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同位素稀释高效液相色谱串联质谱测定尿中肌酐
目的 建立同位素稀释高效液相色谱串联质谱测定尿中肌酐的分析方法.方法 尿液样品直接用甲醇-水溶液(7∶3,V/V)稀释800倍,经0.45 μm滤膜过滤净化,使用Atlantis Hilic Silica(2.1 mm×150 mm,3μm)色谱柱分离样品,甲醇-水溶液(7∶3,V/V)为流动相进行等度洗脱,电喷雾离子源正离子模式(ESI+)和多反应监测模式(MRM)采集信号,肌酐同位素内标进行定量,利用尿肌酐标准参考物质评价方法准确性,并对测定方法进行不确定度评价.结果 肌酐标准曲线在0.31～5.00 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.999 9;尿液中肌酐的定性检出限(LOD)为0.003 mg/mL,定量检出限(LOQ)为0.011 mg/mL;实际尿液样品在两个浓度水平的加标回收率分别为93.9％ ～ 104.0％和90.6％ ～ 93.8％,相对标准偏差为4.4％ ～7.6％和4.6％～7.8％(n=6);尿肌酐标准参考物质定量结果在参考限值范围内;测定结果的不确定度主要源于标准曲线、回收率和仪器允差.结论 本方法可用于测定人尿液中肌酐浓度,其测定值准确可靠,灵敏度高,稳定性好.
关键词： 肌酐 尿 同位素稀释 高效液相色谱串联质谱 -
基于HPLC-ESI-MS/MS技术分析痰热清胶囊和痰热清注射液化学成分的差异
目的:阐明痰热清的化学成分以及痰热清胶囊与痰热清注射液化学成分的差异.方法:采用高效液相色谱法串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)技术,乙腈-0.1％甲酸水为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源负离子模式下采集数据,并通过准分子离子及二级碎片离子对化学成分进行鉴定.结果:痰热清胶囊中鉴定有机酸类成分7个、黄酮类成分10个、环烯醚萜类成分4个、木脂素类成分3个、苯乙醇苷类成分9个、胆汁酸类成分4个以及未知成分4个等共41个化合物.其中,经由对照品确证化学结构25个,推测化合物结构16个(含4个未知成分).痰热清注射液中共鉴定化合物23个,相比胶囊注射液中连翘种苷异构体(3个),獐芽菜苷,连翘酯苷B,异连翘酯苷A,连翘酯苷A,芦丁,连翘种苷A异构体(2个),金丝桃苷,aldosecologanin,松脂素β-D-葡萄糖苷/表松脂素-4’-O-葡萄糖苷/马台树脂醇-4’-O-葡萄糖苷异构体(2个),连翘苷,黄芩素,牛磺鹅去氧胆酸和黄芩提取物中所含的1个未知化合物等18个成分均缺失,可能是注射液无菌生产过程采用活性炭吸附、高温灭菌、配液等工艺以及过程控制中采用超滤技术,从而造成两种制剂化学成分的差异.结论:通过该研究建立的HPLC-ESI-MS/MS分析方法,能有效表征痰热清胶囊和痰热清注射液的化学成分差异,可以为两种制剂的质量控制提供依据.
