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我国不同人群单纯疱疹病毒2型感染率及危险因素Meta分析
目的 了解我国不同人群单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染率水平及其危险因素.方法 采用Statal2.0对我国不同人群HSV-2感染率及相关危险因素数据进行meta分析、应用SPSS22.0进行亚组间统计学检验.结果 普通人群HSV-2感染率为16.22％ (95％ CI:12.87％ ～ 19.91％),女性高于男性,分别为16.89％(95％ CI:12.91％～21.32％)和11.69％ (95％ CI:9.07％ ～ 14.56％).不同人群既往感染率各不相同,以女性性工作者(FSW) 44.77％ (95％ CI:38.47％ ～ 46.36％)较高.多数高危人群感染率高于普通人群.随着时间推移,普通人群既往和近期感染率呈下降趋势,高危人群既往HSV-2感染率先升后降.影响因素分析提示性别、梅毒感染、HIV阳性等是感染HSV-2的危险因素.结论 我国不同人群HSV-2感染率较高,以女性、高危人群和疑与HSV-2感染相关疾病患者更为突出.建议将HIV干预和包括HSV-2在内的性病相结合、加强HSV-2监测、加强育龄妇女及孕妇HSV-2检测控制HSV-2传播.
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上海市艾滋病自愿咨询检测门诊男男性行为者HIV与梅毒、单纯疱疹病毒2型共感染状况调查
目的 了解上海市艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊就诊MSM人群HIV与梅毒、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)共感染情况及其可能影响因素.方法 采用横断面研究设计,用方便抽样法选取上海市与普陀区的2个VCT门诊,于2015年3-8月招募≥18岁、近1年发生过同性插入性性行为的MSM作为调查对象,招募756名MSM,使用x2检验和logistic回归法分析.结果 共调查732名MSM,调查对象HIV与梅毒共感染率为3.3％(24/732),HIV与HSV-2共感染率为1.9％(14/732),HIV与梅毒、HSV-2共感染率为0.7％(5/732).梅毒感染者的HIV感染率45.3％(24/53)显著高于非梅毒感染者7.2％(61/679) (x2=63.11,P＜0.001);HSV-2感染者的HIV感染率34.1％(14/41)显著高于非HSV-2感染者10.3％(71/691)(x2=21.49,P＜0.001).多因素logistic回归分析显示,调查对象HIV与梅毒共感染的可能危险因素包括外地户籍(OR=3.50,95％CI:1.01～12.17)、初中及以下文化程度(OR=4.46,95％CI:1.54～ 12.87)和曾使用毒品(OR=4.25,95％CI:1.67 ～ 10.82);HIV与HSV-2共感染的可能危险因素:高中及以下文化程度(OR=6.87,95％CI:1.86 ～ 25.42;OR=9.82,95％CI:2.25～42.85).结论 上海市VCT门诊就诊的MSM中存在一定比例的HIV和梅毒、HIV和HSV-2共感染情况.应关注外来务工人员、文化程度低者和使用毒品者.
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联合靶向小干扰RNA对疱疹病毒2感染的体外抑制作用
目的 探讨联合靶向特异性小干扰RNA(siRNA)对疱疹病毒(HSV)2的体外特异抑制作用.方法 将体外合成的靶向HSV-2编码包膜糖蛋白gB的UL27.2基因、靶向DNA结合蛋白UL29.2基因的siRNA和该两种联合靶向特异性siRNA制剂,共转染Vero细胞并感染HSV-2,观察靶基因的表达情况、Vero细胞病变、空斑减数实验和子代病毒滴度并进行各组间比较:结果特异性UL27.2siRNA、UL29.2 siRNA和联合siRNA转染Vero细胞后,均能不同程度抑制各HSV-2临床株感染所导致的细胞病变,对病毒增殖抑制率分别为63.9%、86.7%和93.3%.实时定量PCR检测各组siRNA分别对UL27.2和UL29.2两个基因的表达,结果显示UL27.2 siRNA和UL29.2 siRNA对各自的靶向基因均有抑制,而联合靶向siRNA制剂对两个基因的抑制率高.结论 联合靶向特异性siRNA制剂能有效抑制HSV-2的感染和复制.
