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以含锰超氧化物歧化酶基因表达评价肉鸡对不同形态锰源的生物学利用率
目的 通过两个试验研究确定心肌细胞线粒体中MnSOD的基因表达指标是否能更快、更敏感、更恒定地监测出肉仔鸡对不同形态锰源间生物学利用性的差异.方法试验(一)将546只商品代1日龄AA肉公鸡按4×4两因子安排的完全随机设计分为13个处理组,每组6个重复笼,分别饲喂不添加锰的食用玉米-豆粕型基础饲粮(对照组)或以无机硫酸锰、弱络合强度的蛋氨酸锰E、中等络合强度的复合氨基酸锰B及强络合强度的复合氨基酸锰C形式添加0、60、120、180mg/kg锰的试验饲粮,试验期21天.21日龄每个重复笼选取3只与平均体重相近的鸡屠宰,立即取出心脏、左侧腿跖骨,分析组织锰浓度、心肌细胞线粒体中MnSOD活性及其基因表达.试验(二)将270只商品代1日龄AA肉公鸡随机分为5个处理组,每组6个重复笼,分别饲喂不添加锰的食用玉米-豆粕型基础饲粮(对照组)及分别在对照组饲粮中添加120mg/kg锰的4种锰源试验饲粮.分别于第7、14、21日龄用与试验一相同的方法进行屠宰、组织样品的采集与制备及分析.结果试验(一)中21日龄肉鸡的跖骨灰锰含量、心肌锰含量和心肌细胞线粒体中MnSOD活性均受到饲粮添加锰水平的显著影响(P=0.0001),根据这三项指标与饲粮添加锰进食量的多元线性回归斜率比法进行计算,不同络合强度有机锰源间及有机锰源与无机锰源间均无显著差异,而21日龄肉鸡心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平受到添加锰源(P<0.10)和锰水平(P=0.0001)的显著影响,以心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平为评价指标,弱、中等和强络合强度有机锰源相对于硫酸锰(如设为100%)的生物学利用率分别为99%、133%和113%.其中中等络合强度Mn-AA B的相对生物学利用率明显高于硫酸锰和弱、强络合强度有机锰源(P<0.05).试验(二)中饲粮添加中等络合强度Mn-AA B组鸡7日龄时心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平就明显高于添加硫酸锰组和弱络合强度的Mn-Met E组(P<0.02),且在14日及21日龄恒定高于其它添加锰源组(P<0.05),而跖骨灰锰含量和心肌细胞线粒体中MnSOD活性等指标则明显不如MnSOD基因表达指标敏感.结论饲粮锰在转录水平上显著影响心肌细胞线粒体中MnSOD的基因表达;心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平早在雏鸡出壳后7天即可比其酶活性等所有其它指标更快、更敏感、更恒定地监测出肉鸡对不同形态锰源间生物学利用性的差异;有机锰源的络合强度与其对肉鸡的生物学利用率间有密切相关,中等络合强度有机锰源的相对生物学利用率明显高;采用基因表达这一功能性指标,可以大大缩短试验期,减少试验动物数量,因而是未来研究锰源对鸡生物学活性的新方法.
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复方中药抗氧化剂对局部60Co照射荷瘤大鼠肝氧化损伤的保护作用
目的:研究荷瘤大鼠局部放疗引起的肝脏氧化损伤以及复合抗氧化剂的保护作用.方法:采用Walker-256肿瘤细胞株接种大鼠皮下,得到实体瘤,摘除实体瘤分割成小块植入大鼠的右后腿皮下,制成大鼠荷瘤模型,将荷瘤大鼠随机分成3组,分别为肿瘤模型组、单纯放疗组和抗氧化剂保护组,同时选取正常大鼠作为阴性对照组.抗氧化剂保护组每日给予复合抗氧化剂灌胃,分次对单纯放疗组和抗氧化剂保护组的荷瘤大鼠进行60Co γ射线局部照射4次,每次间隔1 wk,累计剂量为47Gy,后一次照射后7 d,处死大鼠,取血清和肝脏分别测定谷胱甘肽硫转移酶(GST)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、含锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化力(TAC)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)活性、NOS表达和总蛋白含量.结果:与阴性组相比,单纯放疗组GST活性和MDA含量显著升高(479±17 vs 427±59,50.3±1.0 vs46.8±2.3,33.7±8.8 vs 21.4±7.2,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),抗氧化剂保护组GST活性和MDA较单纯放疗组显著降低(421±36 vs 479±17,47.5±1.0 vs50.3±1.0,21.7±6.8 vs33.7±8.8,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).单纯放疗组T-SOD、Mn-SOD活性和GSH含量以及TAC显著低于非照射组(39.3±7.0 vs 48.8±2.8,18.7±6.2 vs 28.8±2.5,0.44±0.13vs0.57±0.06,20.7±5.3vs26.5±3.3,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),而抗氧化剂保护组T-SOD、Mn-SOD活性和GSH含量以及TAC显著高于单纯放疗组(47.7±4.3vs39.3±7.0,28.2±7.7vs18.7±6.2,0.61±0.22 vs 0.44±0.13,26.3±1.7ys 20.7±5.3,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05).单纯放疗组NO含量和NOS活性显著高于对照组(1.22±0.08vs 0.98±0.15,4.92±0.94 vs 3.63±0.77,P＜0.01,P＜0.05),抗氧化剂保护组NO含量和NOS活性及表达显著低于单纯放疗组(0.77±0.22vs1.22±0.08,3.62±0.49vs 4.92±0.94,P＜0.01,P＜0.05).结论;:荷瘤动物局部照射可以引起放疗部位以外的肝脏的氧化损伤,而高效的复合抗氧化剂可以通过提高抗氧化酶活性以及降低NO含量、NOS活性及表达等起到有效的保护作用,这为临床放疗中大限度减少放疗副作用,根治肿瘤提供了一条新的研究思路.
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含锰超氧化物歧化酶与口腔鳞状细胞癌关系的研究进展
需氧生物的生命活动离不开O2,而O2在生物体内代谢过程中产生大量有害活性氧(包括超氧阴离子自由基、单线态氧、过氧化氢、羟自由基等),对机体造成损伤,在心肺疾病、化学毒性、辐射损伤、炎症、衰老及致癌作用中都起着重要作用.
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新型肿瘤抑制因子含锰超氧化物歧化酶
活性氧作为新的信号因子,在基因复制、转录、翻译中起着重要作用,肿瘤的发生与活性氧密切相关,含锰超氧化物歧化酶(MnSOD)作为重要的抗氧化酶在机体的防御系统中发挥着重要作用.MnSOD活性在肿瘤组织内显著降低甚至检测不到及MnSOD基因转染的肿瘤细胞表型逆转的实验提示,MnSOD作为一种新型的肿瘤抑制因子,很可能为肿瘤问题的解决提供一条新的思路.
