首页 > 文献资料
-
骨髓非清除性造血干细胞移植治疗恶性血液病
造血干细胞移植术(HSCT)近年来发展迅速,已广泛应用于许多疾病的治疗,如:各种恶性血液病、再生障碍性贫血、难治性免疫性疾病及乳腺癌、小细胞肺癌、卵巢癌等实体瘤等[1～3],尤其是在治疗急、慢性白血病、多发性骨髓瘤等疾病方面,取得了令人满意的效果.根据预处理方案的不同(主要是就药物剂量而言),HSCT分为清除性和非清除性.无论是何种预处理,其目的均是为了摧毁或抑制患者的免疫系统,减少移植物排斥反应,进而改善造血微环境,促进造血干细胞植入.为了大限度杀灭肿瘤细胞,通常是将移植前的预处理增加到一个极限量,这就不可避免地产生许多严重并发症,造成较高的移植相关死亡.所以,现在国外采用一种新的治疗策略--骨髓非清除性造血干细胞移植(NST),即:用骨髓非清除性预处理,产生免疫耐受,使供者造血干细胞植入,再利用植入的异基因免疫活性细胞诱导移植物抗白血病效应(GVL)[4].
-
Toll样受体与间充质干细胞的研究进展
间充质干细胞(mesenchvmal stem cells,MSCs)是中胚层来源的一种成体于细胞,具有诱导分化为多种成体细胞如脂肪、成骨、软骨、肌肉、神经、内皮等细胞的功能.此外,MSCs还可支持和调节造血细胞生成,改变造血微环境,参与炎症、外伤等引起的损伤修复.
-
急性粒巨两系再障1例
由多种原因引起的骨髓造血干细胞及造血微环境的损伤,以致骨髓造血组织被脂肪代替,引起造血功能衰竭的一类贫血,临床上较常见,其特征是全血细胞减少,进行性贫血、出血和继发感染.
-
黄芪注射液对小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达的影响
目的:观察黄芪注射液对小鼠骨髓基质细胞表面细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响.方法:(1)小鼠骨髓基质细胞体外培养;(2)倒置相差显微镜动态观察、HE染色光镜及透射电镜观察小鼠骨髓基质细胞的形态;(3)MTT法检测黄芪注射液对骨髓基质细胞增殖的影响;(4)采用流式细胞术检测黄芪注射液对小鼠骨髓基质细胞表面VCAM-1和ICAM-1的表达.结果:(1)MTT法检测黄芪注射液浓度为400μg/mL和600μg/mL均可促进小鼠骨髓基质细胞增殖(P<0.05),且两种剂量组间比较无差异;(2)与对照组比较,黄芪注射液能够增加小鼠骨髓基质细胞表面VCAM-1和ICAM-1蛋白表达(p<0.05).结论:黄芪注射液能促进小鼠骨髓基质细胞的增殖及表面VCAM-1和ICAM-1蛋白的表达.提示黄芪注射液对造血微环境有改善作用.
-
青霉素诱发急性再生障碍性贫血1例
再生障碍性贫血是造血多能干细胞(或造血微环境)受损,或受到免疫抑制,从而导致其增殖、分化功能障碍所引起的一类贫血.临床上因服用氯霉素等抑制骨髓造血药物引起再生障碍性贫血者较为多见,而由应用青霉素引起的急性再生障碍性贫血者则较少见.现将我院收治1例报告如下.
-
当归补血汤载药血清对骨髓基质细胞增殖及细胞因子表达的影响
目的:观察当归补血汤载药血清对小鼠骨髓基质细胞增殖及细胞因子分泌的影响.方法:分离骨髓基质细胞,接种于96孔板培养,在相差显微镜下观察细胞形态和生长状况;将细胞分4组,用含有不同剂量的当归补血汤载药血清作用,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性及ELISA法检测造血生长因子GM-CSF和IL-3的表达情况.结果:在不同浓度的载药血清作用下,骨髓基质细胞增殖和分泌GM-CSF和IL-3显著(P＜0.05),呈剂量依赖性,但浓度过高可减弱细胞的增殖分泌效应.结论:当归补血汤载药血清能够促进骨髓基质细胞的增殖以及GM-CSF和IL-3的分泌.
