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竞争PCR及其产物酶联杂交定量检测HBV DNA
我们用与野生模板等长和等效扩增的突变模板作为内参照,通过竞争PCR对HBV基因进行扩增,并引入微反应板酶联杂交技术对扩增产物定量分析。 1. 资料与方法:(1)HBV DNA标准品:质粒pADR-1 DNA 经BamH I酶切线性化后精确定量。(2)PCR2.1-WS319和PCR2.1-MS319质粒:均由长征医院感染科实验室(简称本室)构建。(3)HBV DNA阳性血清抽提物(10份)本室冻存。(4)竞争PCR:在0.2ml薄壁PCR反应管内,每管加入25μl PCR mix、引物EP1和EP2各1μl、按不同实验要求所需的各种模板,加双蒸水,使终体积为50μl。PCR扩增参数: 94℃,5min后;94℃,30s;54℃,30s;72℃,30s,共25个循环;再72℃延伸3min。(5)微反应板酶联杂交定量:由本室建立。(6)野生模板初始量的确定:采用Clementi等[1]介绍的公式: M/W=M'/W'。(7)统计学方法用Student's t检验。
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尼日利亚政府自2014年7月以来首次报告发生2例野生脊髓灰质炎病例
本刊讯尼日利亚在逾两年没有野生脊髓灰质炎(以下简称“脊灰”)病毒之后,该国政府2016年8月11日报告,称北部博尔诺州的2名儿童因该病瘫痪。
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野生与栽培黄管秦艽7种指标成分的比较研究
目的:比较野生与栽培黄管秦艽中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷和异牡荆苷7种指标成分的含量,为黄管秦艽的合理使用提供依据。方法:采用超高效液相色谱法。色谱柱为ACQUITY UPLC? BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为甲醇-0.04%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.3 ml/min,检测波长为242 nm,柱温为30℃。结果:马钱苷酸、獐牙菜苦苷、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷和异牡荆苷进样量分别在2.1~537.1、1.05~270、0.92~236、11.1~2830、0.75~192、0.167~102、0.216~52.80μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r≥0.9995),平均回收率为97.72%~99.84%(RSD≤3.39%,n=6)。野生黄管秦艽中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷的含量略高于栽培黄管秦艽,而异牡荆苷含量略低于栽培黄管秦艽,但差异均无统计学意义(P>0.05)。野生与栽培品中龙胆苦苷与马钱苷酸含量总和均高于2.5%,达到2015年版《中国药典》(一部)要求。结论:野生与栽培黄管秦艽7种指标成分的含量差异无统计学意义,且药典规定成分的含量都合格。
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不同产地野生与栽培地骨皮中香草酸含量的比较
目的:比较不同产地栽培与野生地骨皮中香草酸的含量变化.方法:采用高效液相色谱法对野生与栽培地骨皮中香草酸的含量进行测定.色谱柱为Dikma Kromasil C18 100A(250mm×4.6mm,5 μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸水溶液(15:85),检测波长为260nm.结果:香草酸的检测浓度在8.36~66.88 μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9994);平均回收率为97.53%,RSD=1.51%(n=6).栽培地骨皮中香草酸的含量整体高于野生地骨皮.结论:地骨皮的质量与其生长环境有密切关系.本试验结果可为地骨皮的开发利用提供科学依据.
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贵州野生和种植天麻中天麻素的含量比较
目的:比较贵州不同产地野生和种植天麻中天麻素的含量,为人工种植天麻提供科学依据.方法:天麻经微波萃取后采用反相高效液相色谱法测定其中天麻素的含量.结果:野生天麻中天麻素的含量高于种植天麻;不同产地野生天麻中天麻素的含量有差异,而种植天麻之间天麻素的含量差异不显著.结论:野生天麻的质量优于种植天麻.本研究可为天麻的种植提供一定的科学依据.
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栽培与野生羌活中4种化合物含量及抗炎作用比较
目的:比较栽培与野生羌活中4种化合物含量以及抗炎作用.方法:应用高效液相色谱(HPLC)法测定栽培与野生羌活中羌活醇、异欧前胡素、阿魏酸、佛手柑内酯的含量.复制二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型,观察栽培与野生羌活水提液与醇提液对炎症模型动物肿胀度的影响.结果:栽培羌活所含4种成分含量大多高于野生羌活.野生羌活(班玛、壤塘、康定、西宁)、栽培羌活(岷县、渭源)水提液可显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀,其中栽培羌活(渭源)水提液效果好;野生羌活(班玛、阿坝、壤塘、康定、西宁)醇提液、栽培羌活(岷县、渭源)醇提液可显著抑制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀,其中栽培羌活(岷县)醇提液效果好.结论:栽培羌活在化学成分含量及抗炎效果方面均等同于或强于野生品.
