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解决心脏问题的微芯片植入器
当今的医疗器械行业越来越多的转向到无线设备领域,无线监测器的发明有很多方面的益处.比如可以连续的监测病人的状况(如将监测器放在家里).关乎生命安全的重要信号和其他必须的医疗数据能够在第一时间反馈到医生那里,使得医生可以在保证治疗的质量同时兼顾到很多病人.数据的自动记录和反馈可以使发生人为错误的几率降到低.
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通用型基因悬浮芯片检测生物恐怖细菌的方法研究
目的 建立快速、高通量的基因悬浮芯片检测方法,用于生物恐怖病原体的快速筛检.方法 选择保守的细菌16 S rDNA序列,并针对炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis,B.a)、鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis,Y.p)、布鲁菌属(Brucella spp.,Bru)、土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis,F.t)和类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,B.p)等5种生物恐怖细菌设计种(属)特异性探针,经16 S rDNA通用引物341A、519B扩增基因组DNA,用基因悬浮芯片方法进行检测,并对方法的灵敏度、特异度、重复性、检测能力进行验证.结果 经16 S rDNA通用引物扩增,特异性探针杂交检测,能将样本细菌鉴定到属水平,同属菌出现交叉反应;检出限分别为类鼻疽伯克霍尔德菌1.5 pg/μl,布鲁菌属20 ps/μl,炭疽芽孢杆菌7 pg/μl,土拉弗朗西斯菌0.1 pg/μl,鼠疫耶尔森菌1.1 pg/μl;15次重复检测各探针变异系数(CV)为5.18%～17.88%,具有较好的重复性;方法可正确检出模拟白色粉末样本中炭疽芽孢杆菌和鼠疫耶尔森菌.结论 建立了通用型基因悬浮芯片检测体系快速高通量筛查生物恐怖细菌的方法.
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COPD动态miRNA表达谱的构建及生物信息学分析
目的 构建慢性阻塞性肺疾病(COPD)动态大鼠模型不同时期肺组织miRNA表达谱,并对差异表达的miRNAs进行生物信息学分析,以了解COPD发生发展中miRNAs变化规律及可能涉及相关机制.方法 1)将大鼠随机分为对照组、吸烟2、4、6、8周组和15周+气管内滴注猪胰弹性蛋白酶组,每组5只,病理学观察其形态学改变;2)取对照组、吸烟4周和15周+气管内滴注猪胰弹性蛋白酶组大鼠肺组织各2例,用于miRNA表达谱芯片分析;3)实时荧光定量PCR法验证芯片数据;4)运用生物信息学法对miRNA表达谱进行靶基因预测及聚类分析.结果 1)成功建立COPD动态大鼠模型,该鼠肺组织早期以出现炎性细胞浸润为主,晚期出现肺气肿改变的动态病理变化;2)成功建立miRNAs动态表达谱,熏烟4周组共30个miRNAs异常表达,熏烟15周组共37个miRNAs异常表达;3)实时荧光定量PCR法证实miR-146a、miR-21、miR-206和miR-181a变化趋势与芯片一致;4)生物信息学分析显示异常表达的miRNAs可能与COPD发病机制密切相关.结论 1)成功构建动态COPD大鼠模型及miRNA表达谱.2)通过生物信息学分析异常表达的miRNA可能在COPD发病机制中发挥重要作用.
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芯片电泳相对迁移时间DNA长度计算方法鉴定高危型人乳头状瘤病毒基因
目的 建立一种能够消除电泳分析中迁移时间漂移对于DNA片段长度预测精确性影响的芯片电泳相对迁移时间比例方法,并联用多重PCR鉴定高危型人乳头状瘤病毒(HPV).方法 在芯片电泳分析中引入上位和下位内标,依据待测DNA片段相对于上位及下位内标的迁移时间比例进行长度预测,建立芯片电泳相对迁移时间比例的测定方法.考察不同实验条件下芯片电泳DNA分析中相对迁移时间比例的重现性和DNA片段长度预测精确性.选取2007年10月至2008年12月间广州医学院附属广州市第一人民医院妇科就诊的114例患者的富颈上皮细胞样品,经细胞学检查划分为正常组(n=30)、不典型鳞状细胞组(ASCUS组,n=30)、低度鳞状上皮内病变组(LSIL组,n=30)和高度鳞状上皮内病变和(或)鳞状细胞癌组[HSIL和(或)SCC组,n=24].对应活检组织经病理诊断,划分为宫颈高度病变组(n=90)和对照组(n=24).利用多重PCR联合芯片电泳相对迁移时间比例方法检测宫颈上皮细胞样本中5种高危型HPV感染状况.参考组织病理学检测结果评价芯片电泳相对迁移时间比例的方法分析对于宫颈高度病变诊断的临床价值.结果 芯片电泳相对迁移时间比例方法具有良好的重现性和DNA片段长度相关性.使用芯片电泳相对迁移时间比例方法能够满足HPV基因分型多重PCR产物的准确鉴定.各个细胞学分类级别对应的5种高危HPV检出率分别为正常组33.3％、ASCUS组60％、LSIL组76.6％、HSIL和(或)SCC组83.3％.HPV感染率随细胞和组织学病变级别增加有上升趋势,与细胞学(x2=19.319,P＜0.05)和组织学(x2=7.268,P＜0.05)分级具有明显的关联.结论 芯片电泳相对迁移时间比例方法简单可靠,可以实现高危HPV基因型快速判定,具有筛查宫颈高度病变的价值.