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实时PCR检测HSV-2的方法学建立
目的建立一种快速、特异、准确定量的单纯疱疹病毒2型(HSV-2)检测方法.方法构建重组质粒pMD18-T-gG作为标准品.以HSV-2的gC基因区为靶基因区,设计合成引物和探针,采用TaqMan MGB技术对HSV-2进行实时定量PGR检测,优化反应体系,并进行方法学评价.结果成功构建重组质粒pMD18-T-gG.建立利用TaqMan MGB技术的real-time PGR方法,其重复性较好[批内CV(变异系数)值为2.29%,批间CV值为4.76%]、特异性较好(对HSV-1、Veto细胞、巨细胞病毒、弓形虫等无特异性扩增)、线性范围好(4.75×101～4.75×106 copies/μl,r=0.998),灵敏度达到47.5 copies/μl;与ELISA法进行比较,认为前者的灵敏度更高、检测时间更短.结论建立的TaqMan MGB PGR方法能够快速准确、特异、灵敏地对HSV-2进行定量分析,可为临床诊断提供帮助.
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α27基因特异性siRNA对2型单纯疱疹病毒复制的影响
目的：探讨在RNA干扰技术条件上，干扰α27基因的表达对单纯疱疹病毒（ HSV）-2复制的影响。方法体外合成针对α27基因的四对siRNA（ R1、R2、R3和R4组）和阳性、阴性对照siRNA，用Lipofectamine2000转染vero细胞后接种HSV-2，感染后分别于12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h测定上清液病毒滴度。结果α27基因特异性siR-NA转染组在病毒复制早期（12～24 h）即出现明显的病毒滴度降低，病毒复制晚期，其病毒滴度仅稍微降低；其中，R2和R4组在病毒复制早期到晚期病毒滴度均较其它组低。结论α27基因特异性siRNA能够抑制HSV-2的复制，降低子代病毒滴度。按照同样设计原则合成的不同序列siRNA，其抑制效果存在明显差异。
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原发性高血压与单纯疱疹病毒2型感染有关
目的:探讨单纯疱疹病毒2型感染与原发性高血压的关系方法在有1244名住院病人(年龄在35至64岁)参与的对照研究中,488例原发性高血压病人,756例对照,用ELISA方法检测血中特异性单纯疱疹病毒2型IgG抗体,进行两组间比较.本研究分析高血压的危险因素有:年龄,男性,吸烟,糖尿病,血脂紊乱,较少体力劳动,体重指数和单纯疱疹病毒2型IgG抗体阳性.在多因素分析中,应用Logistic回归分析以去除其它危险因素的影响,并计算调整后的比值比(OR值)和95%的可信区间,以表示单纯疱疹病毒2型感染和高血压的关系,及对高血压的危险性.结果单纯疱疹病毒2型IgG抗体阳性率,高血压组病人明显多于对照组(38.3%vs.29.8%,P=0.002).Logistic回归分析去除其它危险因素的干预,发现单纯疱疹病毒2型IgG抗体阳性与高血压强相关,调整后的OR值为1.413(95.0%CI,1.108 to 1.802;P=0.005),调整变量包括血脂异常、糖尿病、冠心病、男性和吸烟.在单纯疱疹病毒2型IgG抗体阳性病人中,血脂紊乱的病人显著增多(P＜0.05).结论单纯疱疹病毒2型感染可能是原发性高血压的独立危险因素.
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基层性病实验室开展单纯疱疹病毒2型血清学抗体检测能力的评估方法探讨
目的 根据中国艾滋病综合研究项目(CIPRA)的要求,探讨基层实验室开展新的检测项目的能力评估方法.方法 通过发放盲样样本和现场考核,来综合评估两个基层实验室(实验室Ⅰ、Ⅱ)开展用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HSV-2抗体的能力.结果 实验室Ⅰ建立了较完善的实验室管理体系,能够按照标准操作程序(SOP)要求开展,盲样样本及现场样本考核结果的符合率为100%,达到了开展此项检测的能力.实验室Ⅱ在现场考核时实验操作不规范,未能完全按照SOP的要求操作,盲样样本及现场样本考核结果的符合率分别为93.33%和73.33%.通过再次培训及完善实验室质量管理体系,终考核达到了开展此项检测的能力.结论 该研究所采用的能力评估方法比较科学、有效,可为实验室开展新的检测项目进行能力评估时提供参考.
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HIV感染者合并HSV-2感染情况分析
目的 分析艾滋病病毒(HIV)感染者合并单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染的情况,为采取综合性防治方案提供参考依据.方法 将2008年1月至2010年9月,首次就诊于广州市第八人民医院,生殖器部位有疱疹样病变的患者的HSV 2 DNA结果进行对比分析.结果 共有117例,其中53例为HIV感染者,64例为非HIV感染者.HIV感染者合并HSV-2的检出率为67.92％ (36/53),高于非HIV感染者的HSV-2检出率40.63％(26/64).比较HIV/HSV-2联合感染与单纯HIV感染者的CD+细胞数、CD4/CD8比值,两组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 应加强对HIV感染者HSV-2的筛查和治疗,减少通过单纯疱疹皮损所致的HIV传播.