关键词： 痰热清胶囊 痰热清注射液 化学成分 差异分析 高效液相色谱串联质谱 -
HPLC-MS/MS法同时测定人血清中利培酮与帕利哌酮及奥氮平和喹硫平的浓度
目的 建立同时测定人血清中利培酮、帕利哌酮、奥氮平和喹硫平质量浓度的方法.方法 临床血清样本经蛋白沉淀法处理.用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测,色谱柱为Eclipse XDB C18(4.6 mm×50 mm,1.8 μm),流动相为甲醇-水-乙腈(含2.5 mmol·L-甲酸铵)=37.5∶12.5∶50,流速为0.5 mL·min-,柱温35℃,进样量2μL.用电喷雾离子源,多反应监测(MRM)模式,用于定量分析的离子对分别为m/z 427.3→m/z 207.2(帕利哌酮),m/z431.3→m/z 211.2(帕利哌酮-D4),m/z 411→m/z 191(利培酮),m/z 415.4→m/z 195.2(利培酮-D4),m/z 384.3→m/厶253.1(喹硫平),m/z 392.3→m/z258(喹硫平-D8),m/z 313→m/z 256(奥氮平),m/z 316→m/z 256(奥氮平-D3).结果 利培酮标准曲线方程为y=0.67χ +4.94×10-4(R2＝0.999 4),线性范围为1 ～ 100 ng·mL-1;帕利哌酮标准曲线方程为y=0.68χ+0.14×10-2(R2=0.999 6),线性范围为1～100 ng.mL-1;奥氮平标准曲线方程为y=1.33x-0.65×10-2(R2 =0.998 6),线性范围为2～ 200 ng·mL-;喹硫平标准曲线方程为y=1.80x-2.08×10-2(R2=0.999 4),线性范围为8～800ng·mL-1,4个目标物线性良好,批内及批间精密度均小于15％,提取回收率均大于90％.血清混合质控品在室温放置24h、-70℃冻存34 d、冻融3次准确度均在85％～115％.结论 本方法能同时测定血清中利培酮、帕利哌酮、奥氮平和喹硫平的浓度,方法简便、快速、灵敏,简化处理流程,缩短检测时间,适用于服用或合用以上药物患者的治疗药物监测,方便给药方案调整.混合质控品稳定性可靠,可用于治疗药物监测.
关键词： 高效液相色谱串联质谱 治疗药物监测 抗精神病药物 -
高效液相色谱-质谱联用测定减肥保健品中的痕量西布曲明
目的:在已有分析鉴定西布曲明的添加检验方法的基础上,建立了高效液相色谱-质谱联用检测痕量西布曲明的方法.方法:以C18为色谱柱,采用多反应离子监测(MRM)技术,在优化实验条件下,选择280.2/125.1离子对为检测对象,对西布曲明进行鉴别和定量分析.结果:西布曲明在0.17~ 8.34 μg·mL-1范围内与280.2/125.1提取离子流峰面积有良好的线性关系,相关系数r=0.9997,检出限为10 pg,样品的平均加样回收率为99.79%,RSD为0.28%(n=3).结论:本文建立的方法准确、可靠,较现有方法更加灵敏,可用于西布曲明的添加检验.
关键词： 高效液相色谱串联质谱 多反应离子监测 西布曲明 鉴别 定量分析 -
酒石酸氢可酮片的人体药代动力学研究
目的：研究酒石酸氢可酮片的人体药代动力学。方法：本研究采用单次给药、平行设计试验方法，按照给药剂量5、10、15 mg（低、中、高）分为三组，每组10人。通过高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定血浆中氢可酮及其两种代谢产物（去甲基氢可酮和氢吗啡酮）的浓度。采用WinNonlin 6.1分析软件计算药代动力学参数。结果：氢可酮、去甲基氢可酮的线性范围均为0.05~50.00μg·L-1，氢吗啡酮的线性范围为0.01~10.00μg·L-1；受试者口服酒石酸氢可酮片后体内氢可酮、去甲基氢可酮的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞随剂量增加而增加与给药剂量呈良好线性关系。研究过程中无严重不良事件发生。结论：HPLC-MS/MS测定法灵敏、准确、简便，适用于血浆中氢可酮及其代谢产物浓度的测定以及人体药代动力学研究。
关键词： 酒石酸氢可酮 药代动力学 高效液相色谱串联质谱 血药浓度 -
HPLC-MS/MS测定格列吡嗪健康人体药动学及生物等效性
目的 建立一种简便、灵敏的测定人血浆中格列吡嗪血药浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法,计算两种制剂在中国健康受试者的药动学参数并评价生物等效性.方法 采用双周期、随机、自身交叉试验设计,24名受试者分别服用受试制剂或参比制剂5 mg,采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/ MS)测定其血药浓度.计算受试制剂和参比制剂的药动学参数并评价其生物等效性.结果 受试者口服受试制剂和参比制剂5 mg后格列吡嗪的平均Pmax分别为(251.25±61.94)和(240.13±52.43) μg·L-1,t1/2分别为(4.85±1.39)和(5.08±1.76)h,tmax分别为(3.35±1.22)和(3.38±1.35)h,AUC0-tn分别为(1 561.44±475.73)和(1 588.82±507.40)μg· h· L-1.结论 建立的HPLC-MS/MS法灵敏,简单,可用于血浆中格列吡嗪血药浓度的测定;受试者服药后血药浓度结果经统计学分析,表明两种制剂所含的格列吡嗪生物等效.
