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超声波辅助提取穿山龙中薯蓣皂苷元的实验研究
目的:研究一种测定穿山龙中薯蓣皂苷元时快速提取薯蓣皂苷元的新方法--超声辅助水解原位萃取法.方法:对影响提取率的重要因素进行了考察,以期建立佳提取条件.结果:样品在料液比为1:15(g:mL)条件下,用浓硫酸-异丙醇-水(8:22:70)溶液在90℃下超声辅助回流2h,获得佳的提取率.结论:超声辅助水解原位萃取法省时、操作简便、重现性好.
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陈信义应用穿山龙临证经验
陈信义教授基于穿山龙中医学属性,结合现代药学研究成果,将穿山龙配伍用于治疗恶性肿瘤、免疫性血小板减少症、支气管哮喘与慢性支气管炎、风湿免疫病等多种疾病,观察结果显示穿山龙可明显改善患者临床症状、稳定病情、提高生存质量,并认为穿山龙治疗上述慢性疾病获效机制与薯蓣皂苷药效学作用密切相关.临床中陈教授形成了独特用药习惯,总结出了穿山龙与其他中药的配伍规律.
关键词： 穿山龙 肿瘤 免疫性血小板减少性紫癜 支气管哮喘 风湿病 -
刘宝山妙用穿山龙治疗血液系统疾病经验
穿山龙属薯蓣科植物，中药传统认为有利水消食、舒筋活血、祛痰、截疟之功效，兼可补虚。现代研究发现，穿山龙的主要化学成分为薯蓣皂苷，具有调节机体免疫的作用，尤其在调节T淋巴细胞功能方面有较强作用［1］。天津医科大学总医院刘宝山主任对穿山龙进行深入研究，临床应用于血液系统疾病，取得良好疗效。现浅拾一二，以飨读者。
关键词： 刘宝山 穿山龙 再生障碍性贫血 特发性血小板减少性紫癜 -
穿山龙水提物对四氯化碳致急性肝损伤模型小鼠toll样受体4/髓样分化因子88通路的影响
目的 观察穿山龙水提物对四氯化碳诱导急性肝损伤模型小鼠的影响,探讨其对toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)/髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor88,MyD88)信号通路的调控作用.方法 60只小鼠按随机数字表法分为对照组,模型组,穿山龙水提物低、中、高剂量组,每组10只.穿山龙水提物低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/kg穿山龙水提物混悬液,对照组和模型组灌胃等体积溶剂.1次/d,连续给药7 d.末次给药后2 h,除对照组外,其余各组小鼠腹腔注射0.35%四氯化碳橄榄油溶液建立急性肝损伤模型.造模后24 h,采用Western blot检测各组肝组织TLR4、MyD88、NF-κB p65表达;采用PCR法检测各组肝组织IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达;采用ELISA法检测各组小鼠血清AST、ALT含量.结果 与模型组比较,穿山龙水提物低、中、高剂量组小鼠血清AST[(98.00±17.75)U/L、(57.49±9.66)U/L、(39.60±9.49)U/L比(113.40±9.71)U/L]、ALT[(76.00±14.73)U/L、(50.70±9.35)U/L、(35.25±9.93)U/L比(95.42±11.64)U/L]水平降低(P<0.01);穿山龙水提物高剂量组MyD88[(0.67±0.21)比(1.74±0.42)]、NF-κB p65[(0.51±0.09)比(1.76±0.31)]、TLR4[(0.97±0.25)比(2.99±0.72)]表达降低(P<0.01);穿山龙水提物中、高剂量组IL-6 mRNA[(2.22±0.25)、(1.76±0.31)比(5.20±0.60)]、IL-1βmRNA[(1.96±0.35)、(1.47±0.23)比(7.37±0.99)]、TNF-αmRNA[(2.06±0.25)、(1.34±0.33)比(2.98±0.50)]表达降低(P<0.01).结论 穿山龙水提物通过抑制TLR4/MyD88信号通路实现对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用.
