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柱前衍生化法测定化学合成丹皮酚中硫酸二甲酯残留量
目的：建立一种化学合成丹皮酚中硫酸二甲酯残留的柱前衍生化高效液相色谱测定方法。方法硫酸二甲酯在碱性和加热的条件下与对硝基苯酚反应生成对硝基茴香醚，经C18柱分离，用紫外检测器检测。结果衍生反应转化率稳定，耐用性良好，空白及丹皮酚供试品均不干扰硫酸二甲酯的检测，硫酸二甲酯浓度在0．122～1．220 mg · L-1的范围内具有良好的线性关系，检出限为0．82 ng，对照溶液测定的峰面积日内和日间精密度的相对标准偏差分别为1．69％（n＝6）和1．89％（n＝12），平均加样回收率98．8％（RSD＝1．40％，n＝9）。结论该法专属性高、精密度好、准确灵敏，适用于测定化学合成丹皮酚中的硫酸二甲酯残留。
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柱前衍生HPLC法测定丙戊酸钠的血药浓度及其临床应用
目的 建立柱前衍生HPLC法测人血清中丙戊酸钠血药浓度的试验方法及临床应用.方法将血清酸化后用正戊烷提取,ɑ-溴苯乙酮和三乙胺衍生,然后用HPLC法进行测定,其中色谱柱为大连依利特ODSC18,流动相为甲醇:水 (65:35),柱温30℃,检测波长262 nm,流速为1.2 ml·min-1.结果丙戊酸钠浓度在 20～200 mg·L-1范围内与峰面积比线性关系良好(r=0.9996),低监测浓度为7 mg·L-1,平均方法回收率为99.6%,萃取回收率为96.6%,日内日间RSD均<4%.结论该方法简便快捷,灵敏准确,可应用于丙戊酸钠血药浓度的快速检测,本院采用该方法监测了23例病人,效果良好.
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柱前衍生-HPLC法分析硫酸庆大霉素缓释片的释放度
以庚烷磺酸钠为反离子,利用庆大霉素结构中氨基同邻苯二醛(OPA)、巯基醋酸在pH 10.4的硼酸盐缓冲液中反应,生成1-烷基-2-烷基硫代异吲哚衍生物,在330 nm波长处有强吸收,建立离子对色谱法对硫酸庆大霉素缓释片的释放度进行测定.较原UV法,柱前衍生-HPLC法影响因素少,重现性好,能有效地控制硫酸庆大霉素缓释片的质量.
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香砂六君丸中γ-氨基丁酸的含量测定
目的 测定香砂六君丸中γ-氨基丁酸的含量.方法 在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应,生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物,采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm,5μm),用二元梯度洗脱方式,流动相A为0.05mol·L-1醋酸钠溶液(pH6.5)-乙腈(95∶5),流动相B为乙腈-水(80∶20),检测波长:248nm.结果 γ-氨基丁酸在2.253μg·mL-1～13.518μg·mL-1的浓度范围内有较好的线性关系,加样回收率为99.1%.结论 本方法 结果 准确,重现性好.
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柱前衍生-HPLC法测定硫酸庆大霉素注射液的含量
目的 建立一种测定硫酸庆大霉素含量的PHLC法.方法 硫酸庆大霉素经氯甲酸芴甲酯衍生化后用HPLC法测定.以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱,流动相为乙腈:0.1mol·L-1醋酸盐缓冲液(75:25);流速1mL·min-1,检测波长为265nm.进样量20μL.结果 硫酸庆太霉素在浓度13～256 U·mL-1的范围内线性良好(r=0.9996,n=6).平均回收率为99.64±1.55,RSD%为1.55(n=9).结论 本法简便、准确,灵敏,可作为硫酸庆大霉素注射液的含量测定方法.
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OPA-FMOC联用柱前衍生法测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量
采用邻苯二甲醛(OPA)和氯甲酸芴甲酯(FMOC-CL)与氨基酸进行柱前衍生,HPLC测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量.方法简便、快速、准确.