-
经当归补血汤干预的肌源性干细胞Wnt信号相关基因表达分析
目的:探讨在体外造血微环境中肌源性干细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达情况及当归补血汤(DBD)载药血清的干预作用.方法:将分离纯化并经流式细胞仪鉴定的MDSCs与BMSCs体外培养,根据实验需要随机分为6组进行药物干预,即空白对照组、共培养Wnt激动剂组、共培养Wnt抑制剂组、DBD+共培养组、DBD+共培养激动剂组及DBD+共培养抑制剂组.Real-time PCR检测各实验组MDSCs Wnt通路上下游节点基因Wnt3、Wnt3a、β-catenin及MDSCs增殖分化相关基因CyclinD1、C-myc、CD34 mRNA的表达变化.结果:流式细胞仪检测结果显示MD-SCs CD34、Sca-1阳性.倒置显微镜下观察:共培养Wnt激动剂组、DBD+共培养组、DBD+共培养激动剂组MDSCs较空白对照组生长密集且生长速度快,激动剂组聚团明显,共培养Wnt抑制剂组MDSCs增殖明显受到抑制.Real-timePCR检测结果显示:DBD+共培养激动剂组的Wnt3、CyclinD1、CD34 mRNA表达水平高,共培养激动剂组与DBD共培养组其次,空白对照组低.结论:当归补血汤载药血清作用于共培养体系下的肌源性干细胞,Wnt信号通路持续激活后,体外造血微环境中的MDSCs更易增殖并分化.
-
三黄三仙汤对白细胞减少症小鼠造血功能的影响
目的:探讨三黄三仙汤对辐射诱导白细胞减少症小鼠骨髓造血功能及免疫功能的影响.方法:85只清洁级ICR雄性小鼠接受Se-137辐射,复制白细胞减少症模型后随机分为6组,按实验设计处理各组小鼠10天,眼球后静脉取血,ELISA法检测血清IFN-γ含量;取脾脏、胸腺称重后计算脾脏指数、胸腺指数并计数生成的内源性脾结节数;取右侧股骨切片、HE染色后,观察骨髓造血组织病理变化.结果:三黄三仙汤大中小剂量组与模型组比较,IFN-γ含量明显下降,尤以中剂量组作用明显;中药各剂量组及利可君组显著升高小鼠脾脏指数及内源性脾结节数,但对胸腺指数无显著影响;中药各剂量组均不同程度促进骨髓造血组织恢复.结论:三黄三仙汤能促进白细胞减少症模型小鼠骨髓造血功能的恢复,并保护造血微环境,但对免疫功能影响不大.
-
成骨细胞及血管内皮细胞与造血干细胞微环境的关系
造血干细胞微环境是指在成体组织中干细胞进行自我更新并能产生大量祖细胞的特定场所,已有实验证据表明成骨细胞及血管内皮细胞是造血干细胞微环境的重要组成部分.成骨细胞可以通过多种信号分子及黏附分子调节造血干细胞的功能.具有高浓度氧和生长因子的窦状隙内皮细胞,通过提供营养丰富的微环境促进干细胞增殖及分化,还可以辅助造血干细胞跨内皮迁移,在其归巢及动员过程中具有重要作用,此外可能分配一些细胞定位于脾等髓外场所,这些细胞能够在骨髓抑制情况下替代骨髓微环境.基于众多实验研究提出这样一个假说,即成骨细胞是维持造血干细胞自我更新特性的重要内环境,而血管内皮细胞等血管微环境则促进造血干细胞的增殖及分化.
