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关于脐带血的疑问
广东省脐血库一份冻存长达15年的脐带血造血干细胞成功救治一名11岁急性髓细胞白血病女孩,在刷新了广东省脐血库冻存时间长的脐带血临床应用记录的同时,也成为国内临床应用的脐带血冻存年限之.据了解,这份冻存了15年的脐带血移植前复苏活性检测高达94.2%.2012年3月,北京市脐血库为北京道培医院提供了一份冻存14年的脐带血,这份脐带血是1998年冻存的,解冻时活性达96%以上.它用来救治了一位49岁,体重达87公斤的白血病患者.
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脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)
为规范脐带血造血干细胞治疗技术的临床应用,保证医疗质量和医疗安全,制定本规范.本规范为技术审核机构对医疗机构申请临床应用脐带血造血干细胞治疗技术进行技术审核的依据,是医疗机构及其医师开展脐带血造血干细胞治疗技术的低要求.
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非清髓预处理及人脐带血造血干细胞移植对小鼠生精功能的影响
目的 探讨化疗药非清髓预处理与人脐带血造血干细胞移植(HSCT)对小鼠生精功能的影响.方法 将30只Balb/c小鼠按照随机数字表法分为三组,每组10只,分别为对照组、白消安(BU)联合环磷酰胺(CY)非清髓预处理(BU+CY)组、HSCT组.除对照组外,BU+CY组和HSCT组使用BU 10 mg/kg和CY 120 mg/kg预处理造成睾丸损伤,HSCT组进行人脐带血HSCT.HSCT移植3周后,称重法计算睾丸指数,进行小鼠精液质量常规分析及睾丸、附睾的病理组织学检查.结果 与对照组比较,BU+CY组小鼠睾丸指数、精子密度和精子活力均显著降低,而精子畸形率升高(P<0.01).HSCT组小鼠移植物抗宿主病(GVHD)评分较高,睾丸指数、精子密度和活力均高于BU+CY组(P< 0.05),精子畸形率低于BU+CY组(P<0.01).病理学检查发现,BU+CY组小鼠睾丸体积较小,生精小管破坏明显,生精细胞肿胀、排列紊乱,生精上皮变薄,生精小管与附睾管内精子数目大大减少;与BU+CY组比较,HSCT组睾丸体积增大,生精小管完整性较好,生精小管内精子数量较高,但生精上皮层数和精母细胞数量仍较少.结论 BU+CY非清髓预处理可造成明显睾丸损伤,轻度急性GVHD情况下,脐带血HSCT可一定程度促进睾丸生精功能的恢复.
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脐血移植的预处理选择和免疫抑制剂的应用
脐(带)血移植更确切地应称作脐带血造血干细胞移植术.脐带血指采自脐静脉的血液.造血干细胞是造血系统具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体.而脐血富含造血干/祖细胞,是造血干细胞的一个重要来源.
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原核表达重组人白介素-3及其对脐带血造血干细胞体外增殖的影响
目的 研究原核表达重组人白介素-3(rhIL-3)及其对脐带血造血干细胞体外增殖的影响.方法 构建pET-43.1-rhIL-3表达载体,克隆至BL21菌株,并进行中试发酵生产,所得包涵体经透析复性后,采用阳离子交换柱纯化,纯化产物送N-端测序.Ficoll密度梯度离心结合免疫磁珠法富集人脐带血中CD34+细胞,以不同浓度rhIL-3及干细胞因子(SCF)、Fms样酪氨酸激酶受体-3配体(FL)和促血小板生成素(TPO)因子组合培养1周,测定细胞总数,计算CD34+细胞增殖倍数.结果 在SCF和FL存在下,rhIL-3可明显促进造血干祖细胞增殖,但较无rhIL-3时CD34+细胞占细胞总数的比例有所下降.与SCF、FL共同作用时的佳浓度在15ng/mL左右,与SCF、FL、TPO共同作用时的佳浓度在50ng/mL左右.结论 高效表达及纯化的rhIL-3与SCF、FL和TPO细胞因子组合对脐带血造血干细胞具有良好的增殖作用.
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定量PCR检测体外扩增脐带血造血干细胞HOXB4基因的表达
目的:通过检测HOXB4基因表达,评价体外扩增的脐带血干细胞(CBSC)自我更新的能力.方法:CBSC在含造血细胞因子(TPO+SCF+FL+G-CSF)的无血清培养基体外扩增7天和14天,抽提细胞总RNA,采用定量PCR检测HOXB4基因的表达.结果:CBSC体外培养后,细胞总数可以增加近100倍,但HOXB4的表达较扩增前下降.培养7天HOXB4的水平为扩增前 的18%,培养14天,HOXB4表达仅为扩增前的3%左右.结论:CBSC体外扩增细胞数量增加的同时,自我更新能力逐渐下降,甚至消失.
