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三斑海马多糖的单糖组成测定影响因素考察
目的 研究不同因素对三斑海马多糖(HTP)降解的影响,探求适合其单糖组成测定的降解条件.方法 通过设计正交实验,采用三氟乙酸(TFA)对HTP进行降解,结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱进行单糖组成分析,比较各实验的降解情况.结果 HTP中主要含有Man、GlcN、Gal和少量的GalN、Glc、GlcA、Ara、Fuc共8种单糖.在考察条件范围内,温度和时间是影响单糖组成分析的主要因素,酸浓度是次要因素.HTP中各单糖的适降解条件是:氨基糖GlcN和GalN为120℃,6h,4 mol/L TFA;中性糖Man、Glc和Gal为110℃,4h,3 mol/L TFA;糖醛酸GlcA及Ara、Fuc为100℃,2h,3 mol/L TFA.通过对10种单糖标准品的降解也发现氨基糖(GlcN和GalN)较稳定,糖醛酸(GlcA和GalA)稳定性差.结论 HTP中不同结构类型的单糖对降解条件的敏感度不同:糖醛酸易降解释放,但也易被破坏;氨基糖较难降解,但降解后较为稳定;中性糖的降解难易和稳定性介于两者之间.采用同一条件降解不能准确地测定HTP的单糖组成,需要针对不同结构类型单糖的性质采用不同的条件进行降解.