-
外泌体源miRNA在白血病发病机制中的作用
背景:外泌体是穿梭在细胞间的物质传递与信息交流载体,是活细胞分泌到胞外的一种膜包被的纳米级囊泡.外泌体携载有亲本细胞来源的核酸(DNA、mRNA、microRNA等)、蛋白质、脂质等生物大分子,经体液流动远距离调控靶细胞的功能.白血病是一类造血系统的恶性肿瘤,大部分患者难以治愈.已有研究表明,外泌体源miRNA受脂质保护不易被RNase水解,介导白血病细胞的浸润、转移等恶性生物学行为.目的:对外泌体源miRNA在白血病中的作用进行综述,为探索白血病的分子发病机制以及挖掘诊治靶点提供重要信息.方法:以"外泌体、白血病、miRNAs"为中文检索词,以"Exosome,Leukemia,miRNAs"为英文检索词,通过计算机检索PubMed数据库与万方医学网;检索时限:2003年11月至2018年5月,终纳入48篇文献进行结果分析.结果与结论:外泌体源miRNA通过驯化造血微环境,使白血病细胞的存活、增殖和迁移浸润等恶性生物学行为得到加强.通过干预外泌体源miRNA的产生和释放,阻断受体细胞摄取外泌体源miRNA以及干涉其调控的靶基因等可能会拓展白血病的治疗理念.通过深入探讨外泌体源miRNA在白血病中的作用,为挖掘诊治靶点提供重要信息.
-
当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌源性干细胞分化的影响
目的:观察当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌源性干细胞分化的影响.方法:分离小鼠肌源性干细胞并培养鉴定.制备含有不同剂量当归补血汤的大鼠载药血清及对应剂量的骨髓基质细胞条件培养基.将肌源性干细胞随机分为8组:正常大鼠血清组、当归补血汤载药血清1～3组、正常大鼠血清条件培养基组、条件培养基1～3组,免疫组化法检测CD45的表达情况.结果:培养的肌源性干细胞呈desmin染色阳性；培养3天时载药血清3组、条件培养基两组及3组阳性细胞与正常大鼠血清组之间相比CD45表达量有显著性差异；随当归补血汤载药血清浓度增大CD45表达量增多,10倍剂量载药血清作用效果佳,条件培养基也呈同样的变化趋势,经10倍剂量载药血清干预的条件培养基作用效果显著.结论:当归补血汤载药血清及含载药血清的条件培养基可促进肌源性干细胞向造血细胞方向分化.
-
妊娠合并再生障碍性贫血11例临床分析
再生障碍性贫血(简称再障)是由多种病因引起的骨髓造血干细胞或造血微环境的损伤,以及免疫因素的作用致使红骨髓脂肪变化.主要特征为全血细胞减少,临床常表现为重度贫血、出血和感染.当合并妊娠时,病情更为复杂难治,母儿死亡率高.现将我院20年收治妊娠合并再障11例的临床资料进行回顾性分析.
-
IL-17等炎性因子在风湿免疫相关性血细胞减少骨髓细胞中的分泌状态及其临床意义
目的:观察风湿免疫相关性血细胞减少(Rheumatism immune-related hematocytopenia,RIRH)患者骨髓免疫细胞炎性因子分泌状态,探讨其对骨髓造血细胞损伤的病理作用及临床意义.方法:①ELISA法检测66例RIRH患者血清IL-5、IL-10、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度,对照组30例采自健康查体血清；免疫化学法观察骨髓免疫细胞HLA-DR表达；②免疫荧光法观察骨髓细胞抗人球蛋白(IgG)抗体、FcγⅡ受体(FcγⅡR)、甘露糖受体(MR)、ICAM-1、IL-12、IL-17A与IL-17RA表达;30例缺铁性贫血患者骨髓作为疾病对照；③随机抽取32例血小板＞50×109 L-1无出血倾向患者,常规治疗同时联合复方丹参促进炎性因子代谢,与30例不联合复方丹参患者对照治疗效果.结果:①66例患者血清IL-5、IL-1O、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度分别为(126.04±7.66) ng/L,(316.23 +25.163) ng/L,(328.43±27.01) ng/L,(48.17±4.22) ng/L和(40.28±3.69) ng/L,较之对照组(33.16 ±2.17) ng/L,(176.25±10.69) ng/L,(94.05±3.26) ng/L,(20.03±1.14) ng/L和(8.25 ±2.01)ng/L显著升高；②骨髓中活化的组织嗜碱细胞、嗜酸性粒细胞(EOS)、树突状细胞和巨噬细胞(Mp)等免疫细胞高表达HLA-DR、FcγⅡR、MR、ICAM-1、IL-12、IL-17A和IL-17RA;③32例IRHS患者联合复方丹参组经治疗2周后,血清IL-5和IL-17含量较之对照组显著降低,血象恢复时间较之对照组提前1周.结论:RIRH患者骨髓中多种免疫细胞活化,表达和分泌多种免疫分子,介导ADCC效应、细胞免疫功能和炎性反应,是损伤病变的造血细胞的重要免疫机制.抗感染、抑制免疫联合复方丹参活血化瘀,能改善骨髓造血微环境,促进造血恢复.