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济源地区野生品系冬凌草中挥发性成分分析
目的:分析济源地区野生品系冬凌草中的挥发性成分.方法:采用顶空固相微萃取(HS-SPME)法对河南省济源地区43种野生冬凌草地上部分中的挥发性成分进行提取,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法检测成分,采用面积归一化法计算各成分的相对含量.结果:43种野生冬凌草挥发性成分的种类和相对含量具有明显差异,种类在0~11种之间,相对含量在0~84.03%之间;石竹烯、石竹烯氧化物、二氢猕猴桃内酯、植酮和百秋李醇在多种不同品系野生冬凌草的挥发性成分中存在,是其主要成分;其挥发性成分的主要结构类型由萜烯类、酮类、醇类和酯类组成,此外在个别品系冬凌草中还含有少量的脂肪酸类,如棕榈酸、油酸和亚油酸.结论:济源地区不同品系野生冬凌草内在质量存在一定差异.
关键词: 冬凌草 野生 挥发性成分 顶空固相微萃取法 气相色谱-质谱联用法 -
新疆一枝蒿药材人工种植品种与野生品种的差异性分析
目的:比较新疆一枝蒿药材人工种植品种与野生品种药材之间的差异性,筛选两者之间的差异性组分.方法:采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)建立22批不同产地及采摘时间的新疆一枝蒿人工种植品种与野生品种药材的指纹图谱,采用Marker ViewTM软件、SIMCA-P 11.5软件进行主成分分析,分析人工种植及野生一枝蒿主成分特点,筛选差异变量,获得人工种植品种与野生品种的差异组分.结果:建立了22批一枝蒿(12批野生品种,10批人工种植品种)的指纹图谱,经主成分分析,人工种植品种与野生品种分组良好,有明显差异;不同采摘时间的人工种植品种主成分存在一定差异性,主要体现在开花前后,其中花蕾期、盛花期较集中;不同产地的野生品种植株有明显的地域差异,在组分和含量上均有一定差异性;通过正离子模式的矩阵发现了268个变量,负离子模式发现了155个变量,经差异变量提取共找出28组变量,确定出19个变量.结论:人工种植品种与野生品种一枝蒿的主成分有明显差异,主要体现在花期与采摘地等方面,可为新疆一枝蒿药材的规范化种植、原产地保护等提供理论依据.
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蒽酮-硫酸显色法测定栽培白及的白及多糖含量
目的 建立白及多糖的含量测定方法,比较栽培与野生白及的多糖含量差异.方法 采用水提醇沉法提取白及中的多糖,蒽酮-硫酸显色法、紫外分光光度法测定多糖含量.结果 蒽酮-硫酸显色法测定栽培白及的白及多糖含量准确度和稳定性均较好,精密度高;3年生栽培白及多糖含量与3年生野生白及相近,栽培变异较小.结论 蒽酮-硫酸显色法测定栽培白及的白及多糖含量可作为白及内在质量的评价方法,块茎繁殖栽培白及应3年后采挖.
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必须重视药用植物资源可持续发展——专访著名药用植物学家、中国工程院肖培根院士
近年来,随着人们对天然药物和天然保健品的需求日益增长,药用植物市场蓬勃发展.我国作为世界上野生药用植物种类众多、使用历史悠久、利用率很高的国家,药用植物发展现状究竟怎样,未来的发展方向如何?记者为此专访了我国药用植物和中药现代化研究奠基人之一,国际著名药用植物学家、中国工程院院士肖墙根教授.
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毒蕈中毒所致中毒性肝炎6例临床分析
毒草俗称毒蘑菇,因其外观与可食的无毒野生蕈相似,易被误采食用而引起中毒.由于毒草所含毒素不同,中毒后临床表现多样,故给临床诊断和治疗带来一定困难,病死率较高.我们对2006年6月我院收治的6例以肝损害为主要表现的急性毒蕈中毒(白毒伞)的诊治经过进行了分析.旨在提高广大医师对该类疾病的认识.及时采取有效的防治措施.
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儿童恙虫病伴多脏器损害36例临床分析
恙虫病称丛林斑疹伤寒,是由恙虫病立克次体引起的自然疫原性疾病,其传染源是鼠类及其它野生啮齿动物,传播媒介是恙螨.临床主要表现为高热、皮疹、肝脾淋巴结肿大及恙虫咬伤处的早期溃疡或焦痂.常伴有多系统、多脏器功能的损害.现将我院近年收治的恙虫病伴多脏器功能损害36例分析如下.
