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芪芍复脉汤对大鼠下肢缺血模型CD34+细胞比例的影响
目的 观察芪芍复脉汤对大鼠下肢缺血模型CD34+细胞比例影响.方法 将SD大鼠行左下肢股动脉结扎、分支剔除术,制作下肢缺血模型.随机分为模型组,芪芍复脉汤高、中、低剂量组和粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)组,并设立假手术组,假手术组仅暴露股动脉.术后第2天开始给药,分别于第3天、7天、14天,检测外周血酶学变化和CD34+阳性细胞比例,比较各组差异.结果 术后第3天,模型组酶学水平较假手术组显著上升(P<0.05),第7天、第14天各组酶学指标较第3天时显著下降(P<0.05).术后各时间点,芪芍复脉汤高、中剂量组CD34+细胞比例较模型组和低剂量组显著升高(P<0.01),且术后第7、14天高剂量组高于中剂量组(P<0.01);高、中剂量组CD34+细胞比例术后第7天较第3天显著升高(P<0.01),第7天到第14天各组呈下降趋势,并且高剂量组较rhG-CSF组下降缓慢.结论 芪芍复脉汤可增加缺血下肢外周血中CD34+阳性细胞比例,促进血管新生,其机制可能与其能动员骨髓中的EPCs释放有关.
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血管内皮祖细胞的研究进展
在胚胎发育过程中,血管系统的建立始于两种方式:血管发生和血管新生.传统理论认为血管新生即是出生后血管发生的代名词.然而,近年来发现循环中存在骨髓来源的血管内皮祖细胞,并与出生后血管发生密切相关,具有重要的生理、病理意义.这不仅拓展了干细胞的研究,也为缺血性疾病和肿瘤的治疗提供了新策略.本文简述了血管内皮祖细胞的来源、细胞表面标志、生物学特性、生理病理意义及其临床应用前景.
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可注射血管内皮祖细胞-载体材料复合物的体外研究
目的 研究可注射性血管内皮祖细胞载体材料复合物的体外生物相容性.方法 从犬外周血中分离出单个核细胞体外扩增培养形成贴壁(AT)细胞,将AT细胞分别与藻酸钙(CA)和温度依赖性合成水凝胶(TDSH)溶液混合,混合液中AT细胞的浓度为l×109 个/mL,并分别置于相同体系的培养基中体外培养,同时采用相同体系的血管内皮祖细胞作为对照,相差显微镜分别计数培养4、7d的AT细胞数.并分别于第7、29d,采用流式细胞术测定AT细胞中CD34+细胞数和细胞凋亡率.结果 第4、7d单个核细胞单独培养和单个核细胞+CA复和培养形成的AT细胞数和细胞簇数量明显多于单个核细胞+TDSH复合培养(P<0.05).流式细胞术结果显示AT细胞中CD34阳性率在三组无显著性差异.TDSH+单个核细胞组凋亡率明显高于其他两组.结论 在体外培养时,藻酸钙与血管内皮祖细胞有良好的生物相容性,可作为血管内皮祖细胞载体材料用于细胞移植.
关键词: 血管内皮祖细胞 藻酸钙 温度依赖性合成水凝胶 -
造血调控相关的细胞因子与血管内皮祖细胞
血管内皮祖细胞是一类能循环、增殖并能直接分化为血管内皮细胞的前体细胞.研究血管内皮祖细胞对于了解成人生理性和病理性血管形成的过程有重要意义,而细胞因子尤其是造血调控相关的细胞因子作为体内的细胞刺激物质对血管内皮祖细胞也有重要作用.本文将对血管内皮祖细胞和一些造血调控相关的细胞因子(G-CSF、EPO、HAPO和IL-18)的关系及其可能的信号传导途径的研究进展作一综述.
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血管内皮祖细胞的研究及其在介入治疗中的应用前景
大量研究证实血管内皮祖细胞,可定向于受损伤的血管内皮,并可分化为成熟的血管内皮细胞,从而达到修复损伤血管的目的,因此,可用来治疗血管损伤.这一研究可能对介入放射学治疗血管性疾病如:血管闭塞及狭窄、缺血性疾病等,提供新的突破,本文就血管内皮祖细胞的细胞来源、表面标志、生物学特性及临床研究进行综述.
