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经皮补充雌二醇在辅助生殖领域的运用前景(上)
雌激素是女性一生都离不开的物质,持续性的低浓度对性征发育和机体各个组织器官的生理功能和内环境稳定是必需的.而生育期高水平、周期性变化及和垂体促性腺激素的正负反馈形成的排卵和规律月经周期赋予女性生育能力.什么是雌激素?女性身体内有几种雌激素?它们有什么不同?本文将就此问题进行深入探究.雌激素的定义雌激素主要来源于卵泡内膜细胞和卵泡颗粒细胞.在卵泡发育过程中,先经LH刺激卵泡内膜分泌睾酮,再经颗粒细胞在FSH刺激下转化为雌二醇(E2),即“双细胞双促性素作用模式”.
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女性围绝经期健康大讲堂(之四)
雌激素补充疗法的过去、现在及未来(上)雌激素主要来源于卵泡内膜细胞和卵泡颗粒细胞.在卵泡发育过程中,先经促黄体生成激素(LH)刺激卵泡内膜分泌睾酮,再经颗粒细胞在卵泡刺激素(FSH)刺激下转化为雌二醇,即"双细胞双促性素作用模式".
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女性围绝经期健康大讲堂(之十六)
雌激素在人体中的作用解析(下)雌激素概念解密雌激素对女性和男性这么重要,我们有必要弄清什么是雌激素,身体内有几种雌激素,哪一种才是身体需要的和发挥正向功能的.从生理学对雌激素的表述得知:雌激素主要来源于卵泡内膜细胞和卵泡颗粒细胞.在卵泡发育过程中,先经LH刺激卵泡内膜分泌睾酮,再经颗粒细胞在FSH刺激下转化为雌二醇,即"双细胞双促性素作用模式".此外肾上腺皮质、胎盘和雄性动物睾丸也有分泌.这里雌激素的定义是雌二醇,是生育期女性起作用的雌激素,更年期女性急剧减少和缺乏的雌激素也是雌二醇(0 ～ 10pg/ml),为什么女性几十年来补充的雌激素不是缺乏的雌二醇,而是孕马雌酮(倍美力,也叫结合雌激素)呢?
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TNF-α对卵泡内膜细胞睾酮分泌及细胞增殖的影响
目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对于卵泡内膜细胞睾酮分泌以及细胞增殖的影响情况.方法:体外培养一定量猪卵泡内膜细胞,与其培养液内加入一定剂量TNF-α,包括三个层次,采用流式细胞仪及CFDA SE细胞增殖检测试剂盒检验TNF-α对于猪卵泡内膜细胞的影响,并采用RIA放射免疫法测定其对睾酮浓度的影响.结果:于培养液中加入TNF-α后,分别就不同时间进行检测,且与对照组对比,两组睾酮水平未见显著差异,然而试验组卵泡内膜细胞平均荧光强度显著低于对照组,差异有统计意义(P＜0.05).结论:TNF-α可明显促进猪卵泡内膜细胞增殖,但对睾酮分泌不具有明显促进作用.
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TNF-α对卵泡内膜细胞睾酮分泌及细胞增殖的影响
目的 研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对猪卵泡内膜睾酮分泌及细胞增殖情况的影响,探讨TNF-α在多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制中的作用.方法 在体外培养的猪卵泡内膜细胞培养液中加入TNF-α(10、100和1 000 pg/mL),采用放射免疫分析法(RIA)观察细胞上清液中睾酮浓度的变化,CFDA SE细胞增殖检测试剂盒和流式细胞仪观察TNF-α对卵泡内膜细胞增殖情况的影响.结果 在体外培养的卵泡内膜细胞培养液中加入TNF-α后,在24、48和72 h3个时间点分别与空白对照组(TNF-α0 pg/mL)相比,睾酮水平未见明显变化；72 h后TNF-α(100和1 000 pg/mL)组卵泡内膜细胞平均荧光强度(MFI)明显低于对照组(分别为53.2±11.59和66.87±14.8,P=0.013;47.55±7.31和66.87±14.8,P=0.001).结论 TNF-α没有直接促进睾酮分泌的作用,但却具有促进卵泡内膜细胞增殖的功能,这个功能可能与PCOS患者发生卵巢白膜增厚、卵泡内膜细胞增生病变有关.
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丙戊酸钠对卵泡内膜细胞雄激素分泌及相关甾体合成酶改变的影响
目的:研究丙戊酸钠(VPA)对卵泡内膜细胞睾酮生成以及细胞色素P45017α羟化酶(CYP17)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)mRNA的影响.方法:采用猪的卵泡内膜细胞进行体外原代培养,并给予不同浓度的VPA(0 mg/L、50 mg/L、100mg/L和250 mg/L)处理,48 h后收集培养液,采用ELISA法检测细胞睾酮的分泌,采用荧光实时RT-PCR(TaqMan.assay)方法检测卵泡内膜细胞中CYP17、P450scc和StARmRNA表达.结果:VPA刺激了卵泡内膜细胞睾酮的分泌(P＜0.05),且CYP17(P＜0.01)、P450scc(P＜0.01)和StAR(P＜0.01)mRNA表达增加.结论:VPA可直接作用于卵泡内膜细胞,改变CYP17、P450scc和StARmRNA表达,引起雄激素的分泌变化.临床上长期服用VPA的癫痫妇女出现类似于PCOS患者的生殖内分泌功能紊乱,可能与该药物本身作用有密切联系.
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IGF-I对卵泡内膜细胞增殖及其LH受体表达的影响
目的:通过研究胰岛素样生长因子(IGF-I)对猪卵巢卵泡内膜细胞增殖及促黄体生成素受体(LH受体)表达的影响,提出IGF-I可能在卵泡发育中的作用.方法:采用细胞免疫组化、Westernblot及MTT法进行研究.结果:1.细胞免疫组化结果显示LH+IGF-I组及IGF-I组与LH组相比,LH受体表达明显增强,有统计学差异,分别为P＜0.01,P＜0.05;而LH+IGF-I组与IGF-I组相比无统计学差异.Western blot结果发现LH、IGF-I及LH+IGF-I三组之间LH受体蛋白强度的比较与细胞免疫组化结果相一致,此外还发现LH受体蛋白为三个不同分子量的蛋白,它们分别为60 kDa,50 kDa,35 kDa.2.IGF-I使卵泡内膜细胞增殖,LH的促增殖作用不明显,IGF-I及LH+IGF-I组与LH组相比差异显著,P＜0.01;LH+IGF-I组与IGF-I组相比无统计学差异.结论:本实验发现IGF-I及它与LH协同作用,可以增强卵泡内膜细胞LH受体的表达,同时又可以促进卵泡内膜细胞增殖,为进一步阐明多囊卵巢综合征(PCOS)的卵泡发育停滞机制奠定了一定的实验基础.