关键词： 格列吡嗪 药物代谢动力学 高效液相色谱串联质谱 生物等效性 -
艾司洛尔等10种静脉注射用药物在8种一次性输液器滤膜上的吸附性研究
目的 考察临床常用的10种药物在8种一次性滤膜上的吸附作用,为临床合理用药提供依据.方法 将一定量艾司洛尔、胺碘酮、桂哌其特、维拉帕米、克林霉素、万古霉素、头孢替安、头孢哌酮、舒巴坦钠、美罗培南等10种药物溶于250 mL 5％ GS中,应用HPLC-MS/MS分别测定这些药物通过聚醚砜膜、混合纤维素酯膜、增强型混合纤维素酯膜、尼龙膜、聚偏氟乙烯膜、聚丙烯膜、尼龙编织膜、重离子膜等8种滤膜前后的药物浓度.结果 8种滤膜对10种药物均有不同程度的吸附作用:混合纤维素酯(CN-CA)膜、增强型混合纤维素酯(CN-CA-E)膜对药物的吸附作用明显高于其他6种滤膜(P＜0.05).聚醚砜(PES)膜,尼龙编织(NL-B)膜,重离子(ION)膜对10种药物的平均吸附率低于1％.聚丙烯(PP)膜、尼龙(NL)膜对10中药物平均吸附率低于1.5％.结论 PES膜、尼龙编织(NL-B)膜、ION膜对10种药物的吸附作用较小,可能对临床用药影响较小,适宜作为药用滤材.
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UPLC-MS/MS同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物
目的 建立同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物7-羟基奎硫平,7-羟基-N-去烷基奎硫平浓度的UPLC-MS/MS法.方法 样品经碱化后用叔丁基甲醚提取,采用Acquity UPLCTMBEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7 um),柱温40℃,以水(含50 mmol·L-1.醋酸铵,3‰甲酸)-乙腈(73:27)为流动相,流速0.25 mL·min-1,进样量5uL.采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,选择离子监测方式进行扫描,测定样品浓度,卡马西平作为内标.结果 血浆中:奎硫平在0.077 5-155 ug·L-1,7-羟基奎硫平在0.049～98 ug·L-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670ug·L-1内线性关系良好,萃取回收率均>89%,方法 回收率均>87%,日内,日间精密度RSD均<9%.脑脊液中:奎硫平在0.02～38.75 ug·L-1,7-羟基奎硫平在0.009 8～29.5 ug·L-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670 ug·L-1内线性关系良好,萃取回收率均>87%,方法 回收率均>85%,日内,日间精密度RSD均<16%.结论 该方法 灵敏度高、快速、准确、有效、且血、脑中浓度均可测定,为研究转运蛋白对抗精神分裂药物进入血脑屏障的影响提供了依据.