关键词： 穿山龙 炎症 急性肝损伤 TLR4/MyD88信号通路 小鼠 -
薯蓣皂苷元对昆明鼠的亚慢性毒性实验＊
目的：评估薯蓣皂苷元对小鼠的亚慢性毒性作用。方法：采用随机数字表法将80只小鼠分为0（对照）、100、200、400 mg·kg-1共4组，每天灌胃1次，连续给药90天，评估薯蓣皂苷元对小鼠的亚慢性毒性作用。观察指标包括小鼠体质量、毛色、饮食、粪便情况等，检测指标包括血常规分析、血液生化检查和病理学检查。结果：与对照组相比，雄性药物组小鼠体质量略减轻。血液学和病理学检查并无明显异常。结论：薯蓣皂苷元亚慢性毒性无可见不良效应剂量水平大于400 mg·kg-1，口服给药较为安全。
关键词： 薯蓣皂苷元 穿山龙 亚慢性毒性 无可见不良效应剂量水平 -
RP-HPLC同时测定穿山龙药材中原薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷和伪原薯蓣皂苷的含量
目的:建立测定产地黑龙江大兴安岭穿山龙供试品中水溶性皂苷含量的方法.方法:采用RP-HPLC,Diamonsil (钻石)C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温30℃.结果:原薯蓣皂苷浓度在50 ～ 500 mg·L-1、甲基原薯蓣皂苷在35 ～350 mg·L-1、伪原薯蓣皂苷质量浓度在15 ～ 150 mg·L-1与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999(n =6).方法学考察中各项实验结果的RSD均＜3％.结论:方法重复性好,具有良好的回收率,稳定性佳,为穿山龙药材的质量控制提供了参考.
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HPLC-ELSD测定穿山龙中薯蓣皂苷元
目的:建立高效液相色谱蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定穿山龙中薯蓣皂苷元的含量,并与2005年版<中国药典>方法紫外检测器(DAD)测定的结果进行比较.方法:Agilent EclipseXDB-C(18)柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相甲醇水(95:5),柱温40℃;ELSD检测器漂移管温度为70℃,载气压力367.5 Pa,Gain7,Filterl;进样量10 μL.结果:薯蓣皂苷元在2.60～20.8 μg线性关系良好(r=0.999 94),平均回收率为97.3%,RSD 1.94%.结论:该方法简便,灵敏,准确性高,可作为穿山龙中薯蓣皂苷元含量测定的方法;与DAD相比,该法所得图谱基线平整,检测灵敏度高.样品分离度好,测得样品含量偏高.
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药理效应法测定穿山龙总皂苷的药动学参数
目的:考察穿山龙总皂苷在大鼠体内的药动学特征.方法:采用尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎模型,以白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为测定指标,利用酶联免疫吸附法按试剂盒说明书测定IL-1β和TNF-α含量,采用符合中药整体观思想的药理效应法研究穿山龙总皂苷的药动学.结果:穿山龙总皂苷口服给药后主要药动学参数为药-时曲线下面积(AUC0.t)121.84 ng·h·L-1,药-时曲线下总面积(AUC0-∞) 542.56 ng·h·L-1,平均滞留时间(MRT0-t)5.92 h,平均总滞留时间(MRT0.∞)45.95 h,达峰时间(tmax)1.96 h,药峰浓度(Cmax)13.21 ng·L-1.结论:穿山龙总皂苷的表观动力学过程符合一室开放模型.
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基于连作障碍条件下穿山龙无机元素吸收规律及总皂苷含量分析
目的:探讨不同连作条件对于穿山龙的无机元素吸收及总皂苷含量的影响.方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)对不同连作条件下的穿山龙药材与根际土壤中17种无机元素的含量进行测定,射频功率1.3 kW,等离子体流量15 L·min-1,载气流量1.16 L·min-1,采样深度8.6 mm,雾室温度2℃,分析时间3 s,测量数3次,排风量5.0～7.5 m3·min-1(4.7～8.1 m.s～1);循环水的要求为流速5 L.min-1,温度15 ～20℃,压力230 ～350 kPa.利用紫外分光光度法测定穿山龙中总皂苷含量,检测波长457 nm,通过SPSS 17.0统计软件对实验数据进行相关性分析.结果:穿山龙在正茬2～4年时,药材与土壤的无机元素呈显著相关;从连作一茬1年开始无明显相关性,药材中总皂苷含量亦呈下降趋势.结论:穿山龙随着连作年限的增加,其总皂苷的含量随之下降,说明连作障碍对药材中总皂苷的含量积累造成了影响,但与无机元素的变化无明显相关,说明无机元素只是造成连作现象的因素之一.
