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小鼠骨髓间充质干细胞体外成肌分化中基质金属蛋白酶1的作用
背景:小鼠骨髓间充质干细胞体外成肌诱导分化效率较低.目的:观察基质金属蛋白酶1在体外对小鼠骨髓间充质干细胞成肌分化的作用.方法:利用差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞并进行鉴定后,按照不同基质金属蛋白酶1药物处理浓度将小鼠骨髓间充质干细胞分成4组,即10 μg/L组、1 μg/L组、0.1 μg/L组、对照组,给予相应处理后,Real-time定量PCR检测MyoD、Desmin mRNA表达,Western Blotting检测Desmin蛋白表达.结果与结论:利用差速贴壁法分离培养的小鼠骨髓间充质干细胞形态较一致,表面分子检测示CD29+、Sca-1+、CD45-、CD34-,并具有多向分化潜能;经基质金属蛋白酶1处理后,Real-time定量PCR检测示Desmin、MyoD mRNA表达上调,Western Blotting检测示Desmin蛋白表达上调,并且以上各成肌相关基因、蛋白表达增高程度与基质金属蛋白酶1具有浓度依赖性.提示基质金属蛋白酶1在体外可促进骨髓间充质干细胞向肌肉细胞分化.
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椎间盘退变患者血清及髓核组织中基质金属蛋白酶1及抑制剂1的表达
背景：基质金属蛋白酶现被公认为能降解所有的细胞外基质，基质金属蛋白酶分泌过多或金属蛋白酶抑制剂的分泌减少能破坏细胞外基质的动态平衡。目的：试图阐明基质金属蛋白酶1和金属蛋白酶抑制剂1在椎间盘退变的发病机制。方法：选择60例椎间盘退变患者，根据磁共振(MRI)检查结果分为椎间盘有轻度的退变信号、椎间盘中度抑制信号及椎间盘严重的退变信号3个亚组；对照组20例椎体骨折(颈椎为主)但椎间盘正常的患者。在术前收集静脉血液样品，随后收集病变的椎间盘组织。结果与结论：①椎间盘退变组患者血清和组织中的基质金属蛋白酶1水平显著高于对照组(P <0.05)；②在所有亚组之间的进一步比较发现，重度椎间盘退变患者相比轻度或中度患者有较高的基质金属蛋白酶1表达水平(P <0.05)；③然而金属蛋白酶抑制剂1的表达水平在椎间盘退变组和对照组之间的组织或者血清中没有显著差异(P >0.05)。金属基质蛋白酶1的表达在椎间盘退变患者中得到增强，金属蛋白酶抑制剂1的表达与椎间盘退行性变无关。
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关节腔内注射透明质酸钠可以延缓创伤性骨关节炎的软骨退变
背景：透明质酸钠是一种治疗骨关节炎的有效手段，但其机制尚不清楚。有研究表明基质金属蛋白酶1，3，9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2表达失调对骨关节炎有重要影响。目的：观察关节腔内注射透明质酸钠对兔创伤性骨关节炎模型软骨中基质金属蛋白酶1，3，9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2表达的影响。方法：采用单侧前交叉韧带切断法构建创伤性骨关节炎模型兔，造模后4周关节腔注射体积分数1%透明质酸钠0.3 mL，每周1次，连续5周，设为透明质酸钠组，同时设模型组和正常对照组作对比。术后11周麻醉处死动物，获取软骨并提取总RNA，用实时聚合酶链反应分析各组软骨内基质金属蛋白酶1，3，9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2 mRNA表达。结果与结论：与模型组相比，透明质酸钠组经关节腔内注射透明质酸钠软骨损伤范围和程度均减轻(P <0.01)，软骨组织学评分明显降低(P <0.05)。模型组软骨内基质金属蛋白酶1，3，9 mRNA表达增强，基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2 mRNA表达下调，而透明质酸钠组软骨中基质金属蛋白酶1，3，9，基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2 mRNA的表达并无显著变化。结果说明，基质金属蛋白酶1，3，9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2参与了创伤性骨关节炎软骨退变过程，虽然关节腔内注射透明质酸钠可以延缓创伤性骨关节炎软骨退变，但透明质酸钠并不是通过调节上述因子的表达来发挥修复作用的，具体机制有待进一步研究证实。