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HPLC-MS/MS法同时检测抗风湿中药制剂中非法添加9种糖皮质激素的方法建立
目的 :建立高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS)检测抗风湿中药制剂中可能违法添加醋酸泼尼松、醋酸泼尼松龙、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、醋酸甲基泼尼松、醋酸地塞米松、醋酸倍他米松、丙酸倍氯米松、醋酸氟氢可的松等9种糖皮质激素(GCS)类化学药,为控制这些药物滥用提供检测方法.方法:以乙腈超声提取样品,采用Venusil MP C18(2)色谱柱,流动相为0.1％ 甲酸-水/乙腈,梯度洗脱,离子源为电喷雾离子化源(ESI源),多重反应监测(MRM)模式进行检测.结果:9种禁用类激素在4.4～820.0 ng/mL范围内线性关系良好,定量限均在2.2～8.1 ng/mL;在低、中、高3个添加水平范围内的平均回收率为89.5％ ～112.6％.结论:本方法专属性、精密度、回收率高,可作为抗风湿中药制剂或保健品中非法添加糖皮质激素的监督检测方法.
关键词： 抗风湿中药制剂 糖皮质激素 非法添加 高效液相色谱串联质谱 -
饮用水中痕量灭草松和2,4-滴的固相萃取-高效液相色谱串联质谱测定法
目的 建立饮用水中灭草松和2,4-滴的固相萃取高效液相色谱串联质谱测定方法.方法 样品经C18固相萃取柱富集浓缩,利用C18色谱柱分离待测物,以甲醇和0.2％甲酸水溶液为流动相等度洗脱,负离子模式下质谱多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量.结果 灭草松和2,4-滴分别在0.122～298和0.612～1 488 ng/L的范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999 0,检出限分别为0.078和0.235 ng/L,定量下限分别为0.261和0.782 ng/L.该方法灭草松的平均回收率为88.8％～103％,RSD＜9.1％,2,4-滴的平均回收率为92.3％～93.1％,RSD＜4.1％.结论 该方法灵敏度和精密度均较高,回收率和重复性良好,适用于饮用水中灭草松和2,4-滴的测定.
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矢车菊素-3-葡萄糖苷在Caco-2细胞模型的吸收机制研究
目的 研究花色苷矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cy-3-G)在Caco-2细胞模型的吸收机制.方法 建立Caco-2单层细胞模型,观察Cy-3-G的转运情况.加入不同浓度的维拉帕米(P-gp抑制剂)、MK571(MRP2抑制剂)、根皮苷(SGLT1抑制剂)及根皮素(GLUT2抑制剂),观察P-gp、MRP2、SGLT1及GLUT2等转运蛋白在Cy-3-G肠道吸收中的作用.结果 Cy-3-G在Caco-2细胞模型的吸收率随着时间延长逐渐升高,2h时吸收率在0.76％～2.41％之间,但随着花色苷浓度的升高而降低.维拉帕米和MK571对Cy-3-G在Caco-2细胞模型的吸收无影响(P＞0.05),根皮苷和根皮素可显著抑制Cy-3-G的吸收(P＜0.05).结论 P-gp和MRP2对Cy-3-G在肠道的吸收无影响,SGLT1和GLUT2均参与了Cy-3-G在小肠的吸收.
关键词： 矢车菊素-3-葡萄糖苷 人结肠癌细胞 吸收机制 高效液相色谱串联质谱 -
HPLC-MS/MS测定尿液BPA、 TCS和4-n-NP方法的建立及其应用
[目的]建立用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)测定人尿液中双酚A(bisphenol A,BPA)、三氯生(triclosan,TCS)与正壬基酚(nonylphenol,4-n-NP)含量的方法,分析上海地区育龄男子体内上述3种物质的暴露情况.[方法]建立BPA、TCS和4-n-NP的前处理方法和HPLC-MS/MS检测方法,观察所建方法的线性关系、日内及日间精密度及回收率,并应用所建方法对育龄男性志愿者尿液中BPA、TCS和4-n-NP进行定量分析. [结果]尿液中BPA与TCS在0.1～50 ng/mL范围内线性关系良好(r2=0.999,r2=0.998),4-n-NP在0.01～10 ng/mL范围内线性关系良好(r2=0.998),尿液中BPA、TCS和4-n-NP低检测限(LOD)分别为0.1、0.1和0.01 ng/mL,固相萃取回收率分别为97.6％、76.9％和33.2％,日内及日间精密度均小于15％.该方法应用于研究200名上海育龄男性人群体内污染物暴露情况,所测育龄男子人群中BPA、TCS及4-n-NP的检出率分别为99％、96％和62.5％,含量几何均数分别为1.17、1.57和0.021 ng/mL,含量分别为＜LOD～83.7 ng/mL,＜LOD～83.8 ng/mL和＜LOD～0.472 ng/mL. [结论]本研究建立了尿液中BPA、TCS与4-n-NP的HPLC-MS/MS检测方法,灵敏度高,受干扰因素少,结果准确可靠.上海市育龄男子尿液中BPA、TCS及4-n-NP有较高检出率.