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广东省惠州市男性出租车司机单纯疱疹病毒-2血清流行病学研究
目的 调查广东省惠州市男性出租车司机单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染流行状况及其危险因素.方法 178名被调查者在知情同意下接受问卷调查并抽取血清样本.HSV-2血清IgG抗体采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测.结果 男性出租车司机HSV-2抗体阳性率为40.5%(95%CI,34.6%～46.4%).将相关的影响因子纳入回归方程.进行逐步法Logistic回归分析.终所有的因子都被剔除方程.说明这些因子均不是HSV-2感染的独立影响因子.结论 流行病学调查结果显示男性出租车司机HSV-2感染率高,未发现其独立影响因子,有必要扩大样本,以获得更加可靠的人群HSV-2感染状况的流行病学资料.
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单纯疱疹病毒2型ICP4基因荧光实时定量PCR检测方法的建立
目的 建立实时荧光PCR定量检测单纯疱疹病毒2型(HSV2)ICP4基因的方法.方法 依据HSV2 ICP4基因序列设计引物.PCR纯化后克隆到pMD-18T载体上进行测序,抽提重组质粒作为标准品.根据测序结果设计荧光定PCR的引物和探针,质粒标准品10倍稀释后进行扩增,建立标准曲线,并进行灵敏度和可靠性分析.结果 测序结果显示在扩增的PCR片段中有在A-G无和T-C的无义突变.标准品101以下没有检测信号,101具有明确的检测信号,因而检测的灵敏度为10.可靠性测定结果:107-101进行10次重复Ct值的平均值分别为14.275±0.137、17.988±0.162、22.081±0.259、25.957±0.345、29.565±0.203、33.269±0.287、37.737±0.698,变异系数分别为0.965%、0.902%、1.174%、1.329%、0.686%、0.862%、1.851%.Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系.回归系数为0.998.结论 成功建立了HSV2 ICP4基因实时定量荧光PCR检测的方法,灵敏度高,重复性好,可用于HSV2 ICP4基因的定量分析.
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东莞市男性高危人群单纯疱疹病毒2型血清流行病学研究
目的：了解广东省东莞市男性高危人群单纯疱疹病毒2型感染流行状况及其危险影响因素。方法对278例研究对象在知情同意下接受问卷调查并抽取血清样本,对其单纯疱疹病毒2型血清免疫球蛋白G(IgG)抗体采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测。结果男性高危人群总的血清单纯疱疹病毒2型抗体阳性率37.4%(95%CI,29.4,45.4)。结论流行病学调查结果显示男性高危人群单纯疱疹病毒2型感染率高,未发现其独立影响因子。
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475例单纯疱疹病毒2型基因检测结果分析
目的：了解广州新塘地区疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒2型的感染情况，为临床诊断治疗提供依据。方法采用实时荧光定量RT-PCR方法对我院门诊475例疑似生殖器疱疹患者进行单纯疱疹病毒2型病毒核酸检测。结果（1）在475例疑似生殖器疱疹患者中270例单纯疱疹病毒2型检测阳性，总阳性率为56.84%（270/475），其中男性154例阳性，阳性率为61.16%（154/256）；女性阳性116例，阳性率为52.97%（116/219），男女发病率比较二者差异无统计学意义。（2）四个年龄段即＜20岁，20～40岁，41～60岁，＞60岁，它们的阳性率分别为29.63%（8/27）、70.23%（184/262）、46.94%（69/147）、23.08%（9/39）；20～40岁年龄段发病率70.23%，明显高于其他3个年龄段组，组间差异有统计学意义。结论新塘地区单纯疱疹病毒2型感染率为56.84%，20~40岁病毒核酸检出率高，但感染率无性别差异；实时荧光定量RT-PCR方法在单纯疱疹病毒2型的检测中具有灵敏度高，方便快捷等优点，可对疑似生殖器疱疹患者进行早期正确诊断以避免漏诊及误诊的发生，值得临床应用。
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两种商品化单纯疱疹病毒2型IgG抗体检测试剂盒比较研究
目的 比较国产和进口两种商品化单纯疱疹病毒2型IgG抗体检测试剂盒的灵敏度和特异性.方法 用两种试剂盒同时对比检测了5个人群的血清样本:性病门诊样本386份,孕妇样本339份,正常体检样本482份,12岁以下儿童样本140份,40岁以上中老年人样本398份,共计1745份.结果 两试剂盒对性病门诊人群的阳性符合率为99.03% (102/103),阴性符合率为99.65% (282/283),孕妇人群的阳性符合率为92.86% (26/28),阴性符合率为100% (311/311),正常体检人群的阳性符合率为94.4% (17/18),阴性符合率为100% (464/464),40岁以上中老年人群的阳性符合率为91.7% (22/24),阴性符合率为100% (372/372),12岁以下儿童人群检测均为阴性,符合率为100%.结论 国产试剂盒与进口试剂盒的总体阳性符合率为96.53% (167/173),阴性符合率为99.94% (1571/1572),具有较高的灵敏度和特异性,可以满足临床需求.
