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丹参酮ⅡA拮抗血管内皮细胞凋亡相关机制研究
目的:观察葡萄糖调节蛋白78 (glucose regulated protein 78,GRP78)基因在动脉粥样硬化(athemsclerosis,AS)病灶中的表达情况及丹参酮ⅡA对同型半胱氨酸(homocysteinemia,Hcy)诱导的血管内皮细胞凋亡的影响,探讨丹参酮ⅡA抗AS的可能机制.方法:建立Hcy所致血管内皮细胞损伤模型,用不同浓度丹参酮ⅡA药物干预,Annexin V-FITC法检测凋亡率；高蛋氨酸饲料复制兔AS模型,地高辛标记探针组织原位杂交检测GRP78 mRNA表达水平.结果:丹参酮ⅡA组血管内皮细胞凋亡率低于Hcy组(P＜0.01),组织原位杂交显示GRP78基因在AS病灶血管内皮细胞胞质中高表达.结论:丹参酮ⅡA拮抗Hcy诱导的血管内皮细胞凋亡,下调GRP78基因表达水平,减缓内质网应激可能是其血管内皮细胞保护作用途径之一.
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川芎嗪对肾脏缺血/再灌注大鼠GRP78和Caspase-12表达的影响
目的 观察川芎嗪(TMP)对肾缺血/再灌注(L/R)大鼠肾脏GRP78、Caspase-12表达的影响及其意义.方法 将Wistar大鼠30只随机分为假手术组(对照组)、I/R组和I/R+ TMP组.采用夹闭双侧肾蒂45min再灌注24h制备肾I/R模型.I/R+ TMP组在手术前1h按20mg/kg腹腔注射TMP,余操作同I/R组.检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)；光镜观察肾小管组织结构变化；RT-PCR和免疫组化检测GRP78、Caspase - 12 mRNA和蛋白表达.结果 与假手术组比较,L/R组大鼠血清BUN,Cr水平显著升高,肾组织损伤严重,GRP78和Caspase - 12 mRNA和蛋白表达呈显著性增加(P＜0.01)；与I/R组比较,I/R+ TMP组血清BUN、Cr水平及GRP78、Caspase - 12表达均有显著性下降(P＜0.01),肾脏损伤明显减轻.结论 川芎嗪对肾脏缺血/再灌注大鼠GRP78、Caspase - 12过度表达有很好的抑制作用,这可能是它减轻肾脏缺血/再灌注损伤的重要机制之一.
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中药菩人丹对OLETF大鼠视网膜葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白表达的干预作用
目的 探讨中药复方菩人丹(PRD)对OLETF大鼠视网膜葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达的干预作用.方法 以雄性自发性2型糖尿病大鼠模型OLETF大鼠和非糖尿病对照组LETO大鼠为实验对象,以血糖峰值＞ 16.7 mmol·L-1和负荷后120 min血糖＞11.1 mmol· L-1为2型糖尿病成模标准,将24只成模的OLETF大鼠随机分为PRD治疗组、糖尿病模型组,每组均为12只,同周龄12只雄性LETO大鼠为正常对照组.成功建立模型后,PRD治疗组大鼠连续灌胃PRD(1.8g·kg-1· d-1)2个月.TdT介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测OLETF大鼠视网膜神经细胞的凋亡情况;SP免疫组织化学染色法和免疫印迹法检测OLETF大鼠视网膜GRP78和CHOP蛋白的表达.结果 糖尿病模型组大鼠视网膜神经细胞凋亡指数、GRP78、CHOP蛋白的表达明显高于正常对照组大鼠(P＜0.01).PRD治疗组大鼠视网膜神经细胞凋亡指数、GRP78、CHOP蛋白的表达明显低于模型组大鼠(P＜0.01).结论 PRD可减少糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡,从而起到保护糖尿病视网膜神经组织的作用,这可能与下调GRP78和CHOP的表达,抑制内质网应激有关.