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不同孕期尿双酚A与孕妇甲状腺功能指标关联的初步研究
[目的]探讨上海市不同孕期孕妇的双酚A(BPA)暴露现状及其与甲状腺功能指标的关联.[方法]收集上海市7个区共210名孕妇(孕早、中、晚期各三分之一)的尿样,采用固相萃取-高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定尿液总BPA质量浓度,并检测血清中5个甲状腺功能指标的水平:游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb).了解不同孕期孕妇的BPA暴露水平,采用Pearson相关及多元线性回归分析尿BPA与血清甲状腺功能指标的关联.[结果]被检孕妇的尿液BPA检出率为95.7％,质量浓度范围为未检出～1 1.99 μg/L,整体水平呈偏态分布,经尿比重校正后BPA质量浓度M(P25,P75)为0.53(0.36,0.83)μg/L,孕早、中、晚期BPA质量浓度差异无统计学意义.通过Pearson相关分析发现,孕早、晚期经尿比重校正的尿BPA质量浓度与血清TGAb水平呈正相关(r=0.396,P=0.002;r=0.440,P=0.000).调整年龄、孕中BMI、孕周这些协变量后,两者仍呈正相关(b=0.369,95％CI:0.206～0.532,P=0.000).尿BPA与其他甲状腺功能指标无相关性.[结论]上海市孕妇普遍存在BPA暴露,孕期BPA暴露可能影响血清TGAb水平.
关键词： 双酚A 高效液相色谱串联质谱 甲状腺激素 甲状腺球蛋白抗体 -
LC-MS/MS测定正骨水中3种乌头类生物碱的方法研究
目的 建立高效液相色谱-串联质谱法检测正骨水(九龙川、木香、海风藤、草乌等)中3种乌头类生物碱(乌头碱、次乌头碱和新乌头碱)的定量测定方法.方法 样品经浓缩,乙醚提取,再经1％甲酸萃取,正己烷净化,用XTerraMS(R)C18,5μm,2.1 mm×150 mm柱子分离,以乙腈-10 mmol/L醋酸胺(含0.1％甲酸)(35∶65)作为流动相,柱温35℃,体积流量0.25 mL/min,采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测方式检测,外标法定量.结果 在本实验条件下,乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的标准曲线及线性范围分别为:Y=47.374 2X-0.136 0(1.14～57.0ng/mL, r=0.99997); Y=78.384 6X-23.14 (1.328 ～66.40 ng/mL, r=0.999 93); Y=66.887 4X-16.69 (0.995 ～49.75 ng/mL,r=0.999 70)；加样回收率均在80％ ～110％之间,回收及重复性的RSD均少于5％；低检出质量浓度均为0.01 ng/mL.结论 该方法操作简单,方法精密度较好、准确度较高,结果满意,可作为正骨水中乌头类生物碱的测定方法.