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重组人表皮生长因子对大鼠角膜碱烧伤后基质金属蛋白酶的影响
背景:研究表明,基质金属蛋白酶1与组织金属蛋白酶抑制剂1在碱烧伤后角膜缺损溃疡的发生发展转归中扮演着重要的角色.目的:观察重组人表皮生长因子对碱烧伤后角膜的促恢复作用,并探讨重组人表皮生长因子对角膜碱烧伤后基质金属蛋白酶及其抑制剂在大鼠角膜中的表达影响及意义.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/2009-05在辽宁医学院实验动物中心完成.材料:健康SD大鼠60只,体质量180～210 g,鼠龄6～8周,雌雄各半,实验前用裂隙灯显微镜检查证实无眼前段病变.方法:将60只大鼠随机分为实验组和对照组,每组30只.建立大鼠角膜碱烧伤模型,实验组大鼠角膜给予重组人表皮生长因子滴眼液滴眼,对照组给予生理盐水滴眼液滴眼,4次/d,连续用药21 d.于碱烧伤后1,4,7,14,21 d每组分别随机处死6只大鼠,取角膜组织.主要观察指标:①裂隙灯显微镜观察烧伤后两组大鼠角膜变化.②在碱烧伤后不同时期用免疫组织化学染色方法和计算机图像分析系统检测基质金属蛋白酶1及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达.结果:裂隙灯显微镜观察,烧伤后第14天实验组角膜溃疡面积与同期对照组相比明显减少.对照组角膜中基质金属蛋白酶1于伤后第1天开始升高,14 d达到高,此后呈现下降趋势.而组织金属蛋白酶抑制剂1早期有所表达,而后活性逐渐下降,伤后第14天降至低水平,此后又再度上升,21 d时达到高.实验组各时间点基质金属蛋白酶1表达低于对照组,而组织金属蛋白酶抑制剂1表达高于对照组.结论:重组人表皮生长因子可通过调节基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达平衡,从而能有效促进角膜上皮缺损的修复.
关键词： 角膜 碱烧伤 基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶抑制剂1 表皮生长因子 -
独活寄生汤对兔膝骨性关节炎关节液肿瘤坏死因子-α、白介素-6和基质金属蛋白酶-1水平的影响
目的 通过观察独活寄生汤对兔膝骨性关节炎模型关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6和基质金属蛋白酶(MMP)-1水平的影响,探讨其治疗骨性关节炎的作用机制.方法 将30只新西兰大耳兔随机分成3组,即正常组、模型组和独活寄生汤组,采用制动法复制膝骨性关节炎模型.独活寄生汤组兔予独活寄生汤灌胃,其余两组予生理盐水灌胃,连续治疗6w后,测定各组兔膝关节液TNF-α、IL-6和MMP-1表达水平.结果 治疗6w后,独活寄生汤组与模型组比较,关节液中TNF-α、IL-6和MMP-1水平明显降低(P＜0.01).结论 独活寄生汤能抑制1L-6、TNF-α、MMP-1的释放,从而延缓关节软骨的退变.
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氟伐他汀对心衰患者基质金属蛋白酶的影响
在充血性心力衰竭(CHF)的进展过程中,左心室重塑、扩张,泵功能失调是影响患者病情及预后的主要因素.研究表明,心肌中的基质金属蛋白酶(MMPs)可特异地降解细胞外基质,影响心室重塑[1].MMP-1、MMP-9是MMPs家族的重要成员,在心室重构中起着重要的作用.近年来基础及动物实验证实,他汀类药物可抑制动脉粥样硬化斑块MMPs表达,起到稳定斑块的作用[2],然而尚无将他汀类药物特定用于CHF患者的前瞻性研究[3].本研究观察氟伐他汀对CHF患者血清MMP-1、MMP-9的影响,探讨他汀类调脂药物对左室重构及心功能的影响及其可能机制.