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表没食子儿茶素没食子酸酯对体外培养食管癌细胞生物学行为的影响
目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对体外培养食管癌细胞增殖、凋亡和转移的影响及其分子机制.方法 采用CCK-8法和细胞克隆形成法检测EGCG对食管癌细胞增殖的影响;流式细胞法检测细胞凋亡及周期分布;Transwell法检测细胞体外侵袭力的改变;免疫印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平.结果 EGCG处理后,食管癌细胞的增殖和侵袭能力明显受到抑制,凋亡率也显著增高,呈量效关系;随着EGCG浓度升高,GRP78蛋白表达水平明显下降.结论 EGCG可对食管癌细胞产生抑制增殖、诱导凋亡、降低侵袭和转移等作用,可能与其下调细胞内GRP78蛋白有关.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 食管癌 葡萄糖调节蛋白78 生物学行为 -
葡萄糖调节蛋白78在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义
目的 分析葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中的表达及其与肿瘤进展的关系.方法 采用免疫组化方法分析37例膀胱移行细胞癌组织中GRP78的表达,并结合随访资料分析GRP78表达强度与肿瘤进展的关系.结果 GRP78在浸润性膀胱癌组织中的表达明显上调,但不同病理分级肿瘤组织中表达并无差异.GRP78高表达的患者无进展生存时间(PFS)明显下降,多因素分析显示GRP78是判断患者预后的独立预测因子.结论 GRP78可作为判断膀胱移行细胞癌患者预后的重要标志物.
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肝缺血再灌注时葡萄糖调节蛋白78、葡萄糖调节蛋白94、磷酸化蛋白激酶B1及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-12的表达及意义
目的 动态观察大鼠肝缺血再灌注(HIRI)不同时限葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)、磷酸化蛋白激酶B1(p-Akt1)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶12(Caspase-12)的表达变化,并探讨其意义.方法 将55只Wistar雄性大鼠随机分为正常组(n=5)、假手术组(n=25)、缺血再灌注组(n=25),无损伤动脉钳阻断肝血流45 min后使其复流,用免疫组织化学法检测GRP78、GRP94及Caspase-12在再灌注0、3、12、24、72 h时的蛋白表达,用Western blot法检测同期p-Akt1蛋白表达.结果 GRP78在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组(P＜0.01),在缺血再灌注0h时表达开始上升(393.04±79.06),12 h时达峰值(2369.38±182.53),24 h(1023.02±185.61)及72 h(505.19±102.89)表达开始下降,但仍高于前述各组表达水平.GRP94在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组(P＜0.01),在缺血再灌注0h时表达开始上升(168.47±21.08),12h时达峰值(678.80±52.62),24 h(425.78±38.63)及72h(173.99±36.82)表达降低.Caspase-12在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组(P＜0.01),在缺血再灌注0h时表达开始上升(647.00±73.68),12 h达峰值(6867.67 ±601.11),24 h(2356.12±210.65)及72 h(675.89±109.3)表达开始降低.p-Akt1在缺血再灌注组各观察时限点的表达趋势与GRP78一致,显著高于正常组及假手术组.结论 大鼠肝缺血再灌注损伤可触发经内质网途经的Caspase级联反应活化；GRP78与GRP94可能通过降低内质网负荷和促进糖异生而发挥细胞保护作用；p-Akt1可能是此过程中机体通过磷酸肌醇3激酶(PI3K)/Akt信号通路上调GRP78表达的重要信号分子.
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抑制葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达对胃癌细胞株生长的影响
目的 观察利用psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和psiSTRIKETM/GRP94抑制人类胃癌细胞株SGC-7901 GRP78和GRt94基因表达对胃癌细胞活性及凋亡的影响.方法 构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体,采用LipofectamineTM 2000转染试剂进行共转染,将psiSTRIKETM/GRP78和psiSTRIKETM/GRP94同时导入胃癌细胞内,在转染前及转染后72 h通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、间接法免疫荧光技术检测GRP78和GRP94 mRNA及蛋白水平的表达,并设立阴性对照组(只加入转染试剂)比较.设立3组:实验组(共转染组)、阴性对照组(只加入转染试剂)及空白对照组(未加任何处理),在转染72 h后用噻唑蓝(MTT)法检测胃癌细胞活性,流式细胞仪检测胃癌细胞早期凋亡.结果 成功将psiSTRIKETM/GRP78和psiSTRIKETM/GRP94转染至SGC-7901 72 h后,与2个对照组比较,GRP78相对表达量为0.49,GRP94为0.40,与对照组比较的表达明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).MTT结果显示:在转染后48 h及72 h,与2个对照组比较,实验组胃癌细胞生长受到抑制；转染后72 h,实验组具有21.98％的凋亡率,与空白对照组和阴性对照组比较细胞凋亡显著增多,而阴性对照组(6.04％)与空白对照组(1.05％)比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在体外同时转染psiSTRIKETM/GRP78和psiSTRIKETM/GRP94 72 h后,胃癌细胞株SGC-7901 GRP78及GRP94表达明显降低.转染72 h后胃癌细胞活性明显受到抑制,细胞早期凋亡增多.