-
当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌卫星细胞增殖及c-kit表达的影响
目的 观察当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌卫星细胞增殖及c-kit表达的影响.方法 分离培养小鼠卫星细胞并鉴定.制备含有不同剂量当归补血汤的大鼠载药血清及对应剂量的骨髓基质细胞条件培养基.将肌卫星细胞随机分为8组:正常大鼠血清组、当归补血汤载药血清1-3组、正常大鼠血清条件培养基组、条件培养基1-3组,MTT法检测细胞增殖活性,免疫组化法检测细胞c-kit的表达情况,荧光实时定量PCR检测细胞c-kit mRNA的表达.结果 培养的肌卫星细胞呈Desmin免疫阳性；与正常大鼠血清组相比,载药血清各组及条件培养基各组细胞增殖显著,载药血清3组、条件培养基各组阳性细胞c-kit蛋白及mRNA表达量有显著性差异,随当归补血汤载药血清浓度增大c-kit表达量增多,条件培养基也呈同样的变化趋势.结论 当归补血汤载药血清及含载药血清的条件培养基可促进肌卫星细胞增殖及c-kit的表达.
-
脐带血来源基质细胞培养及造血微环境的建立
目的:研究脐带血来源的基质细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的促进作用.方法:应用MACS磁珠分离系统分离脐血CD34+细胞,通过细胞因子对脐血前体基质细胞体外诱导,使其产生基质细胞和形成造血微环境.观察基质细胞的生长状态和细胞表面分子的表达,并建立以该基质细胞为滋养层的脐血造血干细胞体外扩增体系.结果:细胞因子联合培养对CFU-GM增长没有明显影响,但对于CFU-E的形成和细胞增长的影响细胞因子组和细胞因子+基质细胞组所培养的CPU-E与对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01).脐带血来源的基质细胞分泌细胞因子的时间-效应曲线显示,脐血基质细胞培养3、7、10、14和20d后,TPO、SCF浓度在培养第7天时达到高,而GM-CSF在第7天以后则逐渐降至低.在脐血基质细胞作为滋养层的扩增体系中,加入相应的细胞因子可以使脐血造血细胞明显扩增,其中细胞因子(SCF+IL-3+EPO+TPO+GM-CSF)联合基质细胞培养体系的扩增作用强.结论:应用细胞因子可以体外培养脐血前体基质细胞产生脐血基质细胞,并可在该基础上形成造血微环境支持体外造血.
-
急性早幼粒细胞白血病小鼠模型中白血病细胞对骨髓基质细胞增殖及功能影响的研究
目的:探讨急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)发病过程中骨髓造血微环境的改变.方法:建立小鼠APL移植模型,联合流式细胞术和体外共培养及集落形成实验对这一模型进行观察,分析APL发病对造血微环境中基质细胞数目和功能的影响,并运用细胞因子检测分析微环境中细胞因子的变化.结果:在APL发病过程中,内皮细胞(endothelial cells,EC)、成骨细胞(osteoblast cells,OBC)等基质细胞的数目明显减少,但间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的数目在早中期基本不受影响,直到疾病晚期才出现降低.与发病小鼠来源的MSC和成骨谱系细胞共培养后,造血干细胞的数目和集落形成数目与对照组相比,均出现减少;另一方面,白血病状态下外周血血清中炎性细胞因子的表达明显增加.结论:APL发病过程中,白血病细胞对于不同类型骨髓基质细胞的增殖具有不同的影响,而白血病状态下的MSC及OBC对造血干细胞的增殖和分化具有抑制作用,这一过程中可能有炎性细胞因子的参与.