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微流控芯片免疫分析方法的研究进展
微流控芯片技术是利用微通道精确控制和处理微尺度流体，从而在微芯片上实现进样、稀释、混合、反应、检测等多种功能，其突出的优点是只需少量标本或生物样品，便可高效快速地完成各种微分析检测，并具有高灵敏度、高通量、低成本和设备微型化的优势[1]。近年来微流控芯片技术发展迅速，在分析领域有着广泛的应用。鉴于微流控芯片具有在微小尺度下同时完成大样本量并行操作等优势，将微流控芯片技术与免疫分析结合，是近些年新发展起来的一项技术，大大改善了传统免疫分析性能。本文将从微流控免疫分析的芯片制作、类型和多元免疫分析等多个方面介绍微流控芯片免疫分析方法的研究进展。
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电子基因微芯片在医学研究中的应用
基因芯片(DNA microchip)也称 DNA 微阵列(DNAmicroarray),是把大量基因探针或基因片段按特定的排列方式固定在芯片载体上,形成致密有序的 DNA 分子点阵,按碱基互补配对原则与样品 DNA 杂交,然后通过计算机进行解读和分析获取大量信息,实现对生物样品高效、平行地检测或医学诊断.由于具有高通量、快捷、便宜等优点,基因芯片在各个领域起着越来越重要的作用.
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微芯片在组织病理学中的应用和肿瘤的"核心血清反应基因"表达模式
中国病理主任联会(ADPC)第五届会议于2004年7月3～8日在广州和香港两地举行.会议邀请的大会报告之一,美国斯坦福大学医学中心病理学系M van de Rijn教授介绍微芯片技术在组织病理学中的应用,特别是在乳腺癌研究方面的一些新进展.
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南通地区健康体检人群小而密低密度脂蛋白水平调查
目的 初步调查南通地区健康人群小而密LDL(胆固醇和蛋白质)的分布情况.方法 体格检查和实验窜检查均无异常的健康人群254名(男137名,女117名),按年龄分成20～29岁(65名)、30～39岁(65名)、40～49岁(46名)、50～69岁(35名)、和370岁(43名)5组.检测采用全自动生化分析仪和芯片电泳技术.结果 小而密LDL胆固醇和蛋白质水平均值为(0.39±0.14)mmol/L和(241±158)mg/L,小而密LDL胆固醇与总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇相关性较好(r=0.67、0.35、-0.42和0.46,P均<0.01),小而密LDL蛋白质与这些血脂指标相关性较好(r=O.54、0.24、-0.32和0.52,P均<0.01).小而密LDL蛋白质和胆固醇水平随年龄增高呈上升趋势,而70岁以上人群呈下降趋势;男性小而密低密度脂蛋白水平高于女性[(0.40±0.11)mmol/L vs.(O.37±0.17)mmol/L,P<0.01;(253±59)mg/L vs.(237±95)mg/L,P<0.05],P
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宫内诊断的无创化与分子化
对特定孕妇开展宫内诊断可以有效降低新生儿的出生缺陷率.常规的非侵入性、侵入性宫内诊断方法如影像学检查,绒毛取样、羊膜腔穿刺、脐带血穿刺获取胎儿组织、细胞行染色体检查、FISH检测等手段存在各自的局限性.微芯片技术、孕妇外周血浆游离DNA检测技术、新一代高通量测序技术的迅速发展,可以在一定程度上与传统手段形成有效互补,使得宫内诊断的发展呈现出无创化与分子化的趋势.
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利用激光显微切割与microarray技术对恒河猴脑中白质与灰质基因表达的差异性的研究
目的:利用激光显微切割技术和microarray技术比较恒河猴脑组织中前额叶皮质(prefontal cortex,PFC)与小脑皮质(cerebellar cortex,CBC)的灰质与白质基因表达的差异.方法:利用激光显微切割技术(laser capture dissection,LCM)与microarray技术的有效结合,提取恒河猴PFC与CBC的白质与灰质,分别提取RNA,合成cDNA文库.后利用GeneChip 1.0 ST芯片技术,分析得出大脑与小脑中灰质与白质的表达差异性.结果:无论是灰质还是白质,在PFC中的高表达基因都要远远多于在CBC中的高表达基因.结论:使用LCM可以提取单一的细胞群,从而用于要求更为精确的实验当中.