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骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗实验性大鼠股动脉闭塞症观察
目的观察骨髓来源的血管内皮祖细胞(EPC)移植治疗实验性大鼠股动脉闭塞症的可行性与疗效. 方法建立实验性股动脉闭塞大鼠模型.分离纯化雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),经体外培养、扩增并诱导分化、体外BrdU标记后移植到16只模型大鼠的右侧后肢(A组),同体左侧相同部位注射生理盐水作为对照(B组).分别在移植当天、移植后第14天和第28天行双下肢激光多普勒扫描,并分别于移植后第14天(8只)和第28天(8只)处死动物取双下肢肌肉组织,行免疫组织化学(FⅧ、BrdU)检查.结果移植后第14天与移植当天、移植后第28天与移植后第14天相比,A组移植后下肢血流量增加( P<0.05);A组与B组相比,血流量亦增加( P<0.05).A组肌束间血管内皮细胞呈BrdU阳性染色,而B组则为阴性.平均每视野FⅧ染色阳性的毛细血管数目A组明显多于B组( P<0.01).结论骨髓来源的EPC移植可增加缺血部位血流量和毛细血管的密度.
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血管内皮生长因子基因转染自体骨髓血管内皮祖细胞治疗下肢缺血的实验研究
目的:利用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF165)基因转染体外诱导的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),并移植到下肢缺血的高脂血日本大耳兔体内,观测其促进血管新生、改善肢体缺血的效果.方法:①制作高脂血兔,梯度离心法分离兔骨髓单个核细胞(MNCs),用内皮细胞专业培养基(EGM-2)诱导培养EPCs,并用双荧光染色法及免疫组化等方法进行鉴定.②脂质体介导携带EGFP标记的VEGF165质粒转染EPCs,用激光共聚焦显微镜检测VEGF蛋白的表达,用流式细胞仪检测转染率.③制作兔单侧下肢缺血模型,并将其随机分为A、B、C 3组,分别移植EPCs、VEGF165基因转染后的EPCs及EGM-2培养基,多种方法检测移植效果.结果:①诱导出的梭形细胞,经FITC-UEA-I和DiI-acLDL荧光双染证实为正在分化的EPCs,同时经免疫组化法证实其Flk-1和Ⅷ因子的表达.②激光共聚焦显微镜下见绿色荧光蛋白表达,证实VEGF165转染成功,经流式细胞仪检测得到转染率约22.5%.③DSA及免疫组化检查显示VEGF165基因转染后的EPCs移植后改善肢体缺血的效果优于其他2组.结论:VEGF基因转染EPCs后能改进EPCs质量,移植后促血管新生能力增强,其效果优于未转染组.
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预防和治疗高血压饮食调理--美国心脏病学会建议方案
1导致血压升高的因素有哪些?血压升高与环境及遗传因素有关,或者两者共同作用的结果.环境因素中包括饮食、缺乏锻炼、有害物质和精神因素,其中饮食是影响血压稳态的为突出并占主导地位的因素.心血管病危险因子与血管内皮祖细胞问:血管内皮功能障碍在动脉粥样硬化(AS)时起什么作用?
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关注血管干细胞与糖尿病并发症——血管干细胞在糖尿病并发症发病与治疗中扮演的角色
长期高血糖导致微血管和大血管结构和功能的改变.血管内皮细胞(EC)是高血糖引起的不良影响的主要目标.血管干细胞可以生成为血管内皮祖细胞(EPCs)和间充质祖细胞(MPCs),对糖尿病患者意味着一种有吸引力的细胞治疗的方法.大量的研究报道EPC功能障碍作为新的因素,参与糖尿病并发症发生.识别EPCs以及这些祖细胞和造血干细胞之间的相似性的争论导致一些矛盾的结果.另一方面,尚未发现MPCs在并发症发病机制中存在作用.然而,这些多能细胞确实显示出治疗作用.我们在本文总结了糖尿病并发症中发生的血管改变以突出一些共同特征,其中关键的发现阐明了血管干细胞(VSCs)在慢性糖尿病并发症发病机制中的重要作用,并且提出这些细胞用于治疗的机制.
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兔血管内皮祖细胞的分离及诱导分化
目的:探讨自兔骨髓中分离及诱导血管内皮祖细胞(EPCs)的方法.方法:抽取兔骨髓,Ficoll离心液梯度离心,分离出骨髓单个核细胞,用含有血管内皮生长因子(VEGF)、碱性纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的M199培养液诱导培养EPCs,透射电镜及免疫荧光法对所培养细胞进行鉴定.结果:细胞诱导培养48~72 h后即可见有细胞贴壁.逐渐变成梭形.培养至8 d左右,可观察到数条由梭形贴壁细胞直线生长连接而成的条索,7~10 d出现多个细胞团,贴壁的梭形细胞开始从细胞团的边缘出芽长出,培养至14 d左右,细胞逐渐融合,连接成大片条索状结构.透射电镜及免疫荧光检查证实为血管内皮祖细胞.结论:梯度离心法自兔骨髓获得单个核细胞,在体外经诱导分化可获得血管内皮祖细胞.