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黄连资源的利用与研究进展
小檗碱在医药等工业方面有重要的应用价值,而且我国也是小檗碱的主要生产国.近年来,野生黄连过量采挖,资源濒临枯竭,有必要对黄连进行合理的利用和规划,特别是人工栽培、组织培养、化合及转基因工程技术等多方面的开发黄连资源,这对于保护高山植物是极为有利的.
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金荞麦的栽培与商品化开发
金荞麦为蓼科多年生草本植物野荞麦(天荞麦)Fagopyrum dibotrvs(D.Don)Hara的根茎和块根,是我国民间的一种常用中草药,其地上部分及种子亦入药,野生或栽培.其性凉,味涩、苦,归肺,脾,胃经.功能清热解毒,消痈肿,清肺化痰,利咽,健脾消食.本品始见于<植物名实图考>,别名野荞麦、荞麦三七、金锁银开,天荞麦、苦荞麦等.金荞麦对呼吸系统和消化道疾病,特别是在治疗肺癌方面有独特的防治效果,具有很高的药用价值.野生金荞麦被列为国家二级野生保护植物,为保护和开发金荞麦,现就金荞麦的栽培与开发应用阐述如下.
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云南野生青头菌的化学成分分析
目的 了解野生青头菌的化学成分.方法 参照国家相关标准方法测定野生青头菌蛋白质、铜、铁、钙、锰、锌、硒等含量.结果 野生青头菌人体必需氨基酸的含量为0.58%,氨基酸总量为1.39%,必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA)为41.8%,硒为1.3 mg/100 g.结论 野生青头菌是一种含质优蛋白质和各种矿物元素营养丰富的野生菌.
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云南野生食用干巴菌的营养成分分析
干巴菌(Thelehhora ganhajun Zang)主要生长于亚热带云南松林或针阔混交林下,是一种狭域性分布的可食高等真菌,同其它食用菌相比,干巴菌不仅具备独特、浓郁的鲜香味,也含有大量的营养物质,如氨基酸、蛋白质、矿质元素、维生素等,具有很高的营养保健价值.是云南各族人民所喜爱的野生食用菌[1,2].干巴菌为本地特有珍稀野生菌,目前还不能人工栽培.为了进一步认识野生食用干巴菌的营养价值,我们对野生干巴菌作了较为全面的营养分析.旨在为干巴菌的开发利用提供科学依据.
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西部中药资源保护的问题和对策研究
建国以后,各地对中药资源基本沿用了"靠山吃山,靠水吃水"的经营方式.在计划经济时代,并未将其作为一种产业进行深度开发,中药材的来源更多地依靠野生采集.
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青海唐古特大黄野生和栽培品泻下作用比较研究
目的:比较研究青海高原唐古特大黄野生和栽培品的泻下作用.方法:采用炭末推进方法、酚红排空方法进行肠推进实验,观察野生及栽培品对小鼠小肠运动和大鼠大肠运动的影响.结果:与对照组相比,唐古特大黄野生和栽培品对小肠、大肠推进率均有显著性差异(P<0.01).结论:青藏高原唐古特大黄野生和栽培品均具有泻下作用,野生品和栽培品无显著性差异.
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四川省犬源性黑热病流行区的防治措施评价
四川省的黑热病流行区属犬源性黑热病流行区,主要的传染源是感染利什曼原虫的病犬,传播媒介是野生野栖习性的中华白蛉.通常情况下,黑热病为低度流行状态,呈散在、点状发病.当疫区的养犬数量增加并伴随家犬的感染率上升时,则会改变这种状态,引发局部的或大范围的黑热病暴发流行.在多年的黑热病防治工作中,为遏制疫情的迅速上升和蔓延,各县结合当地的实际情况采用过一些防治措施,现将这些措施介绍如下,并分析评价其作用和效果.
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四川青川野生淫羊藿的资源调查
目的 调查青川县野生淫羊藿药材的蕴藏量,为其合理开发及可持续利用提供依据.方法 采取查阅文献与野外实地调查相结合的方法,采用样方调查法并结合青川县植被类型分布面积,统计样方内淫羊藿的株数与重量等指标,计算全县野生淫羊藿药材的蕴藏量.结果 青川县野生淫羊藿的蕴藏量为3.92×103吨,其年允量约400吨.结论 初步摸清了青川县淫羊藿的资源分布情况,为其进一步开发和利用提供了依据;淫羊藿资源总蕴藏量在不断减少,要加强其野生资源的保护.