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白细胞介素-8的临床意义
白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)是近年由多家实验室发现的细胞因子; 曾有不同命名:如中性粒细胞激活蛋白(NAP-1),白细胞粘附抑制因子(LAF),T淋巴细胞趋化因子TCF).IL-8在炎症因子IL-1、TNF及脂多糖刺激下由多种细胞合成表达. 内皮细胞、T淋巴细胞、肺泡巨噬细胞、肝细胞、滑膜细胞、成纤维细胞和中性粒细胞等均可产生IL-8, 其中以血单核细胞产量为丰富.基因工程IL-8由72个氨基酸组成, 分子量为8kDa.
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肝细胞与骨髓间质干细胞共同培养时的肝细胞功能
目的:利用原代培养的大鼠肝细胞与骨髓间质干细胞共同培养,研究骨髓间质干细胞对肝细胞功能的影响,以便更好用于肝细胞移植及生物人工肝.方法:采用低浓度胶原酶原位循环灌流法分离大鼠旰细胞,获得有活性生的肝细胞进行原代培养.台盼蓝排斥法计算细胞产量和细胞活性;光镜下动态观察细胞形态学改变,并收集不同时期培养上清检测其细胞分泌等功能.比较肝细胞单纯培养及其与骨髓间质干细胞共同培养时细胞的功能.结果:培养7 d时两组均仍然维持白蛋白分泌及尿素合成功能;共同培养组与单纯肝细胞培养组在白蛋白分泌(13.75>2.179,P<0.05)及尿素合成功能(7.27>2.179,P<0.05)存在显著性差异,共同培养组明显高于单纯培养组.结论:肝细胞与骨髓间质干细胞共同培养,可以使肝细胞维持特异性功能,提高肝细胞活性.
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原代小型猪肝细胞的分离培养及其功能
目的:研究原代小型猪肝细胞的分离、培养及肝细胞的形态学变化及其功能特性.方法:用体外灌流装置,DTA和胶原酶两步灌流法消化分离小型猪肝细胞.在含100 ml/L小牛血清及其附助因子的RPMI 1640培养基中培养.对不同培养时间的肝细胞进行形态学观察.同时测定不同培养时期肝细胞生化合成及生物转化功能.结果:(1)肝细胞产量为6.0×109~8.2×109(7.0 × 109±0.79×109)/每只猪肝;(2)肝细胞活率为90.0~99%(94.4±3.07%);(3)肝细胞具有正常肝细胞的超微结构特征;(4)接种培养后肝细胞增生生长旺盛;(5)接种后20 h内每107个肝细胞尿素及白蛋白的合成量分别为1.21~1.50 mmol/L及0.58~0.80 g/L;(6)肝细胞数在1.25×107个~1.60×107个时,利多卡因的转化率在24 h时均在80%以上,随着时间的延长及肝细胞数的增多,利多卡因的转化率逐渐增加.结论:本方法分离获取的肝细胞产率高、活性高、增生生长旺盛、具有良好的生物合成及生物转化功能,可作为生物人工肝较为理想的细胞来源.
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脂肪基质血管细胞群的分离:一项针对细胞群4种商用细胞分离系统的直接对比
背景与目的 在脂肪移植物中加入基质血管细胞群(stromal vascular fraction,SVF)细胞是一项用于改善脂肪移植可靠性的新技术.市场上有各种各样的用于分离SVF细胞的系统.因缺乏在标准环境下操作系统的性能数据,而缺少客观的性能评估.因此,对4种商用SVF分离系统的临床门诊手术环境下的操作表现进行前瞻性、盲性对照研究.方法 对4种不同的系统进行比较:①PNC's MultiStation;②CHA Biotech Cha-Station;③Cytori Celution 800/CRS System;④Medi-Khan's Lipokit with Max-Stem.从5例志愿者供体获取相同的脂肪抽吸物样本,用于评估系统的处理时间、活细胞产量、成分、残余物酶属性及生产费用.结果 平均处理时间的范围为88 ~ 115 min.可获取活性有核细胞量高的为Celution系统(2.41×105/g),其次为Multi Station(1.07×105/g).Lipokit和Cha-Station生产出较少的有核细胞,分别为0.35×105/g和0.05×105/g.Celution系统同样可以生产更多的内皮细胞,CD34+CD31细胞和脂肪来源干细胞(集落生成单位——成纤维细胞).观察残余物酶属性水平,Multi Station、Cha-Station和Lipokit分别是Celution的5.1倍、13.0倍和57.0倍.结论 紧缩所有系统均可生成大量可测得的SVF,但在数量、特性、获取活细胞的安全性方面存在明显差异.须行并列的临床研究,以确定此类差异的关联.
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规模化制备培养基及其在脊髓灰质炎疫苗生产中的应用
目的比较规模化与传统法制备培养基在脊髓灰质炎(脊灰)疫苗生产中对细胞产量、细胞使用率和病毒滴度的影响.方法随机抽取5批不同方法制备的培养基,进行细胞产量、使用率、病毒滴度的平行试验.结果规模化制备的培养基可提高细胞产量33%,提高细胞使用率29.8%,提高病毒滴度0.3个常用对数值,并使细胞污染率降低24%;结论规模化制备培养基质量均一,批间差异小,优于传统制备法.
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159.化疗和生长因子动员后患者收获CD34+细胞产量的指示因素的评价
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化疗和生长因子动员的病人CD34+细胞采量预测因素的评估
过去10年间的许多研究提出了2个问题,预测CD34+细胞采量的病人化疗动员后在全血细胞减少的恢复期、白细胞量佳单采时间的选择,采集前的预测因素包括外周血白细胞计数(pWBC)、采用当天上周血CD34+细胞含量(pCD34DH)、采集前一天外周血CD34+细胞/μL(pCD34Day-1)、外周血纯单核细胞计数、血小板计数和开始化疗的天数.在本项研究中,病人化疗或应用细胞生长因子动员后,作者比较了这些预测因素的预测价值并研究了综合因素的价值,以此作为建立改善临床有实用价值的外周血CD34+细胞产量的模型.