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小鼠阴道疱疹感染与Fas蛋白粘膜上皮细胞中的表达
目的探讨HSV-2小鼠阴道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,以及Fas蛋白的表达与细胞凋亡的相关关系,有助于阐明HSV-2感染后病毒与细胞相互作用的分子机理,为HSV-2病毒感染疾病的诊断、治疗提供一定的实验和理论依据.方法将HSV-2接种于小鼠阴道,建立HSV-2阴道粘膜面直接感染动物模型,分不同天数处死,取其阴道固定于10%福尔马林.用HE染色、TUNEL染色研究HSV-2小鼠阴道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,用免疫组化法研究Fas蛋白分子在阴道上皮细胞中的表达水平,分析与细胞凋亡的相关关系.结果小鼠阴道HSV-2感染后的粘膜上皮细胞病理学改变为:22份标本中同时伴有细胞坏死、炎症浸润及凋亡细胞阳性表达,标本中可达粘膜上皮的1/4区域.这些形态改变从实验感染的第1天至第11天均可见到.小鼠阴道感染HSV-2后,Fas蛋白从感染第3天起可见到表达(22/24).凋亡细胞指数与Fas阳性细胞指数呈正相关(r=0.9660,P＜0.05).结论 HSV-2直接感染小鼠阴道后可同时引起炎症、细胞溶解性坏死及诱导阴道上皮细胞凋亡.HSV-2感染小鼠阴道后阴道上皮细胞Fas分子呈高表达,与凋亡细胞指数呈正相关,提示Fas对HSV-2诱导的粘膜细胞凋亡起上调作用;可进一步研究作为阴道粘膜细胞病毒感染的参考指标.
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人乳头状瘤病毒16/18及单纯疱疹病毒2型协同感染与宫颈病变的相关性分析
目的 观察宫颈病变妇女人乳头状瘤病毒16/18 (HPV16/18)、单纯疱疹病毒2型(HSVⅡ)的感染情况,分析和探讨HPV 16/18及HSVⅡ协同感染与宫颈病变的相关性.方法 选择2013年1～12月于海西州人民医院妇科就诊的217例患者,其中正常宫颈20例、宫颈炎55例、宫颈上皮内瘤变(CIN) 117例、宫颈癌25例,采用实时荧光定量PCR法分别检测HPV16/18和HSVⅡ,比较HPV16/18和HSVⅡ的感染情况,并分析HPV16/18及HSVⅡ协同感染与宫颈病变的相关性.结果 宫颈癌组HPV16/18和HSVⅡ感染阳性检出率显著高于正常宫颈组、宫颈炎组及CIN组,而CIN组HPV16/18和HSVⅡ感染阳性检出率显著高于正常宫颈组及宫颈炎组,差异均有统计学意义(P＜0.05);各宫颈病变患者主要为HPV16/18感染,且病情越严重,HPV16/18及HSVⅡ感染阳性检出率越高.与单一的HPV16/18、HSVⅡ感染相比,除宫颈炎患者外,CIN和宫颈癌患者均出现HPV16/18和HSVⅡ混合感染,但混合感染的发生率显著低于单一的HPV16/18、HSVⅡ感染,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HPV16/18、HSVⅡ协同感染可增加宫颈癌的患病率,与宫颈癌的发生及发展有密切的关系,对高风险人群进行筛查可提高宫颈癌的早期诊断率及治疗率.