关键词: HOXB4 脐带血造血干细胞 体外扩增 实时定量RT-RCR -
剖宫产下两种脐带血采集方法的对照研究
自世界上第一例脐带血造血干细胞移植手术成功以来,以脐带血作为造血干细胞移植来源已经得到了广泛临床应用[1]。85%的接受移植患者至少需要2×107单个核细胞数/kg[2],这对脐带血采集质量提出了更高的要求。本次研究对66例孕妇剖宫产下分别采取经体内采集或体外采集法行脐带血采集,并将采血结果报道如下。
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DMSO联合HES冷冻保护剂对脐血造血干细胞冷冻影响研究
目的 探讨脐带血造血干细胞的冷冻保存方法,建立一个简便、快捷的方法保存脐带血造血干细胞.方法 第一组采用5%的DMSO+HES作为冷冻保护剂,将脐带血造血干细胞放置于-80℃的环境中保存;第二组只采用10%的DMSO作为冷冻保护剂.对两组试验结果进行对比和分析.结果 实验证明-80℃条件下,DMSO联合HES对脐带血造血干细胞具有明显的细胞保护作用,尽管两组实验细胞存活率的组间差异无显著性,但两组间的CFU-GM回收率有统计学差异(P<0.05).结论 DMSO联合HES共同使用,可以有效地低温保存脐带血造血干细胞,造血干细胞的造血潜能可以得到有效的保护.同时该保护体系适用-80℃非程控的降温方法,避免了时间损耗和节省费用.
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脐带血造血干细胞向巨核细胞诱导分化研究进展
大剂量的放、化疗或进行造血干细胞移植会导致患者血小板急剧减少而致出血,严重时危及生命.输注他人捐献的血小板成为目前主要的治疗手段.但血小板储存时间短、易于激活、储存条件苛刻的原因导致血小板供应紧张[1],且反复输注容易产生血小板抗体及增加病原体感染的风险.因此,体外诱导造血干细胞向巨核细胞分化并回输体内发育生成血小板,成为加速患者血小板恢复的新型治疗方案[2-3].造血干细胞来源有:骨髓、外周血与脐带血[4],由于脐带血中所含造血干/祖细胞数量与骨髓相似,临床输注免疫原性低、排斥反应小,特别是其增殖分化能力明显优于骨髓及外周血造血干细胞的特点,如今已成为优秀的造血干细胞来源.
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5186例上海汉族无关脐带血HLA基因多态性研究
目的 了解上海地区汉族人群脐带血供者HLA-A、B、DRB1基因及单体型频率的分布特征.方法 采用基因分型技术对5 186例脐带血进行HLA-A、B、DRB1基因分型,利用大似然性原理方法计算HLA-A、B、DRB1基因及单体型频率.结果 5 186例脐带血样本中,共观察到72种HLA基因,其中频率>0.1的HLA-A、B、DRB1基因分别为A2、A11、A24、B60、B13、B46、DR9、DR12、DR4、DR15.385条A-B单体型中,195条单体型呈现显著的正连锁不平衡(A.L.D>O),12条表现为强连锁不平衡(R.L D>0.40),26条单体型的频率高于0.01;387条B-DRB1单体型中,159条单体型呈现显著的正连锁不平衡(A.L.D>0),7条表现为强连锁不平衡(R.L.D>0.40),20条单体型的频率高于0.01;1847条A-B-DRB1单体型中,760条单体型是“可靠的”(频率≥2.89×10-4),单体型频率高于0.005有29条.结论 上海汉族新生人群脐带血HLA基因和单体型多态性较为丰富,其频率分布数据和相关遗传参数为临床移植供者的选择、脐带血库的建立及人类遗传学研究提供了重要的参考.
关键词: 脐带血造血干细胞 HLA-A/B/DRB1 基因频率 单体型频率 -
脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)
为规范脐带血造血干细胞治疗技术的临床应用,保证医疗质量和医疗安全,制定本规范。本规范为技术审核机构对医疗机构申请临床应用脐带血造血干细胞治疗技术进行技术审核的依据,是医疗机构及其医师开展脐带血造血干细胞治疗技术的低要求。
本治疗技术管理规范适用于脐带血造血干细胞移植技术。