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原代小型猪肝细胞的分离培养及其功能
目的:研究原代小型猪肝细胞的分离、培养及肝细胞的形态学变化及其功能特性.方法:用体外灌流装置,DTA和胶原酶两步灌流法消化分离小型猪肝细胞.在含100 ml/L小牛血清及其附助因子的RPMI 1640培养基中培养.对不同培养时间的肝细胞进行形态学观察.同时测定不同培养时期肝细胞生化合成及生物转化功能.结果:(1)肝细胞产量为6.0×109~8.2×109(7.0 × 109±0.79×109)/每只猪肝;(2)肝细胞活率为90.0~99%(94.4±3.07%);(3)肝细胞具有正常肝细胞的超微结构特征;(4)接种培养后肝细胞增生生长旺盛;(5)接种后20 h内每107个肝细胞尿素及白蛋白的合成量分别为1.21~1.50 mmol/L及0.58~0.80 g/L;(6)肝细胞数在1.25×107个~1.60×107个时,利多卡因的转化率在24 h时均在80%以上,随着时间的延长及肝细胞数的增多,利多卡因的转化率逐渐增加.结论:本方法分离获取的肝细胞产率高、活性高、增生生长旺盛、具有良好的生物合成及生物转化功能,可作为生物人工肝较为理想的细胞来源.
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类固醇激素合成急性调控蛋白(StAR)与睾酮的生物合成
大量的研究已对"运动性低血睾酮"状态下内分泌机能的紊乱进行了全面、深入的讨论,认为运动训练可导致下丘脑-垂体-性腺轴各个环节的机能受到不同程度的抑制.但是下丘脑-垂体对睾丸分泌睾酮的调节变化,终要通过睾丸组织内睾酮生化合成时反应底物的转运以及酶促反应等几个关键步骤来实现.其中的一个重要环节即睾酮合成的底物--胆固醇通过载体蛋白StAR(Steroidogenic acute regulatory protein,类固醇激素合成急性调控蛋白,简写为StAR)转运至线粒体内膜和P450SCC(cytochrome P450 Side chain cleavage,细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶)的过程成为当今生殖生理和内分泌研究领域的一个热点[1,2],下面我们就此做一综述.
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美国《病毒学》期刊发表人用皮卡佐剂狂犬病疫苗临床前研究结果
人用皮卡佐剂狂犬病疫苗临床前的研究结果以“基于Toll样受体3激动剂的皮卡佐剂狂犬病疫苗在动物实验中展现良好的安全性和有效性(英文题目:A novel rabies vaccine based-on toll-like receptor 3(TLR3) agonist PIKA adjuvant exhibiting excellent safety and efficacy in animal studies)”的题目发表在美国《病毒学》2016年1月的期刊上(Virology:489(2016)165-172)。据悉:单独使用狂犬病疫苗无法对暴露后人群进行全面有效的保护,常导致免疫失败,原因在于现有疫苗产生中和抗体较慢且难以诱导细胞免疫。因此,亟需开发更加安全有效的狂犬病疫苗。在该研究中,将皮卡佐剂引入狂犬病疫苗,成功制备了皮卡狂犬病疫苗。皮卡佐剂作为一种生化合成的双链RNA类似物,是TLR3的激动剂。试验结果显示,皮卡狂犬病疫苗能够增强动物机体的体液免疫和细胞免疫应答,皮卡狂犬病疫苗对病毒暴露后免疫的保护率高达70%-80%,而无佐剂疫苗的保护率仅为20%-30%。毒理试验结果显示皮卡佐剂与皮卡狂犬病疫苗在小鼠中安全性良好。该研究表明皮卡狂犬病疫苗是一种安全有效的疫苗,有望成为下一代新型狂犬病疫苗,建议进入临床试验。
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新生隐球菌的荚膜多糖合成研究进展
新生隐球菌是一重要的致病真菌,其细胞壁外层的多糖荚膜是第1个被公认的新生隐球菌毒性因子。本文总结了在荚膜生理和生化合成方面的研究进展,介绍了研究新生隐球菌荚膜合成的常用方法以及在新生隐球菌的荚膜代谢途径、生化合成酶、分泌、组装和调节这些广泛的研究领域存在的许多未解决的问题