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酸性复灌液对缺血再灌注心肌内质网应激葡萄糖调节蛋白78的影响
目的 观察酸性复灌液对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌内质网应激(ERS)葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)的影响.方法 采用Langendorff离体心脏灌注模型,SD大鼠24只随机分为3组(n=8):正常对照组(C),灌注pH 7.4 HEPES-KH液180 min；缺血/再灌组(I/R,n=8),pH 7.4HEPES-KH液灌流20 min后缺血60 min,pH 7.4 HEPES-KH液恢复灌注100 min；酸性复灌液组(E,n=8),pH 7.4 HEPES-KH液灌流20 min后缺血60 min,复灌初先用pH6.8和pH 7.1 HEPES-KH液依次灌注5 min,后恢复pH 7.4 HEPES-KH液灌注90 min.以肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)浓度、心肌细胞凋亡、GRP78 mRNA和蛋白表达为检测指标.结果 与C组[1.3±0.4、(3.7±1.1)％、0.43 ±0.04、384±75]比较,I/R组和E组在肌钙蛋白Ⅰ浓度(12.5±3.2、6.7±1.7)、心肌细胞凋亡率[(27.9±5.3)％、(18.0±3.9)％]、GRP78 mRNA表达(0.95±0.07、0.62±0.06)和GRP78蛋白(769±132、542±98)表达均明显增加(P＜0.01)；E组与I/R组比较,cTnI浓度、心肌细胞凋亡率、GRP78 mRNA和GRP78蛋白表达均降低(P＜0.01).结论 再灌注初期短暂酸性复灌液可调节GRP78的表达,调控ERS反应程度,减轻内质网凋亡信号介导的细胞凋亡发生,从而产生心肌保护作用.
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热休克蛋白70和葡萄糖调节蛋白78在肝细胞癌中的表达及其临床意义
目的 检测热休克蛋白70 (HSP70)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在肝细胞癌(HCC)中的表达并探讨其与临床病理资料及预后的关系.方法 采用Western blot和免疫组织化学染色的方法检测HCC及其癌旁肝组织中HSP70和GRP78的表达,分析其与临床病理特征的关系;应用Kaplan-Meier法及多因素Cox比例风险模型分析HSP70和GRP78表达与预后的关系.结果 HSP70及GRP78蛋白在HCC组中的相对表达量明显高于癌旁肝组织(0.879±0.556比0.240±0.156,P＜0.01;0.515±0.353比0.202±0.132,P＜0.01);HSP70阳性表达与肿瘤的大小、乙型肝炎病毒(HBV)感染、Edmondson分级、分化及TNM分期密切相关(P＜0.05),GRP78阳性表达与Edmondson分级、分化、微血管侵犯、TNM分期及复发密切相关(P＜0.05).单因素生存分析显示HSP70和GRP78蛋白阳性表达组生存率明显低于阴性表达组(P＜0.05);多因素Cox回归分析结果显示TNM分期、肿瘤分化程度、肿瘤大小及复发是反映肝癌患者预后的独立危险因素,其相对危险度分别为1.502、1.971、2.267及4.746.结论 HSP70和GRP78过表达参与了HCC的发生和发展.