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亲环素在非小细胞肺癌中的高表达及其与临床病理特征的关系
目的:观察亲环素A(CyPA)在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中的分布和表达,探讨其在NSCLC发生发展中的临床意义.方法:应用组织芯片免疫组织化学技术,检测45例NSCLC手术患者切除的肺癌组织,22例相应的癌旁组织,33例相应的正常肺组织中CyPA的蛋白表达水平,分析其与NSCLC分期、病理等临床特征的关系.结果:CyPA在NSCLC癌组织和癌旁组织中表现为高表达水平,与相应的肺正常组织中CyPA的表达有显著性差异(P＜0.05);CyPA的表达水平与NSCLC患者的细胞分化程度、病理分型均无明显关系.结论:CyPA在NSCLC中的高表达,提示其可能是NSCLC的发生发展中的生物特征之一,其作用及机制有待进一步研究.
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microRNA在人皮肤黑素瘤与色素痣中共同差异表达的研究
目的 筛选人皮肤黑素瘤组织中表达的已知has-microRNA.方法 采用SBC microRNA芯片技术,将6例人皮肤黑素瘤组织总RNA分别与9例健康人色素痣总RNA混合物对比,筛选已知的468条has-microRNA表达情况.用qPCR分别检测这6例人皮肤黑素瘤组织中各候选has-microRNA的表达.将芯片和qPCR两种方法 检测结果一致的候选has-microRNA确定为有意义的共同差异表达has-microRNA.结果 2倍以上差异表达miRNA占所检测miRNA的12.18%～86.33%,5倍以上差异表达miRNA占1.28%～19.02%,10倍以上差异表达miRNA占0.43%～5.34%.此6例人皮肤黑素瘤中miRNA-21明显上调表达,miRNA-320和miRNA-494明显下调表达.结论 人皮肤黑素瘤组织中miRNA-21明显上调表达,miRNA-320和miRNA-494明显下调表达.
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对生物芯片技术的认识-2000国际生物芯片技术大会简介
前不久刚刚在北京落下帷幕的"2000国际生物芯片技术大会"上,清华大学教授程京博士预言,5年后生物芯片将走进人们的生活,为人们的健康和长寿造福;美国俄亥俄州立大学的科学家罗伯特·米勒博士在会议上说:"我们已准备用机器人把我们设计的一种芯片植入到实验动物体内."米勒预计未来五年内生物芯片就会在人类体内开始临床试验.近米勒博士成功地使用机器人给60个病人进行了动脉移植手术,米勒还预期未来使用相同的技术可以精确地将微芯片放置到器官或血管当中,然后微芯片释放药物或刺激干细胞进行自我修复.
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生物芯片及其在实验诊断中的应用
被誉为21世纪生命科学的支撑平台的生物芯片(Biochip)、又被称之为DNA芯片(DNA Chip),又称做寡核苷酸微芯片(Oligonucleofide Microchip)或基因芯片(Genechip)或DNA阵列(DNA Array),将给本世纪生命科学和医学研究带来一场革命.生物芯片的发明并应用,好像杂交瘤技术(单克隆抗体)、多聚酶链反应(PCR)技术一样,将使检验医学的发展出现新的里程碑.
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小而密低密度脂蛋白的检测方法
低密度脂蛋白(LDL)颗粒在大小、密度和脂质组成上具有异质性.小而密低密度脂蛋白(sdLDL)是LDL中可致动脉粥样硬化的一类亚型,与冠心病的形成密切相关.近年来,sdLDL与冠心病的关系愈来愈受到人们的关注,但亟待解决的问题是缺乏简易分析LDL亚组分的方法.现对目前检测sdLDL的各种方法 进行综述,介绍近建立的简单、快速、高效的芯片电泳分离血清脂蛋白的方法 .这种方法可望成为分离检测sdLDL的常规分析手段,为冠心病的诊断提供有力帮助.
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微芯片、微阵列芯片、生物芯片和纳米芯片-21世纪的个人实验室
引言分析测试的微型化对于21世纪诊断技术的各个方面都将会产生深远的影响.高度复杂的临床测试装备的小型化,使得目前只能在中心实验室测试的项目,在没有实验室的地方也能测定.这种新型的个人实验室使得那些相对没有专业技术的操作者也能进行高度复杂的临床测试.决定这种测试应用的因素有许多,包括规范临床测试的各类法规、成本-收益因素以及公众对自我测试的兴趣等.
