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超声波提取百里香中儿茶素和总多酚的工艺优化
目的:本文以百里香为原料,采用单因素实验方法研究了超声波提取过程中乙醇体积分数、超声功率、超声时间、料液比对总多酚和儿茶素提取得率的影响确定了佳提取工艺条件。方法:通过不同实验条件对百里香中儿茶素和总多酚含量的测定。结果:百里香中总多酚和儿茶素的超声提取优工艺为:乙醇体积分数90%,超声功率150W ,超声时间30min ,料液比1∶20。
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PCR-RFLP法检测葡萄糖激酶基因启动子-30位点变异的实验条件研究
目的确定用Alw21 I限制性内切酶切割PCR(聚合酶链反应)扩增葡萄糖激酶基因启动子区-30位点的适实验条件.方法按一定梯度设定酶切所用扩增产物量、内切酶的浓度、酶切时间,用2 g/dl低熔点琼脂糖凝胶(含0.5μg/ml的溴乙锭)电泳,透射式紫外灯下观察酶切结果.结果20 μl的酶切体系中,适酶切产物为5μl,适内切酶量为5U,酶切时间应超过9 h.结论参数偏离适条件将会导致实验失败.
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血小板聚集实验条件优化的研究
目的 对血小板聚集实验条件的优化进行讨论.方法 应用诱导剂二磷酸腺苷(ADP)检测29份血浆标本,比较不同来源试剂及不同标本处理方法对实验结果的影响.结果 实验过程中向300 μl血浆加入10μl ADP可得到较为准确的结果;国产和进口二磷酸腺苷作为诱导剂无显著差异;采血至检测3 h之内与3 h之后检测结果有差异.结论 国产试剂和进口试剂检测结果无显著差异,标本的不同处理方法如采血至检测的时间对于血小板聚集的检测有影响.
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ELISA法操作中应引起重视的两个问题
ELISA法是免疫学检验中为常用的方法,我科长期使用上海科华公司提供的五项指标ELISA试剂,实际工作中体会到,ELISA法测定五项指标的质量控制,除与工作人员的责任心、技术熟练程度、器材的质量、实验条件的控制等因素有关外,以下两个问题不可忽视.
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体外重组基底膜侵袭实验条件及计数方法的探讨
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成年狗股骨微波高温灭活后的再血管化研究
作者建立了长骨微波高温灭活的动物模型,并观察其再血管化过程.选用成年杂种狗16只,无菌条件下显露一侧股骨并游离髁上约8 cm骨段,隔热材料保护周围组织,间距2.5 cm置入微波天线2根,间断加热,维持骨皮质表面温度50℃~60℃ 30min.术后不同时间进行ECT骨扫描,取材前进行土霉素标记,印度墨汁灌注等方法证实约有5 cm~6 cm骨段在灭活后完全失去血运,不产生土霉素荧光标记.灭活骨段4 wk左右首先从后侧肌间隔处接收血液供应,并以再血管化的方式开始再生.12 wk时,髓腔及骨皮质外2/3形成新生血管网,骨皮质内带血管稀疏.6 mo以后,骨皮质内带血供明显改善.术后12 wk以前,灭活骨段的爬行替代以骨吸收表现为主.6 mo以后,绝大多数新生血管周围均进入骨形成期.新生骨呈非随机性分布,至术后1 a,大部区域死骨面积仍占50%以上,而后侧肌间隔处骨皮质大部分已被新生骨替代.本实验首次建立了成年狗股骨微波高温灭活的动物模型,并证实了后侧肌间隔对大段股骨再血管化的重要性.在实验条件下,微波高温灭活骨显示了良好的骨修复能力. (张惠中)
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等位特异PCR检测FOXC2检测基因多态性实验方法研究
目的 研究等位特异PCR方法检测FOXC2基因5'非编码区512C/T多态性的实验条件.方法 对实验研究中的主要影响因素设置各系列浓度梯度,进行PCR反应后观察电泳结果选取适条件.结果 适温度为58°C,适Mg2+浓度为3.0mmol/L,适dNTP浓度为2.5 mmol/L.结论 摸索适实验条件是进行批量实验的前提和关键.