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柱前衍生HPLC法测定依达拉奉注射液中L-半胱氨酸含量
目的 建立柱前衍生化HPLC法测定依达拉奉注射液中L-半胱氨酸盐酸盐含量的方法.方法 以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1mol·L-1醋酸钠溶液(用冰醋液调节pH至6.5)(45∶55),流速为1.0mL·min-1,检测波长254nm.结果 L-半胱氨酸盐酸盐衍生物浓度在0.4～4.0μg·mL-1范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);平均回收率100.5%,RSD为1.4%(n=9).结论 本方法快速准确.
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RP-HPLC法测定赖氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨酸的含量
目的 建立反相高效液相色谱检测方法赖对氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨酸的含量的方法.方法 优选盐酸横氨酸组份的柱前衍生条件及色谱条件.结果 在选定的柱前衍生条件和色谱条件下,盐酸赖氨酸的分析不受辅料和其他物质的干扰.结论 本方法专属性强,灵敏度高,可用于赖氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨酸的含量测定.
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OPA柱前衍生RP-HPLC-FLD测定小鼠脑组织中6种氨基酸类神经递质
目的 建立一种无需梯度洗脱,同时测定脑组织中6种氨基酸类神经递质含量的RP-HPLC方法 .方法 以邻苯二甲醛为柱前衍生化试剂,DiamonsilTM(钻石)C18(5μ×4.6mm)色谱柱分离,0.1mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 6.0):甲醇:乙腈体积比为6:3:1做流动相,高丝氨酸做内标,荧光检测器测定样品中6种氨基酸(天冬氨酸(Asp),谷氨酸(Glu),谷氨酰胺(Gln),甘氨酸(Gly),牛磺酸(Tau)和 γ-氨基丁酸(GA-BA))的含量.结果 6种氨基酸在25min内分离完全,同内标峰面积的比值在0.5~40μmol·L-1的浓度范围内线性关系良好,相关系数在0.9994~0.9999之间.结论 本方法 准确,简便,快速,灵敏度高,适用于一般实验室对脑组织中微量氨基酸的检测.
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柱前衍生超高效液相色谱法测定人血浆中丙戊酸钠的含量
目的 建立超高效液相色谱法测定人血浆中丙戊酸钠浓度的方法 . 方法 将血样酸化,采用正戊烷提取,以环己烷羧酸为内标,a-溴苯乙酮为衍生化试剂,采用超高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度. 采用 Shim-pack XR-ODS Ⅲ柱(1.6μm,75L ×2.0),流动相为甲醇-水(70:30),检测波长为248nm,流速0.4mL· min -1,柱温:40℃. 结果 血浆中丙戊酸钠线性范围为 12.5 ~150.0μg· mL -1,平均回收率 >98.27%,日内、日间RSD<0.97%. 结论 本法快速、简便、准确,适用于临床常规监测需要.
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柱前衍生HPLC法测定丙戊酸钠的血药浓度
目的 建立快速柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸钠(VPA) 血药浓度的方法.方法 选择ε-溴苯乙酮为衍生化试剂,环己烷羧酸为内标,Hypersil ODS-C18柱(250mm×4.6mm,5μm) 为分析柱;流动相为甲醇-水(80∶20) ,检测波长为248nm,流速1mL·min-1,柱温室温.结果 内标环己烷羧酸和VPA的保留时间分别7.7min、13.3min,丙戊酸钠(VPA)血药浓度在15～200mg·L-1范围内呈良好线性关系(r=0.9996),平均相对回收率和绝对回收率分别为99.6%、82.4%,日内、日间RSD均＜3.5%.结论 本法快速、简便、准确,适合临床常规监测需要.
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两种方法测定对乙酰氨基酚注射液中盐酸半胱氨酸含量的比较研究
目的 比较紫外-可见分光光度法和柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)两种方法测定对乙酰氨基酚注射液中抗氧剂盐酸半胱氨酸的含量差异,研究盐酸半胱氨酸含量测定方法的可靠性.方法 紫外-可见分光光度法:通过盐酸半胱氨酸与酸性茚三酮溶液反应生成红色产物,在559 nm波长处测定吸收度;柱前衍生HPLC:以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,与对乙酰氨基酚注射液在60℃水浴暗处反应,HPLC测定.采用Agilent extend C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.014 mol/L磷酸氢二钾溶液(用磷酸溶液调pH 8.2)(35:65)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长360 nm.结果 使用紫外-可见分光光度法,测得3批样品的含量分别为0.24,0.24,0.23 mg/mL.使用柱前衍生HPLC,测得3批样品的含量分别为0.23,0.24,0.23 mg/mL.结论 紫外-可见分光光度法和柱前衍生HPLC均可准确测定对乙酰氨基酚注射液中的抗氧剂盐酸半胱氨酸的含量.