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LC-MS/MS法测定微孔型盐酸文拉法辛渗透泵控释片在比格犬体内生物利用度及生物等效性的研究
目的 利用LC-MS/MS法对自制微孔型盐酸文拉法辛渗透泵控释片在比格犬体内的生物利用度及生物等效性进行研究.方法 8只比格犬随机分成2组,分别单剂量口服受试制剂(自制微孔型盐酸文拉法辛渗透泵控释片)和参比制剂(市售盐酸文拉法辛缓释胶囊),在相应的时间点采集血样,经1周的清洗期后交叉给药.采用LC-MS/MS法测定比格犬体内文拉法辛血药浓度,使用WinNonlin 5.2应用软件计算药代动力学参数.结果 受试制剂和参比制剂各药代动力学参数:半衰期(T1/2)分别为2.86、3.15h,达峰时间(Tmax)分别为13.25、7.50 h,达峰浓度(Cmax)分别为253.72、127.14 ng/ml,曲线下面积(AUC(0-t))分别为3 126.14、1552.80 ng ·ml-1·h-1,平均滞留时间(MRT(0-∞)分别为13.79、10.35 h.结论 该测试方法简便可行,受试制剂与参比制剂在吸收的速度和程度方面有显著性差异,受试制剂生物利用度较高,二者生物不等效.
关键词： 盐酸文拉法辛 微孔型渗透泵控释片 高效液相色谱串联质谱 生物利用度 生物等效性 -
QuECHERS-HPLC-MS测定人血浆中3种大环内酯类抗菌药物及其代谢物含量
目的 建立测定人血浆中3种大环内酯类抗菌药物(红霉素、地红霉素、螺旋霉素Ⅰ)及其代谢物(脱水红霉素、红霉素A烯醇醚、红霉胺、新螺旋霉素Ⅰ)的分析方法.方法 用乙腈溶液提取,QuECHERS方法净化,采用无水硫酸镁和无水乙酸钠沉淀蛋白和盐析分层,无水硫酸镁和石墨碳烯净化,上清液氮气吹干后甲醇复溶待测,用Eclipse Plus C18色谱柱分离,电喷雾正离子模式,多反应离子监测扫描,内标法定量.结果 3种大环内酯类抗菌药物及其代谢物浓度在4～ 900 ng.mL-1内的线性关系良好(r＞0.999),定量限＜10 ng.mL-1;在3个添加水平下,3种大环内酯类抗菌药物及其代谢物的提取回收率可达81.45％～96.82％,日内精密度＜5.00％,日间精密度＜10.00％.结论 QuECHERS-液相色谱串联三重四级杆质谱测定血浆中3种大环内酯类抗菌药物及其代谢物的分析方法简单,快速,灵敏,特异性强,适用于血浆中大环内酯类抗菌药物及其代谢物的测定.
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LC-MS/MS法测定脑透析液中人参皂苷Rg1浓度及对其体内和体外探针回收率的考察
目的：建立高效液相色谱串联质谱( LC-MS/MS )方法,用于测定脑透析液中人参皂苷Rg1的浓度,并基于该方法考察Rg1在体外及大鼠海马、脑室的体内探针回收率,为Rg1在大鼠脑内的药代动力学研究奠定基础。方法高效液相色谱采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2．1 mm ×50 mm,1．7μm),以甲醇-水为流动相,进行梯度洗脱,流速为0．4 mL · min-1。考察本方法的特异性、线性范围、精密度、准确度以及稳定性。分别采用将探针置于不同浓度标准溶液以及将探针植入对应脑区后通入不同浓度灌流液的方法,考察微透析探针对人参皂苷Rg1的体外以及体内回收率,并进一步比较两者间的差异。结果人参皂苷Rg1的保留时间为1．91 min,线性范围为0．1~50μg·L-1,日内、日间精密度( RSD)均小于15%。微透析探针对人参皂苷Rg1的体外回收率为(4．05±0．28)%,体内回收率为(26．96±4．45)%,且在9 h内稳定。结论 LC-MS/MS法准确、灵敏、重现性好,可用于大鼠脑微透析样品中人参皂苷Rg1的浓度测定。探针对Rg1的体外回收率可能受温度等多因素影响而低于体内回收率,因此体内回收率更接近体内透析环境和过程,是校正透析液浓度的可靠方法。
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平衡透析并液质联用法同时测定度洛西汀、氟西汀和阿戈美拉汀的人血浆蛋白结合率
目的 建立平衡透析并液质联用法(HPLC-MS/MS),同时测定度洛西汀、氟西汀和阿戈美拉汀在人血浆中的蛋白结合率.方法 用平衡透析法处理血浆得透析内液和透析外液.以地西泮作为内标,色谱柱为WATERS Xterra(R) RP18(4.6 mm×100 mm,3.5 μm),以甲醇-水(5 mmol·L-1醋酸铵-0.3%甲酸)为流动相,梯度洗脱,用电喷雾离子源,正离子多反应监测.考察该方法的特异性、标准曲线与低定量限、精密度与回收率、基质效应以及稳定性. 结果 在血浆和磷酸盐缓冲液(PBS)中,度洛西汀、氟西汀和阿戈美拉汀的标准曲线线性良好,批内、批间精密度均<15%,提取回收率85.89%~106.86%,内标归一化基质效应在86.55%~104.94%,且稳定性均较好. 结论 该方法准确、灵敏、简便,可用于度洛西汀、氟西汀和阿戈美拉汀的人血浆蛋白结合率的研究.