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浅谈病理学实验教学
病理学实验教学是病理学教学的重要组成部分,约占病理学总学时的1/3.因此,在充分注重理论课教学的同时,还应高度重视实验课教学.
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银镜反应实验条件探究
银镜反应在有机化学实验中出现频率高,是鉴别醛基存在的典型实验[1].做好银镜反应实验,对于理解物质的性质、结构都有重要意义.不仅是醛类,凡含有醛基的物质(如葡萄糖、甲酸等)都有此特征反应.在高职化学教学中,这3类物质都安排有银镜反应实验[2,3].但高职化学教科书对银镜反应的实验条件叙述较少,且比较粗略.学生按其方法操作,很少能产生漂亮的银镜.因此,探索银镜反应的佳实验条件,让大多数学生成功制出漂亮的银镜,对于提高学生学习积极性有非常重要的意义.
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正交实验法在纤维素水解佳实验条件探究中的应用
正交实验法在科学、合理地安排实验,对实验结果进行科学分析,得到正确结论方面具有重要的作用.在纤维素水解实验的课堂演示过程中,由于对实验条件选择不当,造成实验结果不理想.因此,用正交实验法找出纤维素水解的佳实验条件,从而达到较好的实验效果.
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甲酸银镜反应成功的条件
甲酸的银镜反应是有机化学教学中一个重要的知识点,学生实验往往难以成功.为了提高甲酸银镜反应的成功率,经过多次实验,发现甲酸溶液的pH值在10~12,银氨溶液用3mol/LNH3·H2O和0.5mol/L以上的硝酸银溶液配制,水浴温度控制在80℃~90℃,甲酸银镜反应就能成功.
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关于我校基础医学综合形态实验教学模式的改革研究
根据国家教委"高等学校实验室工作规程"的文件精神,我校形态学实验室于1999年重组合并,管理体制上完成了重大的改革.改变了实验室为一门课程服务、分散的管理模式,建立起以学科群为管理体制的教学实验室,2000年形态学实验室参与了教育部世行贷款教学体系改革的研究课题;2005年获得教育部国家级教学成果二等奖,2006年被教育部批准为第一批"国家级教学示范中心".为医学生的培养奠定了教学环境和软硬实验条件的平台.形态学实验室的重点任务是创建融合性形态实验教学,学生在实验室应该在实验室得到创新精神的培养和创新能力的训练.
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组织DNA分离、纯化与鉴定的质控和优化
分子生物学是生命科学的带头学科,其理论与实验技术已广泛地渗透到生命科学的各个领域,在医学基础理论和临床应用中正显示出日益重要的意义.为此学习和掌握分子生物学基本技术已成为从事和即将从事生命科学工作者的迫切需要与愿望.2002年生物化学暨分子生物学教研室对本科实验教学进行了大幅度的改革,除保留了8学时的生物化学实验内容外,增添了28学时的新近发展起来的分子生物学新技术,其中组织DNA提取纯化与鉴定技术就是一个既具备综合性,又能够为学生创造一个设计思路的大实验.通过两年的运转,不断地对其技术进行优化,对实验条件进行质控,使这项新技术不断完善、稳定,为实验教学提供了一个较高的技术平台.
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反相高效液相色谱法测定猪血浆中异丙酚浓度
异丙酚是一种新型的静脉麻醉药,因其有起效快、时效短、苏醒迅速、副作用少等特点,欧、美国家20世纪80年代已开始应用.近年我国临床也越来越广泛应用于静脉麻醉,利用大动物实验了解异丙酚在大动物体内的药时变化规律,不同合并用药之间代谢的相互影响,以及不同临床治疗干预对药物浓度和药动学的影响.很多实验目前在人体还未曾被证明是安全的,因而大动物实验对于临床上更好地应用异丙酚提供理论依据有着重要的意义.目前国内外测定血浆中异丙酚的药物浓度采用的方法有气相色谱、液相色谱、气-质联用等方法,国内以液相色谱法较为普遍,但因实验条件不同,测定方法也各不相同,本实验建立了适合我院实验条件的测定猪血浆中异丙酚浓度的反相高效液相色谱方法,此法操作简单,灵敏度高,可适用于大动物实验的血药浓度测定.