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衣霉素诱导内质网应激预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响
目的 观察衣霉素诱导内质网应激预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(I/R)的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、I/R组、单纯衣霉素处理组(TM组)和衣霉素处理+ I/R组(TM+ I/R组),I/R组和TM+ I/R组通过结扎左冠状动脉前降支并再灌注的方法建立I/R模型,TM组和TM +I/R组造模前30 min腹腔注射衣霉素0.6mg/kg,记录正常时及再灌注30 min、1h和2h时的左心室内收缩压(LVSP)、左心室内舒张末压(LVEDP)、左心室内压上升和下降大速率(±dp/dtmax),分别于开胸后、再灌注2h取颈动脉血,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)及心肌肌钙蛋白(cTnl)水平.再灌注2h后处死大鼠,检测心肌葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白和mRNA表达.结果 Sham组、TM组造模后血流动力学与正常时比较差异无统计学意义(P＞0.05);其他两组LVSP、±dp/dtmax减小,LVEDP增加,I/R组变化较TM+I/R组明显(P＜ 0.05).再灌注2h时CK-MB和cTnI:Sham组分别为(13.62±2.33) U/L和(2.37±0.31) μg/L、TM组为(13.52±2.94)U/L和(2.32 ±0.83) μg/L,两组与开胸后比较差异无统计学意义(P＞0.05),I/R组为(39.22±2.59) U/L和(46.89±5.07) μg/L,TM+ I/R组为(27.17±2.95) U/L和(26.49±3.16) μg/L[与Sham组、TM组、I/R组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)],两组与开胸后比较升高(P＜0.05).GRP78蛋白和mRNA表达:Sham组分别为0.073±0.008和0.058±0.007,I/R组为0.279±0.033和0.247±0.029,TM组为0.168±0.024和0.128 ±0.021,TM+ I/R组为0.469±0.041和0.353±0.046,Sham组、TM组和I/R组均低于TM+I/R组(P＜0.05).结论 衣霉素诱导轻度的内质网应激预处理可通过上调GRP78的表达减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.
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葡萄糖调节蛋白78在人喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在人喉鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析GRP78在其发生发展中的作用.方法:免疫组织化学法检测GRP78在90例人喉鳞状细胞癌组织、配对癌旁组织及正常喉黏膜组织中的表达,并分析其与患者性别、肿瘤分化程度、临床分期及淋巴结转移的关系.结果:GRP78在人喉鳞状细胞癌组织、配对癌旁组织及正常喉黏膜组织中的阳性表达率分别为86.67％、32.22％、8.89％,三者的差异具有统计学意义(P＜0.05).GRP78的表达与人喉鳞状细胞癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移均密切相关(均P＜0.05),与性别无关(P＞0.05).结论:GRP78在人喉鳞状细胞癌中呈高表达,表达水平随癌组织恶性程度的增高而增高,可能参与了人喉鳞状细胞癌的发生发展过程.
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未折叠蛋白反应在强噪声致豚鼠耳蜗细胞损伤过程中的作用
目的 探讨未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)标志物葡萄糖调节蛋白78(Bip/GRP78)在强噪声致豚鼠耳蜗细胞损伤中的作用.方法 48只豚鼠随机分为6组,分别为健康对照组(不给噪声暴露)和强噪声暴露后3 h、1 d、4 d、14 d、30 d组,每组8只,噪声暴露的5组豚鼠在120 dB SPL、4 kHz窄带噪声环境暴露4 h后,各组豚鼠于相应时间点处死前及对照组均测试听性脑干反应(ABR),然后每组各取4只豚鼠耳蜗作石蜡切片,余4只豚鼠提取耳蜗总蛋白.用免疫组化及Western Blot方法检测Bip/GRP78的表达及其在耳蜗的分布.结果 强噪声暴露后各组Bip/GRP78蛋白表达明显高于正常组,且各时间点都维持在比较高的水平,Bip/GRP78蛋白在噪声暴露后各组豚鼠耳蜗的内外毛细胞、螺旋神经节细胞、侧壁细胞均有表达.结论 强噪声暴露后,启动UPR保护机制,通过上调分子伴侣Bip/GRP78的表达,引导蛋白质正确折叠,降低细胞损伤,可能是耳蜗内源性保护机制之一.