关键词： 度洛西汀 氟西汀 阿戈美拉汀 血浆蛋白结合率 高效液相色谱串联质谱 -
固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定双壳贝类中扇贝毒素和原多甲藻酸
目的 建立一种超灵敏、高效、准确并能同时测定双壳贝类中扇贝毒素和原多甲藻酸的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱(SPE-HPLC/MS/MS)分析方法.方法 样品经甲醇三次提取,提取液过Oasis HLB固相萃取小柱,所得滤液采用反相C18柱作为色谱分离柱,含甲酸和乙酸铵的乙腈水作为流动相,梯度洗脱方式分离待测化合物.优化了固相萃取的上样、淋洗及洗脱条件,考察了粗提取液及过固相萃取小柱提取液的基质效应.结果 过固相萃取小柱提取液的基质抑制效应抵消了一部分因浓缩而提高的灵敏度.基质抑制效应不与SPE浓缩倍数成正比,浓缩倍数＞2即可提高方法灵敏度.由此得到方法线性范围为0.86 ng/ml～55.2 ng/ml及0.128 ng/ml～8.2 ng/ml,检出限为0.013 μg/kg～0.085 μg/kg,精密度低于7％,回收率为99％～ 101％.结论 本方法适用于双壳贝类中PTX2和AZA2的同时测定.
关键词： 固相萃取 高效液相色谱串联质谱 扇贝毒素 原多甲藻酸 双壳类 -
高效液相色谱串联质谱法分析穴位注射川芎嗪治疗缺血性脑中风的优势
目的:建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定大脑中动脉栓塞(MCAO)所致脑缺血模型大鼠血浆及脑组织中川芎嗪的含量,并与静脉注射以及肌内注射比较,分析穴位注射如何发挥治疗缺血性脑中风的显著优势.方法:以甲醇提取血浆及脑组织样品,咖啡因为内标,色谱柱Hedera ODS-2C18 (250 mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.1％甲酸水溶液(80∶20);流速1.0 mL·min-1;柱温30℃;采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测模式(MRM),正离子扫描测定样品中川芎嗪的质量浓度,数据运用SPSS 22.0软件分析.结果:大鼠血浆及脑组织中川芎嗪的线性范围为0.04～25.00 μg·mL-1(r=0.999 5),定量下限是0.04 μg·mL-1.日内与日间精密度RSD均小于10％,提取回收率高于90％,且稳定性良好,无基质效应.3种不同给药方式下,大鼠足三里穴位注射给药后脑组织中川芎嗪含量高.结论:该方法可靠准确、灵敏度高、特异性强,可用于大鼠血浆及脑组织中川芎嗪的含量测定,穴位注射相比其他给药方式可以促进药物在脑组织中的分布同时适当提高药物的吸收,结合针灸治疗的特点,发挥放大药物效应的优势.