关键词： 盐酸半胱氨酸 紫外-可见分光光度法 柱前衍生 高效液相色谱 -
高效液相色谱法快速测定海产品中牛磺酸
目的建立用高效液相色谱快速测定海产品中牛磺酸的方法.方法将长竹蛏去壳,经匀浆、水煮、离心后用磺基水杨酸沉淀蛋白,采用邻苯二甲醛柱前衍生,通过Eclipse Zorbax C18柱进行分离、330 nm波长测定牛磺酸含量.结果此法平均回收率为101.3%,精密度、灵敏度较高,其它成分不干扰本测定.结论此法可以快速测定海产品中的牛磺酸.
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柱前衍生高效液相色谱法检测盐酸莫西沙星中侧链方法研究
目的 建立测定盐酸莫西沙星中侧链的方法.方法 采用柱前衍生反相高效液相色谱(HPLC)法,采用C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.1％三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至7.5)-乙腈(50:50)为流动相,流速为1.0 mL?min-1,检测波长为245 nm.结果 盐酸莫西沙星侧链在0.210～1.577μg?mL-1浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为0.013μg?mL-1,定量限为0.042μg?mL-1,加标回收率为102.8％～106.2％.结论 该方法简单快速,专属性强,准确度好,灵敏度高.
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三斑海马多糖的单糖组成测定影响因素考察
目的 研究不同因素对三斑海马多糖(HTP)降解的影响,探求适合其单糖组成测定的降解条件.方法 通过设计正交实验,采用三氟乙酸(TFA)对HTP进行降解,结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱进行单糖组成分析,比较各实验的降解情况.结果 HTP中主要含有Man、GlcN、Gal和少量的GalN、Glc、GlcA、Ara、Fuc共8种单糖.在考察条件范围内,温度和时间是影响单糖组成分析的主要因素,酸浓度是次要因素.HTP中各单糖的适降解条件是:氨基糖GlcN和GalN为120℃,6h,4 mol/L TFA;中性糖Man、Glc和Gal为110℃,4h,3 mol/L TFA;糖醛酸GlcA及Ara、Fuc为100℃,2h,3 mol/L TFA.通过对10种单糖标准品的降解也发现氨基糖(GlcN和GalN)较稳定,糖醛酸(GlcA和GalA)稳定性差.结论 HTP中不同结构类型的单糖对降解条件的敏感度不同:糖醛酸易降解释放,但也易被破坏;氨基糖较难降解,但降解后较为稳定;中性糖的降解难易和稳定性介于两者之间.采用同一条件降解不能准确地测定HTP的单糖组成,需要针对不同结构类型单糖的性质采用不同的条件进行降解.
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柱前衍生液相色谱法测定藻酸双酯钠的含量
目的 建立测定海洋药物藻酸双酯钠(PSS)含量的柱前衍生化高效液相色谱方法.方法 利用0.1mol/L稀硫酸将PSS降解为D-甘露糖醛酸(M)和L-古罗糖醛酸(G),并与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行柱前衍生化反应,采用高效液相色谱法测定PSS降解液中M和G的峰面积,以葡萄糖醛酸(GlcUA)为内标,以PSS对照品绘制标准曲线计算含量.色谱柱:Zorbax KP-C18(150 mm×4.6mm,5μm),流动相:磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L,pH 7.0)/CH3CN(83/17,体积分数);流速:0.8 mL/min;柱温30℃,检测器:可变波长检测器(VWD),检测波长:245nm.结果 PSS在0.3～15 mg/mL浓度范围内与峰面积比值呈良好的线性关系(R2=0.9966);在低、中、高3个浓度的日内精密度平均RSD为0.78％(n=6),日间精密度平均RSD为3.08％(n=5),重复性RSD为3.24％ (n=5),24 h内稳定性良好,RSD为2.93％,3个浓度平均回收率为115.77％,方法的低检测限为0.25 μg/mL.结论 该方法专属性好,灵敏度高,重复性好,适合PSS的质量控制.