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非小细胞肺癌组织中核因子-κB-p65mRNA及基质金属蛋白酶-1的表达及其与肿瘤转移的相关性
目的 探讨核因子-κB-p65 (Nuclear factor-κB-p65,NF-κB-p65)与基质金属蛋白酶-1(Matrix metalloproteases-1,MMP-1)在非小细胞肺癌(Non-small cell lungcancer,NSCLC)组织中的表达及其与肿瘤浸润、转移、凋亡的相关性.方法 收集50例手术切除的NSCLC组织及15例癌旁正常组织标本,RT-PCR法检测NSCLC及癌旁正常组织中NF-κB-p65 mRNA的表达,免疫组化法检测MMP-1蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡指数.结果 NSCLC组织中NF-κB-p65 mRNA的表达量显著高于癌旁正常组织(P＜0.05)；在腺癌组织中的表达量显著高于鳞癌组织(P＜0.05)；NSCLC组织中MMP-1蛋白阳性率显著高于癌旁正常组织(P＜0.01)；NF-κB-p65 mRNA和MMP-1蛋白的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移、病理类型有关(P＜0.05或＜0.01),与年龄、性别无关(P＞0.05)；直线相关分析发现,NSCLC组织中NF-κB-p65 mRNA与MMP-1蛋白的表达相关；NSCLC组织中的细胞凋亡指数显著低于癌旁正常组织,且与NF-κB-p65 mRNA的表达量呈负相关(r=-0.547,P＜0.001).结论 NSCLC组织中NF-κB-p65 mRNA与MMP-1蛋白的表达具有相关性,NF-κB-p65 mRNA的表达与细胞凋亡指数呈负相关,NF-κB-p65通过一定的途径调控MMP-1蛋白的表达,NF-κB与MMP-1共同参与了肿瘤发生、发展的过程,NF-κB -p65发挥抗凋亡作用.
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表皮生长因子受体通过MAPK/ERK信号通路调节基质金属蛋白酶1表达的研究
目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)在宫颈癌SiHa细胞中对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的调节作用,明确其相关的信号传导机制.方法 利用表皮生长因子(EGF)作为干预因素,信号通路阻断剂分别阻断EGFR、AKT、ERK、P38和JNK的磷酸化,观察EGFR对MMP-1表达的影响及其下游信号通路的变化.结果 EGF在mRNA和蛋白水平上诱导MMP-1的表达增加(P均＜0.05);MAPK和ERK激酶抑制剂在mRNA和蛋白水平上可阻断这种诱导(P均＜0.05).结论 EGFR通过MAPK/ERK信号通路上调MMP-1的表达.
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食管鳞状细胞癌中MMP -1和VEGF-C的表达研究
目的:探讨食管鳞状细胞癌中基质金属蛋白酶l(MMP -1)和血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及临床意义.方法:收集医院2008 - 12 ～2011 -04收治的44例食管鳞状细胞癌患者,采用免疫组织化学SP法检测MMP -1和VEGF-C,并与同期45例正常食管组织中MMP -l和VEGF-C的表达情况进行对比分析.结果:食管鳞状细胞癌组MMP -1和VEGF-C表达阳性率分别为65.9％和75.0％,正常食管组织的MMP -1和VEGF-C表达阳性率分别为11.1％和15.6％,两组间比较均有显著性差异(均P ＜0.05).结论:MMP -l和VEGF-C的表达的表达在食管鳞状细胞癌的发生发展过程中发挥着重要作用,有助于食管鳞状细胞癌的临床诊断,值得临床关注.
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熊果酸对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型CAP表达的影响
目的:观察熊果酸对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗、摄取及细胞分化的影响,并探讨其作用机制.方法:将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,用高糖、高胰岛素联合诱导胰岛素抵抗模型.使用葡萄糖氧化酶法检测3T3-L1细胞葡萄糖消耗量,氚标葡萄糖法检测其葡萄糖摄取量,以评价模型建立情况.用四唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测不同浓度熊果酸对3T3-L1脂肪细胞活力的影响以确定实验药物浓度.加入不同浓度熊果酸分组干预,用氚标葡萄糖法检测脂肪细胞葡萄糖摄取量；用油红O染色法检测3T3-L1脂肪细胞分化情况；用实时荧光定量聚合酶链反应法、蛋白质印迹法分别观察熊果酸对3T3-L1细胞胰岛素抵抗模型细胞分化相关蛋白脂肪细胞脂类结合蛋白、基质金属蛋白酶1和原癌基因Cb1相关蛋白(c-Cbl-associated protein,CAP)表达的影响.结果:在成功建立胰岛素抵抗模型的基础上,使用MTT法检测细胞活力,确定熊果酸的作用浓度在4～20μmol/L.与模型组相比,低、高剂量熊果酸组(10、20 μmol/L)及罗格列酮组(5 μmol/L)葡萄糖摄取均明显升高(P＜0.01);低、高剂量熊果酸组3T3-L1脂肪细胞分化程度低干对照组和罗格列酮组.熊果酸可明显上调3T3-L1细胞胰岛素抵抗模型CAP mRNA及蛋白的表达(P＜0.01).结论:熊果酸改善3T3-LI脂肪细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的同时可抑制其分化,这一机制可能与熊果酸上调脂肪细胞CAP的表达有关.