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穿山龙对桥本甲状腺炎患者Th17/Treg型细胞因子表达的影响
目的:通过观察穿山龙治疗桥本甲状腺炎(HT)患者的前后血清自身免疫性抗体——甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺抗过氧化物酶抗体(TPOAb)及Th17、调节性T细胞(Treg)比例的变化关系,探讨穿山龙治疗HT免疫学作用机制.方法:将64例诊断明确的HT患者随机均分为治疗组和对照组,对照组给予左旋甲状腺素片治疗调节甲状腺功能至正常并维持治疗,治疗组在对照组基础上联合应用穿山龙颗粒,入组后均连续治疗6个月.结果:观察6个月后,治疗组TGAb以及TPOAb水平均低于对照组(P＜0.05);治疗组Th17细胞及相关细胞因子较对照组下降明显,Treg细胞、Treg/Th17比值明显升高(P＜0.05).结论:穿山龙能降低HT患者TGAb、TPOAb的滴度,其机制可能与调节Th 17/Treg平衡相关.
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穿山龙对桥本甲状腺炎患者Th1/Th2型细胞因子表达的影响
目的:通过观察穿山龙治疗桥本甲状腺炎(HT)患者前后血清自身免疫性抗体:甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)及T淋巴细胞亚群的变化关系,探讨穿山龙治疗HT免疫学作用机制.方法:将48例HT患者随机分为治疗组和对照组,每组24例,对照组给予左旋甲状腺素片治疗调节甲状腺功能至正常并维持治疗,治疗组在此基础上联合应用穿山龙颗粒,早晚各1次,沸水冲服,连续治疗6个月.入组后先测定基线时的三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、TPOAb、TGAb、甲状腺B超(或合甲状腺细针穿刺)、T淋巴细胞亚群;随访6个月后再次测定上述指标.结果:治疗后,治疗组TGAb以及TPOAb水平低于对照组(P＜0.05);治疗组CD打细胞亚群数值和CD4/CD8比值明显高于对照组(P＜0.05).结论:穿山龙能降低HT患者TPOAb和TGAb的滴度,其机制可能与T淋巴细胞亚群相关.穿山龙能提高CD47细胞亚群数值和CD4/C D8比值,改善Th1/Th2失衡状态,从而达到免疫调节功能,改善HT的免疫炎性反应.
关键词： 桥本甲状腺炎 穿山龙 甲状腺过氧化物酶抗体 甲状腺球蛋白抗体 Th1/Th2 -
国医大师朱良春对奇经八脉理论的传承和创新
国医大师朱良春教授善于治疗疑难杂症和危重病,得益于对奇经八脉理论的灵活应用.文章从朱老对奇经八脉理论学习与继承,包括《黄帝内经》《难经》《奇经八脉考》等,在历代医家的学习中,朱老受张锡纯影响较大,对蒋宝素《问斋医案》中关于奇经八脉的理论进行了深入研究.临床中,朱老系统整理了虫类药入奇经的理论,并多有创新.首次发现了穿山龙益肾壮督的功效,并成功运用于顽痹等疑难疾病的治疗,提出“益肾壮督培其本,蠲痹通络治其标”的法则,大大提高了临床疗效.
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王会仍以穿山龙治疗肺系疾病的临床经验
国家级名老中医王会仍对肺系疾病的中医药临床诊治经验丰富,疗效显著.在治疗肺系疾病时,王老师非常重视气血学说,主张心肺同治,在治肺的同时,兼顾活血,尤擅用独具活血通络、消食利水、祛痰平喘之效的中药穿山龙治疗支气管哮喘、肺间质纤维化及慢性阻塞性肺疾病等肺系疾病,已获良效,进一步开拓了穿山龙的应用领域,为肺系疾病的临床治疗提供新的用药策略.
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穿山龙粗提物抗肿瘤体外实验研究
目的观察穿山龙粗提物是否具有抗癌活性,为穿山龙有效组方或单体成分抗肿瘤应用基础研究奠定基础.方法采用细胞体外培育技术,以Mosmann法略加改进的MTT实验检测药物细胞毒效应.结果穿山龙粗提物对人口腔上皮鳞癌KB细胞株有明显的细胞毒作用,IC50为(4.13±0.40)μg/mL,对其相应的多药耐药株KBv200细胞也很敏感,IC50为(4.20±0.63)μg/mL,且不表现交叉耐药.结论穿山龙粗提物具有明显的抗肿瘤作用.