关键词： 人乳头状瘤病毒16/18 单纯疱疹病毒2型 协同感染 宫颈病变 -
IL-12、IL-18对单纯疱疹病毒2型DNA疫苗的免疫增强效果
目的 分析白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-18(IL-18)对单纯疱疹病毒2型(HSV-2)DNA疫苗的免疫增强效果.方法 选取60只雌性BALB/c小鼠,按照随机数字表法分为观察组、对照组,各30只,分别运用IL-12、IL-18基因联合HSV-2 DNA疫苗或单独应用HSV-2 DNA疫苗免疫,末次免疫3周后,使用致死剂量攻毒试验炎症疫苗的保护作用,并检测两组小鼠脾脏T细胞增殖能力、抗HSV-2 IgG抗体水平、调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)、CD4+和CD8+T淋巴细胞百分比、分泌干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的T细胞百分比等指标,分析IL-12、IL-18对HSV-2 DNA疫苗的免疫增强效果.结果 观察组ConA、灭活单纯疱疹病毒的SI、抗HSV-2 IgG抗体水平、RANTES含量、抗CD4+和CD8+T淋巴细胞百分比、分泌IFN-γ的T淋巴细胞百分比均高于对照组,其分泌IL-4的T淋巴细胞百分比低于后者,差异有统计学意义(P＜0.05).HSV-2病毒攻毒实验2周后,观察组存活9只,保护率为90.00％,对照组存活4只,保护率为40.00％,两组保护率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-12、IL-18基因能够明显增强HSV-2 DNA诱导小鼠产生特异性抗HSV-2的体液免疫、细胞免疫功能,是理想的免疫佐剂,值得进一步研究.
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巢式PCR方法检测长春地区单纯疱疹病毒感染状况
目的:探讨巢式PCR方法检测单纯疱疹病毒(HSV)的临床应用价值,同时对HSV-1、HSV-2在生殖器疱疹(GH)、梅毒(syphilis)、念珠菌病(candidiasis)、非淋菌性尿道炎(NGU)、淋病(gonorrhea)、尖锐湿疣(CA)6种性病患者(STD)及其性伴和健康人群中的感染情况及分布特点进行对比研究.方法:应用HSV-1糖蛋白D(gpD)基因序列和HSV-2糖蛋白G(gpG)基因序列为靶基因,设计了普通PCR和巢氏PCR方法,检测6种STD患者及其性伴和健康人群中HSV的感染情况.结果:6种STD患者共1223人,HSV-1阳性率15.70%(192/1223),HSV-2阳性率28.29%(346/1223),HSV总阳性率43.41%(538/1223);检测性伴153例,HSV-1阳性率12.42%(19/153),HSV-2阳性率21.57%(33/153) ,HSV总阳性率34.0%(52/153);检测健康人群263例,HSV-1阳性率3.42%(9/263),HSV-2阳性率6.08%(16/263),HSV总阳性率9.51%(25/263).结论 :STD患者中HSV-2感染率高于HSV-1感染率;STD患者及其性伴中HSV-1、HSV-2感染率均高于健康人群.
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单纯疱疹病毒2型疫苗的研究进展
单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)属于疱疹病毒属α疱疹病毒科,是线性双链DNA病毒,主要通过性传播,是生殖器疱疹的主要病原体,HSV-2的感染还可增加HIV感染的风险.使用安全套和抗病毒治疗等措施虽可使HSV-2的传染降低约50％,但未能从根本上杜绝该病毒的传播.目前,对抗HSV-2为有效和经济的方法是接种HSV-2疫苗,但尚未获得理想的该疫苗产品.本文结合HSV-2的感染机制,对HSV-2的灭活疫苗、减毒活疫苗、复制缺陷疫苗、亚单位疫苗、多肽疫苗、活载体疫苗及DNA疫苗的新研究进展作一综述,并对HSV-2预防性及治疗性疫苗的研究方向进行讨论.
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人乳头状瘤病毒、单纯疱疹病毒2型和巨细胞病毒感染与宫颈癌的相关性研究进展
宫颈癌是常见的女性生殖道恶性肿瘤,人乳头状瘤病毒感染(HPV)是宫颈癌的主要致癌因素,此外其他病毒感染如单纯疱疹病毒2型( HSV-2)人类巨细胞病毒(HCMV)也引起了人们的重视.作者对HPV HSV-2 HCMV的感染途径,感染的人群,致癌机制与宫颈癌之间的相关性研究进展作一综述.
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单纯疱疹病毒2型泛素化新型DNA疫苗构建
目的 构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)早期表达蛋白感染细胞蛋白(ICP)27强制泛素化的DNA疫苗表达质粒.方法 利用聚合酶链反应(PCR)技术从人基因组DNA和HSV-2基因组中分别扩增出泛素全长基因和HSV-2、ICP27 377-459,PCR鉴定后酶切连接获得融合基因片段,插入真核表达质粒pcDNA3.1载体中,构建出重组真核表达质粒Ub-ICP-pcDNA3.1,并对其进行测序鉴定.结果 构建的重组质粒Ub-ICP-pcDNA3.1克隆基因插入方向正确,与预期序列完全一致.结论 成功构建了HSV-2早期表达蛋白ICP27强制泛素化DNA疫苗.