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检验科要重视实验前的质量控制
伴随着基础医学的飞速发展,先进科学技术和试验仪器的广泛使用,检验医学在临床诊治疾病的工作中发挥的作用越来越重要,检验科通过加大质量管理的力度,强化和落实实验室管理的相关规定以及先进的实验条件的改善,分析中的误差大大降低了,分析前的误差越来越引起大家的高度重视,然而分析前的质量控制牵涉的面较广,问题错综复杂,有许多问题还没有被人们所认识,甚至存在着许多认识上的误区,对检验技术人员来说做好分析前误差质量控制是有一定的难度的.有资料表明,实验误差中,70%以上的误差发生在分析前,因此,检验科应重视分析前质量控制,为分析中及分析后质量管理打下一个良好的基础.以下是本人工作中的一些体会,和各位同仁分享.
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临床检验实验教学工作中的安全问题及解决办法
在临床检验专业教学中,只有井然有序的管理好实验室,密切配合教学和科研,才能大程度的发挥实验室的教学功能,实现实验室和仪器设备等实验条件的资源共享.但是,在临床检验实验教学工作中,为了使学生深入了解所学知识,就不可避免的在实验室中使用一些特殊标本:如携带乙肝病毒(HB)和艾滋病病毒(HIV)的血和其它病原体在内的多种疾病的传播载体.实验教学工作中所用试剂,绝大多数都具有毒性和腐蚀性,部分试剂还具有易燃易爆性.所以在临床检验教学工作中,实验室生物安全是应首要被关注的,要强化培养学生“安全第一”的意识,要求学生严格遵守各项实验室生物安全工作制度,确保学生在实验室进行实验操作时的安全[1].
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转化生长因子-β1对肌腱细胞DNA及胶原合成的影响
近年来的研究表明,转化生长因子-β1(TGF-β1)在肌腱的修复中起重要作用[1,2 ].而TGF-β1对细胞增殖分化作用的调节不仅与细胞来源、实验条件及其他生长因子有密切关系,亦与分化程度、细胞基质及其作用时间和剂量等密切相关[3].笔者通过同位素掺入及RT-PCR法观察TGF-β1不同作用剂量对人胚腱细胞DNA及胶原的合成效应,
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体视学对于睾丸生物学研究的贡献
男性和女性的生育控制问题是本世纪一个重要的生物学研究领域。女性生育的有效控制方法已存在好多年了,然而,用于男性的有效的方法还没有找到。近年来,人们试图确定荷尔蒙对精子产生的调节作用,期望找到与女性避孕同样有效并可接受的方法。睾丸包括生精管和裂隙腔,生精管中容纳的是滋养幼芽上皮细胞的Sertoli细胞,裂隙腔中容纳的是产生睾丸激素的Leydig细胞。在精子产生过程中,精原细胞通过有丝分裂繁殖,其下一代经过减数分裂产生单倍体圆形精子细胞,接着发生一系列复杂的形态变化成为成熟的长形精子细胞,成熟后的精子就具有受精能力。维持幼芽上皮细胞的Sertoli细胞在人的一生中不发生大的变化。Sertoli细胞维持幼雅细胞的能力是有限的,但在不同人之间其能力有一个较大的变化范围。因而,Sertoli细胞的数目决定了睾丸产生精子的大能力。对于精子产生的调节涉及到内分泌、副分泌和自分泌机制。体视学和各种形态测定工具已成为实验条件和自然条件下睾丸生物学研究的一把钥匙,这些研究包括了解Sertoli细胞的繁殖以及调节精原细胞转变为成熟细胞的效率的因素。从而提出精子发育的规律性,由荷尔蒙对精子产生调节作用的模型。
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疼痛临床科研设计中应注意的若干问题
疼痛临床研究是以人为研究对象,人是复杂的生命体,个体差异很大,实验条件不易控制,影响研究结果的因素很多.而疼痛又是一种主观感觉和感受的体验,缺乏客观依据.虽然目前有各种评价疼痛的方法,但主观性很大,缺乏客观指标.因此,为了保证研究结果的科学性、真实性,合理的设计就显得更加重要.
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河北省邢台市疼痛研究所简介
邢台市疼痛研究所是河北省首家以研究疼痛性疾患为主的专业机构,行政录属于邢台市医院高等专科学校临床系,依托于有利实验条件,服务于临床诊疗工作.