关键词： 肿瘤细胞培养 MTT比色法 KB/KBv200细胞 穿山龙 -
黑龙江穿山龙产销情况调查
穿山龙为薯蓣科多年生缠绕性草本植物穿龙薯蓣的根茎,主产于东北、西北、华北、华中地区,其次为河南、甘肃、四川及华东等地.多为野生,少有家种;尤以东北、华北所产质量为优.穿山龙以根茎入药,性苦,微寒;归肝、肺经.具有舒筋活血、祛风止痛、止咳平喘、祛痰、消食、利水、截疟等功能;主治腰腿疼痛、筋骨麻木、风湿热、跌打损伤、闪腰岔气、咳喘等症.现代医学研究证明,该品含薯蓣皂苷等多种甾体皂苷,其苷元为合成肾上腺皮质激素及口服或注射用避孕药的主要原料,可改善冠脉循环,对轻度动脉粥样硬化有效.本品的功能与作用已引起国内外许多医药专家的重视,并用于开发大量的新药、特药和中成药等,投入市场后颇受青睐.
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水解原位萃取薯蓣皂苷元的工艺条件研究
目的:正交试验法研究利用穿山龙提取薯蓣皂苷元的生产工艺.方法:采用水解原位萃取法,以薯蓣皂苷元得率为指标,确定了佳工艺,并将该工艺与传统工艺相比较.结果:穿山龙用含约1.5 mol*L-1硫酸的75%异丙醇水溶液在沸水浴中加热回流提取4.5 h,其提取效果佳,优于传统工艺.结论:该工艺薯蓣皂苷元得率高,成本低,操作简单,实用性好.
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扶正益肺巴布膏中延胡索乙素的含量测定
扶正益肺膏(三伏贴膏)系北京中医药大学附属护国寺中医医院根据冬病夏治理论,经过20多年的临床研究而成的院内制剂,由延胡索,细辛,穿山龙,地龙,白芥子,干姜等6味中药组成,功能化痰、理气、祛风、活血,主治哮喘,在减少病人发病次数,减轻发病症状,提高患者生存质量方面有显著疗效.但原始剂型使用不便,剂量不易控制,易污染衣物,易过敏,不利于药效发挥,因此决定将其进一步开发,研制成用药更安全,使用更方便的经皮给药新剂型——巴布贴膏.本实验用高效液相色谱法测定制剂中延胡索乙素的含量[1-4],为该药的质量提供了保证.
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高效液相色谱法测定咳喘胶囊中薯蓣皂苷元的含量
咳喘胶囊由沈阳药科大学药剂教研室根据祖传秘方：麻黄、穿山龙、厚朴、杏仁、细辛等5种中药组成，对穿山龙、麻黄等经醇提、挥发油提取各有效成分组成的复方胶囊剂；具有宣肺理气，止咳平喘的功效。
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RP-HPLC法测定穿山龙中薯蓣皂苷元的含量
穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣 Dioscorea nipponica Makino 的干燥根茎,收载于<中国药典>,含有多种水溶性和水不溶性皂苷,其中水不溶性皂苷主要为薯蓣皂苷元(diosgenin,C27H42O3)与不同糖类而成的薯蓣总皂苷[1].
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基于代谢组学分析的穿山龙对大鼠外周系统潜在干预作用的研究
基于代谢组学分析研究穿山龙对大鼠外周系统的潜在干预作用.穿山龙在外周系统中潜在干预靶点的识别有利于其安全的运用及治疗潜能的开发.20只雄性SD大鼠随机分为空白组及穿山龙组,每组10只.穿山龙组灌胃穿山龙提取物,剂量为80 mg·kg-1(相当于人类的生药量15 g),每日1次,连续5d.空白组给予等体积的生理盐水,每日1次,连续5d.后一次给药的24 h后,从每只大鼠中收集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织及血清样本.基于超高压液相色谱/四极杆-飞行时间串联质谱联用仪的代谢组学被用于探讨穿山龙对大鼠外周系统的干预作用.大鼠给予穿山龙后,分别在心脏组织中鉴别出5个受调节的代谢物,肝脏组织中6个,脾脏组织中5个,肺脏组织中3个,肾脏组织中5个及在血清样本中6个,被认为是穿山龙的潜在干预靶点.穿山龙对其中一些内源性代谢物的调节作用有利于外周系统的保护,然而,也有一些内源性代谢物对外周系统却产生了潜在的毒性.代谢组学分析揭示了保护性及毒性共存于穿山龙对外周系统的作用中,这些结果将有可能成为其安全运用的实用性指南,并有利于其运用范围的扩大.