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基质金属蛋白酶1、3,基质金属蛋白酶组织抑制剂1和miR-29在大鼠肺纤维化中及活性维生素D3处理后的表达与作用
目的:探讨大鼠肺纤维化发生发展中基质金属蛋白酶1(MMP1)、MMP3、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)及miR-29的表达和作用以及活性维生素D3[1,25(OH)2D3]处理对这些基因表达的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为预防组和治疗组.预防组分为对照组Ⅰ、模型组Ⅰ和给药组Ⅰ,治疗组分为对照组Ⅱ、模型组Ⅱ和给药组Ⅱ.模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ经气管注入博莱霉素,对照组Ⅰ/Ⅱ经气管注入生理盐水.预防组和治疗组分别于术后第2和14天腹腔注射给药,给药组给予活性维生素D3,模型组给予活性维生素D3溶剂,对照组给予生理盐水.预防组的各组分别于术后第14、21、28天处死大鼠取材,治疗组的各组分别于术后第21和28天处死大鼠取材.实时定量PCR检测大鼠肺组织中miR-29a及TIMP1 mRNA表达水平,免疫组织化学检测组织中MMP1、MMP3和TIMP1的表达水平.结果:模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中的MMP1、MMP3和TIMP1的表达均明显高于相同时间点对照组Ⅰ/Ⅱ中的表达,而miR-29a的表达明显低于相应的对照组Ⅰ/Ⅱ;给药组Ⅰ/Ⅱ中MMP1、MMP3和TIMP1的表达均低于相应时间点的模型组Ⅰ/Ⅱ的表达,而给药组Ⅰ/Ⅱ中miR-29a的表达则高于模型组Ⅰ/Ⅱ中的表达.结论:MMP1、MMP3、TIMP1和miR-29在大鼠肺纤维化发生发展中具有重要作用,活性维生素D3可以促进miR-29表达,抑制MMP1、MMP3、TIMP1的表达;可能是通过miR-29调节包括MMP1、MMP3、TIMP1在内的多种靶基因来发挥抑制纤维化的作用.
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秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1表达的影响
目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制.方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过RT-PCR检测MMP-1、TIMP-1的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Masson胶原染色.结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠MMP-1的表达无明显影响(P>0.05),但可以抑制TIMP-1的表达(P<0.05),促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解(P<0.05);然而在病理形态学的观察中,未发现秋水仙碱治疗组与肝纤维化模型组之间存在的显著性差异(P>0.05).结论 秋水仙碱可以抑制纤维化肝脏TIMP-1的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化的作用,但其作用有限.
关键词： 肝纤维化 秋水仙碱 基质金属蛋白酶1 金属蛋白酶组织抑制因子1 -
Toll样受体2基因敲除减轻1型胶原在高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织的沉积
目的 研究toll样受体2(TLR2, toll like receptor 2)基因敲除对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织Ⅰ型胶原沉积的影响.方法 雄性C57bl/6小鼠和TLR2基因敲除小鼠根据普通饮食或高脂饮食喂养分组并制造肥胖模型.实验结束后Masson染色检测脂肪组织总胶原变化.Western印迹检测TLR2、Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1(MMP1, Matrix metalloproteinase 1)、MMP2和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1,Tissue inhibitor of metalloproteinase 1)蛋白相对表达量.荧光实时定量PCR检测小鼠脂肪组织Ⅰ型胶原α1和Ⅰ型胶原α2 mRNA相对表达量.结果 高脂饮食小鼠脂肪组织TLR2、总胶原、Ⅰ型胶原、MMP2和TIMP1蛋白升高;Ⅰ型胶原α1和Ⅰ型胶原α2 mRNA相对表达量升高,MMP1蛋白相对表达量减少.与肥胖组相比,基因敲除的高脂饮食小鼠脂肪组织总胶原、Ⅰ型胶原、MMP2和TIMP1蛋白降低;Ⅰ型胶原α1和Ⅰ型胶原α2 mRNA相对表达量降低,而MMP1蛋白相对表达量升高.结论 TLR2基因敲除可能通过TIMP1和MMP1减少了Ⅰ型胶原在高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织的沉积.