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实验用兔骨髓采集的新方法
本文介绍了实验用兔的骨髓采集方法.从麻醉、器械准备、操做过程及注意事项这几个方面具体描述了一种实用的家兔骨髓采集方法,为骨髓干细胞研究提供实验基础.
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血管内皮祖细胞和血管新生的研究进展
存在于外周血的血管内皮祖细胞参与血管新生的事实已被多方实验所证实,这为治疗心肌缺血开辟了新途径.本文主要就这方面的研究进行了综述.
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血管内皮祖细胞研究进展
血管内皮祖细胞(Endothelial progenitor cell,EPC)是血管内皮细胞的前体细胞, 又称为血管母细胞(Angioblast),不仅参与胚胎血管生成,而且近几年研究发现,EPC也参与出生后的血管发生过程,提示它在缺血性疾病、创伤愈合过程中的重要治疗作用和广阔的临床应用前景[1- 4].本文就目前有关EPC的来源、生物学特征、发育分化、动员与归巢及其应用研究作一综述.
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内皮祖细胞生物学特性及其在心血管系统中的作用
血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是指具有特异性归巢于血管新生组织并能分化增殖为成熟内皮细胞的一群干/祖细胞,是中胚层卵黄囊血岛原血干细胞(hemangioblast)向内皮细胞分化过程中的一个过渡阶段.该细胞在出生后的新生血管发生/生成中起重要作用.实验证实成人外周血存在能分化为血管内皮细胞的EPCs[1],并且由此生成的内皮细胞还在缺血性疾病和创伤愈合中发挥重要作用[2].
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p53-miR-34a-SIRT1反馈环在血管内皮祖细胞复制性衰老过程中的调控作用及机制
目的:研究p53-miR-34a-SIRT1反馈环在血管内皮祖细胞(EPC)复制性衰老过程中的调控作用及机制.方法:培养并鉴定由脐带血来源的EPC;观察第三代和第六代EPC在衰老、凋亡、周期和血管形成等方面的差异;检测第三代和第六代EPC中p53、乙酰化的p53(Ac-p53)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)的表达情况;构建携带微小核糖核酸(miR)-34a 抑制因子的慢病毒载体,明确外源性miR-34a抑制因子能否延缓第六代EPC的凋亡.结果:成功培养了脐带血来源的EPC.第六代EPC的衰老率和凋亡率明显高于第三代EPC,细胞周期主要停留在G0/G1期;第六代EPC的p53表达量高于第三代EPC,Ac-p53和SIRT1表达则相对较低,组间差异均有统计学意义(P均<0.05).转染携带miR-34a抑制因子的慢病毒载体后,第六代EPC衰老情况有所改善,血管形成能力也增强,晚期凋亡率明显减少.结论:p53-miR-34a-SIRT1是EPC复制性衰老过程中的重要反馈调节机制,miR-34a抑制因子可能是延缓EPC衰老的靶点.
关键词: 血管内皮祖细胞 细胞衰老 凋亡 肿瘤抑制蛋白质p53 SIRT1 -
外周血中内皮祖细胞与冠心病合并糖尿病关系的研究进展
1997年,Asahara等[1]首次提出体内存在血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),其研究结果发表在《Science》杂志,之后有关内皮祖细胞的研究日益增多。EPCs在动员、迁移后也能形成新血管,这一过程后来也被称为“血管新生”,被认为是血管内皮细胞的前体细胞。本文主要结合内皮祖细胞的基础及临床相关研究结果,对其与冠心病、糖尿病的关系作一综述。
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小型猪外周血来源的血管内皮祖细胞的体外培养与分化研究
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心肌缺血再灌注对血管内皮祖细胞功能基因的影响
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血管内皮祖细胞的研究进展
Asahara等[1]1997年首次在Science杂志提出血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)以来,有关EPC的研究日益增多.EPC是血管内皮细胞的前体细胞,又称为血管母细胞(angioblast),不仅参与胚胎血管生成,而且近几年研究发现,EPC也参与出生后的血管发生过程,提示它在缺血性疾病、防止血管再狭窄、血管创伤愈合等过程中的重要治疗作用和广阔的临床应用前景.本文就目前有关EPC的来源、发育分化、动员与归巢及其应用研究作一综述.
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内皮祖细胞功能状态及其调节
自1997年Asahara等首次在成体外周血中发现血管内皮祖细胞(EPC)以来,有关EPC的研究日益增多,彻底改变了传统血管新生的概念.同时,大量动物实验和初步临床研究均显示EPC在治疗缺血性心脏病、外周血管缺血性疾病及血管损伤后再狭窄等方面具有广阔的临床应用前景.近年来,越来越多的学者倾向于EPC是一种细胞的功能状态,而非特指某一群细胞实体[1].本文围绕这一观点及EPC功能状态的调节作一综述.