植入人工晶状体,向囊袋内注入γ-干扰素0.2 ml,浓度分别为50万IU、25万IU及12.5万IU.对照组同时行手术，术中囊袋内注入平衡盐液0.2 ml.结果:前房注药组：50万IU组用药后1～3 d前房反应与对照组相比差异有显著性（P<0.05）,25万IU组用药后第1天前房反应与对照组相比差异有显著性（P<0.05）,其余各组与对照组相比差异无显著性（P>0.05）.所有实验组兔眼角膜透明，眼底未见异常，眼压与对照组相比差异无显著性.病理切片检查：50万IU用量组有一只眼见虹膜少量炎症细胞浸润，其余实验组兔角膜、虹膜及视网膜均未见异常反应.晶状体囊袋内注药组：50万IU用量组术后1～3 d前房反应经单因素方差分析，与对照组相比差异有显著性（P<0.05）,其余各组与对照组相比差异无显著性（P>0.05）.病理切片检查所有实验组角膜、虹膜及视网膜均未见异常反应.结论：12.5万IU γ-干扰素眼内注射对兔眼无毒副作用，可能为防治白内障术后后囊混浊开辟新途径.

90岁以上高龄白内障患者超声乳化手术分析

目的:分析高龄白内障患者手术特点及其术后视力的影响因素.方法:选择90岁以上高龄白内障患者17例22眼,进行超声乳化手术.结果:核硬度:Ⅱ级核2眼(9.1%),Ⅲ级核11眼(50.0%),Ⅳ级核6眼(27.3%),Ⅴ级核3眼(13.6%).视力:术后第一天,1眼<0.1,6眼0.1～0.25,8眼0.3～0.4,5眼0.5～0.6,2眼0.8～1.0.角膜:术后第一天15眼角膜透明(占68.2%),6眼内皮轻度纹状混浊(占27.3%),1眼内皮斑片状混浊(占4.5%).眼底:1眼青光眼性视神经萎缩,10眼老年性黄斑变性,1眼高度近视性黄斑病变,10眼无明显异常.结论:高龄不代表核硬、手术困难.由熟练医师施行超声乳化手术,并注意技巧,一样可以取得良好效果.医生术前应该对其进行细致的检查,并对视力的影响因素进行评估.

新型的持续配戴高DK值的角膜接触镜

目的:随着镜片材料和制作工艺的高速发展,更加安全地过夜配戴角膜接触镜已逐渐成为可能.方法:对近年来涉及持续配戴高DK值角膜接触镜的一些研究论文进行综述.结果:新型的高DK值的硅胶和硅氟化物水凝胶镜片与传统的HEMA镜片相比,氧传导性高出6倍,这种新材料的镜片能够从根本上避免任何与组织缺氧有关的并发症.另一个明显的差异在于:新一代的硅胶镜片有更高的系数.而且在生理反应、匹配以及易操作性方面,与传统的低DK值镜片也明显不同.另外,尽管与组织缺氧相关的并发症不再存在,但是由于镜片覆盖在角巩缘360度范围,所以潜在的炎症反应以及机械性的损伤仍然不可避免.因此,制造者对涉及角膜生理反应的评估和对配适关系重要性的理解是这些新镜片获得成功过夜配戴的关键.结论:作为眼保健的从业者,视光医师必须了解持续配戴镜片的新进展情况、新材料潜在的副反应和配适特性.

外伤后的假性近视分析

目的:许多临床医师发现,一些患者在脑外伤(TBI)后,会出现近视.面对此类患者,是马上为其下负镜矫正处方还是继续治疗,以期让患者恢复到以前的视力,这个问题让临床医师颇为为难.我们的目的是通过总结此类患者的病历,并对这种假性近视的性质进行归纳分类,以期更好地指导临床医师对患者进行有效的治疗.方法:对患者的病历进行收集,并从三个方面进行分析.根据近视的波动情况以及三种不同治疗方案的疗效进行分类.这些治疗方法包括缓解调节痉挛(包括阿托品),传统的方法以放松调节系统,以及屈光矫正.结果:外伤后的假性近视一般有以下三种表现形式:①症状短暂,偶尔出现.②症状较顽固,滴用睫状肌麻痹剂后消失,但药效过后马上出现.③极少数情况下,一些患者的近视度数一直在增加.结论:假性近视是TBI后出现的后遗症之一.了解外伤后出现的假性近视及其处理方法有助于临床医师更好地处理这些病例.处理中要有一定的灵活度,因为患者具有个体差异,处理方法也不一样.掌握患者的病史并对可能出现的后果给予解释,有助于患者更好地理解自己的病情.

视觉评估领域的SLCT和锥细胞对比敏感度测试的临床应用分析

目的:描述新的对比敏感度及色觉检查的原理及其临床应用.方法:对比敏感度用SLCT来评估.SLCT是由几行大小不变(20/25),但对比度逐渐降低的字母组成的对比敏感度表.色觉以锥细胞的对比敏感度来评估,这是一种视屏测试方法,每一个字母都代表三种视锥细胞中的一种类型(红、绿或蓝),对比度逐渐降低,分别确定分辨的阈值.测试对象分别为正常受试者以及有眼部疾病的患者.结果:SLCT在检查微小的离焦量以及早期眼部疾病方面比传统的检查具有更大的优势.锥细胞对比敏感度测试比传统的色觉检查敏感性高,不仅可以揭示遗传性色觉异常的类型及其严重程度,而且可以发现不同疾病造成的敏感度的下降.结论:这些新的方法拓展了视觉评估领域,揭示了人眼分辨力的微小变化,提示了遗传性、获得色觉异常眼病的类型和严重程度.

美国太平洋大学视光学院简介