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 基质细胞 造血微环境 细胞因子 -
急性早幼粒细胞白血病小鼠模型中造血增殖、定位和迁移特点的研究
目的:应用急性早幼粒细胞白血病(APL)小鼠模型研究白血病发病过程中白血病细胞和正常造血细胞增殖、定位和迁移的特点.方法:采用小鼠白血病移植实验及流式细胞术,监测其白血病发病过程中,骨髓和脾脏中白血病细胞和正常长期造血干细胞、免疫细胞组分的动态变化.结果:在APL模型小鼠的白血病发病过程中,骨髓中正常粒单系造血祖细胞在发病晚期呈现下降趋势,正常长期造血干细胞和共同淋巴祖细胞在发病晚期也明显下降.与之相反,在白血病发病过程中,脾脏正常长期造血干细胞未见明显下降,并呈现定位迁移或代偿增生的趋势,发病晚期,正常长期造血干细胞、共同淋巴祖细胞数量均显著上升.结论:白血病发病过程中正常长期造血干细胞和祖细胞及免疫细胞在细胞数量和造血器官的定位发生显著变化,提示造血微环境可能参与白血病的发生和发展过程.
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 造血微环境 造血干细胞 -
趋化因子CXCL9、CXCL10及CXCL11在炎症性肠病中表达及临床意义
趋化因子是一个促炎多肽细胞因子的超家族,主要由白细胞与造血微环境中的基质细胞分泌,可结合血管内皮细胞,具有激活和趋化白细胞移动作用[1].近期研究已显示趋化因子CXCL家族可在一系列自身免疫性疾病中产生明显的促炎效应[2],但目前CXCL家族在炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)发病机制中的作用仍不清楚.本文通过分析CXCL9、CXCL10和CXCL11在IBD患者肠黏膜及血清中表达水平及其与白细胞介素(IL)-17表达的相关性,旨在探讨CXCL9、CXCL10和CXCL11在IBD发病过程中的作用机制.
-
当归补血汤调控骨髓造血机理及对造血微环境的影响
目的 探讨当归补血汤调控骨髓造血的机理.方法 50只ICR小鼠随机分为5组,每组10只.除正常组外其他组小鼠连续腹腔注射多柔比星4 mg· kg-1· d-1,共3d,正常组给予同等体积的生理盐水.注射多柔比星3d后,当归补血汤低、中、高剂量组分别连续腹腔注射补血汤5、15、25 g·kg-1· d-1,共7d,正常组和模型组给予同等体积的生理盐水.给药结束制备骨髓单细胞悬液,体外培养观察骨髓基质细胞生长状态,流式细胞仪检测骨髓细胞增殖和黏附情况.结果 当归补血汤组骨髓基质细胞生长状态好于正常组和模型组,骨髓细胞之间的聚集明显.模型组聚集细胞数占总细胞比例为(4.00±1.10)％,低于正常组[(3.07±2.35)％],但无显著差异(P＞0.05).当归补血汤低、中、高剂量组聚集细胞数目占总细胞数比例分别为(5.40±2.91)％、(7.36±2.32)％和(9.27±3.35)％,均高于模型组(P＜0.05或P＜ 0.01).正常组G2期细胞比例高于其他四组(P＜0.05),当归补血汤各剂量组G2/M期细胞比例与模型组比较无显著差异(P＞0.05).结论 当归补血汤可能通过改善基质细胞的状态、增强骨髓细胞之间的黏附来改善骨髓造血微环境.
-
造血干细胞联合AGM基质细胞移植对骨髓移植小鼠造血重建的影响
目的探讨造血干细胞与主动脉-性腺-中肾(Aorta-gonad-mesonephros,AGM)区来源的基质细胞联合移植对同基因骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)小鼠BMT后骨髓造血的影响.方法建立同基因骨髓移植小鼠模型,随机分成4组:空白对照组、BMT组、BMT联合AGM基质细胞移植组(联合移植组)及川芎嗪组,另设正常组.分别于BMT后第7、14、21、28d检测外周血细胞、骨髓单个核细胞(bone marrow mono-nuclear cells,BMMNC)、第3、7、10、14、21、28d检测骨髓组织学变化.结果联合移植组骨髓单个核细胞较川芎嗪组恢复快,联合移植组及川芎嗪组外周血血细胞、骨髓单个核细胞、骨髓组织恢复均较单纯BMT组快,有显著性差异.结论BMT联合AGM基质细胞移植对骨髓移植造血重建具有促进作用.
关键词： 主动脉-性腺-中肾区 同基因骨髓移植 造血重建 造血微环境