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柱前衍生HPLC测定仲辛醇中的辛酮含量
目的建立一种快速、准确测定仲辛醇产品中微量辛酮的方法,用于仲辛醇的质量控制.方法采用柱前衍生HPLC法测定了仲辛醇中的辛酮含量,用C8柱分离,乙腈/水作流动相,检测波长为480nm.结果实验表明在浓度为6.5～65mg/L的线性范围内,可进行样品的定量分析,低检测限为0.16mg/L.结论该方法应用于仲辛醇中少量的杂质辛酮的测定,结果令人满意.
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检测癫痫大鼠脑组织中 Glu、Gly、GABA 含量的异硫氰酸苯酯柱前衍生 HPLC 技术的建立
目的：建立检测癫痫大鼠脑组织谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）、甘氨酸（Gly）含量的异硫氰酸苯酯（ PITC）柱前衍生高效液相色谱（ HPLC）技术，并验证其检测效果。方法将海人藻酸（ KA）或等量生理盐水注射入大鼠海马CA3区建立癫痫模型或对照，2周后分别取其海马和皮层组织，采用PITC柱前衍生法处理样品，采用醋酸钠缓冲液和乙腈梯度洗脱，Venusil-AA氨基酸分析柱结合紫外检测器检测，计算Glu、GABA、Gly含量。结果在30 min内3种氨基酸完全出峰。在0．20～12．50 mg／L范围内Glu线性关系良好，相关系数为0．9993，日内精密度为1．46％，日间精密度为1．84％，加样回收率为97．12％±2．98％；在0．01～6．25 mg／L范围内Gly线性关系良好，相关系数为0．9984，日内精密度为1．17％，日间精密度为1．62％，加样回收率为96．63％±1．28％；在0．10～6．25 mg／L范围内GABA线性关系良好，相关系数为0．9994，日内精密度为1．00％，日间精密度为1．53％，加样回收率为99．25％±2．98％。模型组海马和皮层中Glu含量均高于对照组相应组织（P均＜0．05）。结论成功建立了检测癫痫大鼠脑组织Glu、Gly、GABA含量的PITC柱前衍生HPLC技术检测效果较好。
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柱前衍生-HPLC法测定黄酒中氨基酸
目的 建立柱前衍生-高效液相色谱法测定黄酒中氨基酸的方法.方法 样品经酸水解后,用邻苯二甲醛和9-芴甲基氯甲酸酯商品衍生剂进行柱前衍生,高效液相色谱-二极管阵列检测器测定.色谱柱ZORBAX Eclipse AAA4.6 mm× 150 mm,5μm氨基酸分析柱,采用梯度洗脱方式,柱温35℃,检测波长:338 nm,进样量20μl.结果 在给定的色谱条件下,18种氨基酸在25 min内获得了较好的分离.在0nmol/ml～1.0 nmol/ml浓度范围内,18种氨基酸峰面积与浓度的线性相关系数为0.9990～0.9997,样品加标回收率在92.9％～103.4％之间,相对标准偏差为0.8％～5.4％.结论 该方法操作简单,结果准确,重复性好,可用于黄酒中氨基酸含量的测定.
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水中草甘膦的柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱荧光法测定
目的 建立快速、准确的水中草甘膦的柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱荧光测定方法.方法 水样经衍生和固相萃取后,在XBridge RP18色谱柱上,以甲醇/水(70+30,V/V)为流动相,流速1.0 ml/min,荧光检测激发波长为265 nm,发射波长为315 nm.结果 草甘膦的加标回收率在86.4％ ～ 93.0％范围,其相对标准偏差均＜5.0％,在0.005 mg/L ～0.5 mg/L范围呈现良好的线性,其回归系数＞0.999,低定量检出限(LOQ)为0.002 mg/L.结论 本方法回收率高,净化效果好,杂质干扰少,可满足水中痕量草甘膦的残留检测要求.