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赤芍水提物对糖尿病心肌病大鼠心肌内质网应激与巨噬细胞浸润的影响
目的：观察赤芍水提物溶液对糖尿病心肌病大鼠心肌内质网应激及巨噬细胞浸润的影响。方法将斯泼累格.多雷(SD)大鼠随机分为5组：正常对照组(正常饲喂),模型对照组和赤芍水提物小、中、大剂量组。赤芍水提物各剂量组制备模型后腹腔注射赤芍水提物15,30,60 g.kg－1。10周后动脉插管观察各组大鼠心脏功能变化,Masson 染色观察心肌结构变化,Western blot 检测心肌组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶￣12(caspase￣12)及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶￣3(caspase￣3)蛋白表达,免疫组织化学法检测心肌巨噬细胞标记抗原(ED￣1)表达。结果与正常对照组比较,模型对照组心脏左心室收缩压、左心室大收缩期及舒张期压力变化率、左心室射血分数明显下降,心肌组织 GRP78、caspase￣12及 caspase￣3蛋白、ED￣1表达率及胶原纤维合成明显增加(P<0.05或P<0.01)；与模型对照组比较,赤芍水提物各剂量组上述指标被浓度依赖性抑制(P<0.05或 P<0.01)。结论赤芍水提物能改善糖尿病心肌病大鼠心功能及心肌纤维化,机制可能与抑制心肌内质网应激相关蛋白 GRP78表达、下调 caspase￣12、caspase￣3水平以及抑制心肌巨噬细胞的迁移浸润有关。
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葡萄糖调节蛋白78在卵巢癌细胞衰老过程中的作用
目的：拟了解葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在卵巢癌细胞衰老过程中所发挥的作用,并初步进行相关机制探讨。方法亚凋亡剂量顺铂诱导卵巢癌 A2780细胞衰老,并继续培养至出现衰老逃脱现象；衰老相关的b-半乳糖苷酶检测细胞衰老情况；流式细胞仪分析细胞周期情况；Western blot 检测 GRP78及相关蛋白表达情况。siRNA 反义抑制GRP78的表达,观察衰老逃脱细胞克隆形成情况。结果亚凋亡剂量顺铂作用 A2780细胞后发生明显 G2/M期阻滞,细胞衰老染色阳性。继续培养3周后出现衰老逃脱细胞克隆的形成,并可被顺铂再次诱导进入衰老状态。GRP78蛋白在衰老的 A2780细胞及再次被顺铂诱导进入衰老状态的衰老逃脱细胞中均呈低表达,而在衰老逃脱细胞中重新恢复其高表达。反义抑制 A2780细胞中 GRP78蛋白表达后P53及Cyclin B1蛋白表达均明显升高,Cdc2蛋白表达明显下降,同时伴有细胞衰老逃脱能力的明显降低。结论 GRP78在顺铂诱导卵巢癌细胞衰老过程中起到抵抗衰老的作用,其可作为一个提高卵巢癌化疗疗效的新靶点进行进一步的研究。
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应用激光扫描细胞仪分析GRP78在食管癌各级病变中的表达情况
目的 探索应用激光扫描细胞仪分析免疫组化结果的可行性、客观性及准确性,了解葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白在食管癌各级病变中的表达情况.方法 应用激光扫描细胞仪对食管癌组织芯片中GRP78免疫组化结果进行分析,对激光扫描细胞仪分析结果和传统光镜下评分结果的相关性进行分析.结果 激光扫描细胞仪扫描整张组织芯片后获得选定组织区域的虚拟图及阳性像素点百分比;正常食管组织、中一重度异型增生、原位癌、食管鳞癌的GRP78阳性率分别为0%(0/8),90.4%(19/21)、83.3%(5/6)和47.4%(18/38).GRP78在正常食管、中-重度异型增生加原位癌、食管鳞癌3组中表达的差异有显著性意义(P<0.01).激光扫描细胞仪分析结果与传统光镜下评分结果具有高度相关性(P<0.01)).结论 激光扫描细胞仪用于免疫组化结果的分析具有高通量、高度客观、准确的优点.GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色.
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葡萄糖调节蛋白78表达水平与大肠癌关系的Meta分析
目的 应用荟萃分析方法评价葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在大肠癌中表达的临床意义,为进一步将其作为大肠癌靶点研究奠定基础.方法 检索国内外主要的生物医学相关数据库,收集2018年6月前发表的关于GRP78在不同特征人群大肠癌组织中阳性表达的文献.筛选符合标准的文献,根据NOS评分量表对文献质量进行严格质控,应用RevMan 5.3软件进行处理.结果 共纳入10篇文献,Meta分析结果显示,大肠癌组织GRP78表达阳性率高于正常大肠组织(OR=10.31,95％CI=5.02～16.19,P<0.05)及腺瘤组织(OR=3.27,95％CI=1.50～7.16,P<0.05).GRP78表达阳性率与大肠癌患者的淋巴结是否转移以及是否远处转移具有显著正相关性(OR=2.64,95％CI=1.25～5.60,P<0.05;OR=3.00,95％C I=1.08～8.30,P<0.05),与高分化和中、低分化具有显著的负相关性(OR=0.45,95％CI=0.23～0.88,P<0.05),但与TNM分期、发病部位、肿瘤大小、年龄、性别等均无相关性(均P>0.05).结论GRP78参与了大肠癌的发生发展,与临床病理有一定的关系,可作为潜在的治疗靶点.