关键词： 肥胖症 Toll样受体2 Ⅰ型胶原 基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶组织抑制剂1 -
雌二醇对人成骨样细胞膜型基质金属蛋白酶1的影响
目的观察雌二醇(E2)对人成骨肉瘤MG-63细胞株膜型基质金属蛋白酶(MT1-MMP)的作用.方法 MG-63细胞MT1-MMP蛋白质表达用Western杂交和激光共聚焦显微系统免疫荧光法检测,MMP-2活性用明胶酶谱和酶联免疫吸附测定检测.结果观察到E2促进MG-63细胞MT1-MMP蛋白质表达,并呈剂量依赖关系(P＜0.05),激光共聚焦显微系统免疫荧光法证实E2促进MT1-MMP蛋白质表达增强,MT1-MMP蛋白质表达于MG-63细胞的细胞膜和细胞质中.E2对MG-63细胞MMP-2活性无影响.结论 E2促进MG-63细胞MT1-MMP表达.
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差异凝胶电泳筛选人骨肉瘤细胞多药耐药相关蛋白
目的:应用差异凝胶电泳分析骨肉瘤多药耐药细胞株与亲本细胞株蛋白质表达的差别,筛查骨肉瘤细胞多药耐药相关蛋白.方法:以小剂量多柔比星(doxorubicin, DXR)诱导人骨肉瘤细胞株MG-63,建立骨肉瘤多药耐药细胞株MG-63/DXR100.以差异凝胶电泳分离两组细胞中的全部蛋白质,应用图像扫描和DeCyder软件分析差异(表达增加或减少>30%)表达的蛋白质点,对其进行质谱鉴定,并在Mascot 数据库中检索.结果:共检测到明显差异表达的蛋白质点30个,选择其中18个点进行质谱鉴定,有5个蛋白质点鉴定成功,它们分别是与肿瘤细胞转移相关的基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinases 1, MMP1)、具有解毒功能的乙醇脱氢酶6(alcohol dehydrogenase 6, ADH6)、属于抑癌基因的FERM域结合蛋白3(FERM domain containing protein 3, FRMD3),以及两个分别由128和300个氨基酸残基构成的未知蛋白.MMP1、ADH6和2种未知蛋白在耐药细胞表达显著高于非耐药细胞组,而FRMD3表达显著显著低于非耐药细胞.结论:通过差异凝胶电泳筛查到,MMP1、ADH6、FRMD3 及2种未知蛋白质在骨肉瘤细胞的多药耐药细胞和非耐药细胞中差异表达,它们可能参与骨肉瘤细胞的多药耐药机制.
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MMPs激动剂和抑制剂对人巩膜成纤维细胞MMP-1/2以及Ⅰ型胶原表达的作用研究
目的 研究基质金属蛋白酶(MMPs)家族MMP-1、MMP-2激动剂和抑制剂对人巩膜Ⅰ型胶原表达的作用,探讨MMP-1和MMP-2在人巩膜胶原代谢中的作用.方法 应用人巩膜成纤维细胞系作为研究模型,用荧光定量检测MMPs激动剂醋酸氨基苯汞(APMA)及抑制剂对人巩膜成纤维细胞MMP-1和MMP-2活性的影响；实时荧光定量反转录聚合酶链反应以及免疫印迹蛋白定量法检测比较激动剂组与抑制剂组对MMP-1/2以及Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达的变化；后用siRNA干扰敲除MMP-1、MMP-2或MMP-1/2后,检测巩膜成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白水平的变化.结果 MMPs激动剂引起MMP-1/2活性显著增加,Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达下降,MMPs抑制剂引起MMP-1/2活性显著下降,相应的Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达增加(均P＜O.01).激动剂可引起MMP-1 mRNA表达增加(P＜0.01),对MMP-2 mRNA表达无明显影响(P＞0.05),而抑制剂能引起MMP-2 mRNA表达下降(P＜0.01),但对MMP-1 mRNA表达无显著影响(P＞0.05).应用siRNA干扰方法敲除MMP-1、MMP-2或两者同时被敲除后,MMP-1蛋白表达均显著降低(均P＜0.01),MMP-2除在MMP-1 siRNA干扰敲除组无明显变化外(P＞0.05),其余各组均显著下降(均P＜O.01)；Ⅰ型胶原的表达在各敲除组中显著增加,当MMP-1和MMP-2均干扰敲除时,Ⅰ型胶原的表达增加为显著(均P＜0.01).结论 在人巩膜成纤维细胞系中,MMP-1/2激动剂和抑制剂均能引起MMP-1/2活性改变及相应的MMP-1/2蛋白表达变化,并终导致Ⅰ型胶原表达的变化；MMP-1和MMP-2是调控人巩膜Ⅰ型胶原重塑的关键因子.
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甲磺酸伊马替尼抑制博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的作用机制
目的:观察甲磺酸伊马替尼(以下简称伊马替尼)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预作用,并探讨其可能的作用机制.方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和伊马替尼组(n=30).采用博莱霉素制备小鼠肺纤维化模型,分别于术后第7、14、21天各处死10只小鼠,免疫组化半定量分析各组肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)表达的变化,并作相关性分析.结果:与模型组比较,伊马替尼组、地塞米松组肺组织TIMP-1、MMP-1、TGF-B1表达均降低(P<0.01).TIMp-1表达与TGF-β1呈正相关(r=0.243,P=0.004);除正常对照组外,其余3组MMP-1表达与TIMP-1表达呈负相关(r=-0.291,P<0.000 1).结论:甲磺酸伊马替尼可能通过下调TGF-β1抑制TIMP-1表达,从而相对上调MMP-1,维持TIMP-1/MMP-1平衡,抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化,作用效果与地塞米松类似.
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基质金属蛋白酶1/组织金属蛋白酶抑制因子1在常染色体显性遗传性多囊肾组织中的表达
目的:探讨基质金属蛋白酶1(MMP1)/组织金属蛋白酶抑制因子(TIMP1)在正常肾脏、常染色体显性遗传性多囊肾病(ADPKD)肾脏以及肾移植平均(2.5±1.2)年后切除的ADPKD肾组织中的表达差异.方法:用基因表达谱芯片筛选正常肾脏、ADPKD肾脏及肾脏移植后ADPKD肾脏的差异表达基因;以RT-PCR法验证其中差异表达的MMP1/TIMP1.结果:基因芯片筛选发现在正常肾组织与ADPKD肾组织中存在463条差异表达基因,肾移植后ADPKD肾组织对比ADPKD肾组织存在130条差异表达基因.筛选结果表明ADPKD以及肾移植后ADPKD肾脏MMP1/TIMP1表达较正常肾组织明显上调(P＜0.05),而前两者间无显著差异.RT-PCR法证实MMP1/TIMP1在ADPKD肾脏以及肾移植后ADPKD肾组织中的表达均明显上调,明显高于正常肾脏组织(P＜0.05),而前两者间无显著差异.结论:ADPKD的病理改变可能与MMPs/TIMPs基因表达失衡有关,MMPs抑制剂可能会对其有一定的治疗作用.
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盆底功能障碍性疾病患者宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白及MMP1-mRNA的表达
目的 研究女性盆底功能障碍疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)患者的宫颈组织中胶原蛋白Ⅰ型的含量变化及影响胶原蛋白Ⅰ型的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)金属蛋白酶(MMP1)的表达.方法 应用ELISA和RT-PCR两种方法,分别从蛋白水平和核酸水平测定胶原蛋白Ⅰ型的含量变化及影响蛋白代谢的基质金属蛋白酶(MMP1)的mRNA表达.结果 PFD组宫颈组织胶原Ⅰ型含量下降,与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.01);PFD组宫颈间质中MMP1-mRNA表达增强,与对照组比较具有显著性差异(P<0.001);分析宫颈胶原蛋白Ⅰ型与MMP1-mRNA表达的相关性,两者成负相关(r=-0.493,P<0.05).说明PFD患者其宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白的降低与MMP1对其降解增加有关.结论 PFD患者宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白的减少,MMP1的表达增加,表明PED患者宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白含量的减少与MMP1增加有关,与本身合成量无关;宫颈组织胶原蛋白含量减少和代谢异常可以用于判断女性盆底组织的支持状况,预防PFD的发生.
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人参皂苷Rg1、Rb1及Re对人皮肤胶原代谢作用的研究
目的 以人成纤维细胞为载体对三种皂苷Rg1、Rb1、Re进行研究.方法 MTT法测定三种药物在不同浓度下对人成纤维细胞增殖的影响,消化法检测羟脯氨酸含量.ELISA法测定细胞分泌Ⅰ型前胶原、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制酶-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的蛋白表达情况,RT-PCR法观察上述三种蛋白的mRNA表达水平.结果 与空白组比较,三种单体均能显著提高细胞增殖水平,羟辅氨酸含量、Ⅰ型前胶原的蛋白质及mRNA表达量,显著降低MMP-1蛋白质及mRNA表达量.结论 人参皂苷Rg1、Re、Rb1通过影响成纤维细胞的基因及蛋白质的表达,均显著促进胶原合成、抑制胶原降解,从而提高胶原蛋白总量,改善胶原代谢.