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GRP78的研究进展
葡萄糖调节蛋白78是热休克蛋白70家族的成员之一,作为一种分子伴侣在蛋白质的折叠和转运过程及内质网应激反应中发挥重要作用.它在多种肿瘤组织中呈高表达,反义抑制其表达水平或将GRP78启动子连接自杀基因可用于肿瘤治疗.它在染铅的鼠C6细胞中也呈高表达,为神经系统防御机制的研究提供了一条新思路.
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不同浓度血管紧张素(1-7)对心肌肥厚所致内质网应激损伤的保护作用
目的 观察血管紧张素(1-7)对心肌肥厚内质网应激所致细胞损伤的保护作用.方法 实验分为空白对照组、血管紧张素Ⅱ组、血管紧张素(1-7)干预组.体外培养乳鼠心肌细胞,用不同浓度血管紧张素Ⅱ(100 nmol/L、1000 nmol/L)分别作用24 h、48 h、72 h诱导其肥厚.用不同浓度的血管紧张素(1-7)(10 nmol/L、100 nmol/L、1000 nmol/L)进行干预.实验终止后,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态变化.考马斯亮蓝G-250法测定心肌总蛋白合成.RT-PCR和Western Blotting检测内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,100 nmol/L血管紧张素Ⅱ干预24 h可诱导心肌肥厚,心肌细胞体积增大,细胞蛋白含量增加(1.59±0.03 g/L,P＜0.05),葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白 mRNA和蛋白表达水平明显增高(P＜0.05),给予血管紧张素(1-7)干预后,可较大程度地逆转上述指标变化(P＜0.05).结论 血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥厚存在内质网应激.血管紧张素(1-7)可以通过减轻内质网应激来减轻心肌细胞肥厚,对心肌细胞具有保护作用且1000 nmol/L血管紧张素(1-7)的保护作用强.
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内质网应激分子伴侣GRP78在大鼠缺血再灌注损伤肝脏中的表达
目的:观察内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠缺血再灌注损伤肝脏组织中的表达水平.方法:将24只健康雄性SD大鼠随机均分为假手术组,单纯肝缺血组(肝缺血30 min+再灌注0h),再灌注6h组(肝缺血30 min+再灌注6h)和再灌注12h组(肝缺血30 min+再灌注12h).分别检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)和门冬氨酸转氨酶(AST)水平；肝组织病理学、凋亡情况及GRP78 mRNA表达水平.结果:与对照组比较,各实验组大鼠肝缺血后出现明显的肝组织损伤,且随着再灌注时间的延长损伤加重,表现为血清ALT和AST水平升高,明显的肝组织病理学改变,肝细胞凋亡率增加,各组间计量指标的差异均有统计学意义(均P＜0.05).大鼠肝组织GRP78 mRNA变化趋势与上述指标一致,缺血后表达明显上调,且随着再灌注时间延长而逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论:缺血再灌注损伤肝脏组织中GRP78表达上调,但其具体作用还有待于探明.
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促红细胞生成素对窒息新生大鼠心肌细胞凋亡及内质网应激相关蛋白的影响
目的 研究促红细胞生成素(EPO)对窒息新生大鼠心肌细胞凋亡及内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的影响.方法 120只新生7日龄Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组、窒息组和EPO组,每组40只.制备新生鼠常压窒息模型；EPO组于造模后立即给予rhEPO 500 U/mL(10 mL/kg)腹腔注射,其余两组接受同剂量的生理盐水.各组在造模完成后2h、6h、12h、24h和48 h分别取8只大鼠采集心脏血及心肌组织,测定血清心肌酶肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,检测心肌细胞凋亡情况及心肌组织GRP78、CHOP蛋白的表达.结果 与假手术组和EPO组相比,窒息组各时间点血清心肌酶CK和LDH升高,凋亡细胞增多,GRP78、CHOP表达上调(P＜0.01)；上述各指标在EPO组的表达水平亦高于假手术组(P＜0.01)；窒息后24h心肌组织CHOP蛋白与心肌细胞凋亡指数AI呈正相关(r=0.942,P＜0.01).结论 EPO可能通过调节内质网应激相关细胞因子GRP78、CHOP,减少心肌细胞凋亡从而发挥对新生鼠缺氧缺血性心肌损伤的保护作用.
