应用形态计量技术评价药物引起脏器损伤的程度

"屋翳"穴与多穴针刺对乳腺增生病模型大鼠乳腺腺体的影响

目的:以乳腺增生病病理形态计量学为标准,筛选治疗乳腺增生病的关键穴位.方法:将Wistar未孕雌性大鼠48只随机分为正常组、模型组、单穴(屋翳)组、多穴组.除正常组外,以苯甲酸雌二醇0.5 mg/kg每日腹腔注射,25 d后改为每日腹腔注射黄体酮4 mg/kg,连续5 d,复制乳腺增生病模型.单穴组取"屋翳"穴,多穴组取"屋翳""膻中""合谷""足三里"穴,每日针刺1次,留针5 min,9次为1疗程,共针刺3个疗程.治疗结束后取大鼠第2对乳房做病理切片,HE染色,镜下观察;美国IPP图像分析软件分析腺泡腔直径及面积.结果:模型组乳腺导管扩张,腺泡腔直径及面积均较正常组增大(均P＜0.01);单穴组、多穴组腺泡腔直径及面积较模型组减小(P＜0.01);单穴组与多穴组腺泡腔直径及面积无显著性差异(P＞0.05).结论:针刺"屋翳"穴可明显抑制雌激素注射引起的乳腺增生,说明"屋翳"穴是治疗乳腺增生的关键穴位.

实热证、虚热证造模大鼠肝细胞超微结构观察和线粒体定量分析

目的:实热、虚热证造模大鼠肝细胞与超级结构观察和线粒体定量的关系.方法:用超微结构形态计量方法分析了实热证、虚热证造模大鼠肝细胞超微结构的异同点.结果:虚热证时线粒体肿胀、基质变浅,部分嵴稀疏,糖原含量减少,其面密度、平均表面积、平均体积增加,数密度、比表面减少(与正常对照组比较P＜0.05,P＜0.01);实热证时线粒体个数增多,其面密度、体密度、平均表面积、平均体积降低,比表面增大(与正常对照组比较P＜0.01).实热证、虚热证两组间比较,线粒体各形态参数均有显著性差异.结论:热证虚实不同状态时,肝细胞超微结构有不同改变.

海洛因依赖对大鼠胰岛A细胞胰高血糖素表达和功能的影响

目的探讨海洛因依赖对大鼠胰岛A细胞胰高血糖素免疫反应(Glu-IR)的影响.方法应用免疫组织化学SABC单染法、形态计量及放射免疫测定法,研究大鼠海洛因依赖期间,A细胞面数密度(NA)及血浆胰高血糖素水平的变化.结果与正常组及盐水组比较,A细胞免疫组织化学显色在海洛因依赖组均增强,阳性细胞增多;A细胞的NA在海洛因依赖第38 d组明显增加,P<0.01;血浆胰高血糖素水平在海洛因依赖第10 d、24 d、38d组均高于正常组和盐水组,P<0.01.结论A细胞通过增加细胞数和增强合成分泌胰高血糖素的功能,参与海洛因依赖期间大鼠糖代谢的调节过程.

糖尿病周围神经病的病理学研究

目的 用形态计量的方法明确不同程度糖尿病周围神经病(DPN)病变的病理学特点,并分析其神经损伤程度与临床情况的相关性.方法 ①收集14例DPN患者及5例与糖尿病无关的尸检病例,进行腓肠神经活检;②光镜、电镜观察和判断神经病变;③应用免疫组化EnVision二步法检测NF、MBP、PMP22和S-100蛋白的表达情况,进一步观察神经病变情况,特别是Schwann细胞的功能状态;④从轴索、髓鞘、Schwann细胞、血管、神经束膜5个方面,应用Image-Pro Plus图像分析系统进行测定和分析.结果 DPN病变特点:①有髓纤维密度显著降低,而小直径纤维数量增加并对应较大的g-ratio值(尤其是轻度病变)时,说明髓鞘脱失与再生并存;②轴索病变显著,髓鞘改变较轻,提示轴索变性可能是造成有髓纤维减少的主要原因;③Schwann细胞数目显著增加(P＜0.05),但并不形成新的髓鞘,且MBP和PMP22表达下调,提示新生Schwann细胞功能异常;④微血管病变主要为管壁基底膜样物质沉积,管壁结构不清,管腔狭窄;⑤神经束膜增厚是DPN特征性病变,主要是束膜细胞外基质增加所致.结论 本实验显示,DPN的病理特点为有髓纤维数目明显减少,轴索变性,脱髓鞘,Schwann细胞增生,血管壁基底膜样物质沉积,神经束膜增厚.DPN病变程度常与临床表现不一致,因此腓肠神经活检对诊断和研究DPN非常重要.

脑星形细胞瘤形态计量病理分级诊断的研究

目的:探讨星形细胞瘤形态定量病理分级诊断方法.方法:应用图像分析定量技术,对136例人星形细胞瘤和3例正常对照的细胞核的面积等8项形态参数、肿瘤4项分布密度参数和细胞核分维值进行量化.结果:经图像分析定量,说明细胞核的面积、周长、直径、短轴和长轴、细胞核数、巨细胞面数密度、血管交点面数密度和细胞核面数密度等9项指标能够较好地反映星形细胞瘤4级间的差异,具有较好的鉴别诊断价值.结论:应用形态计量方法进行星形细胞瘤的病理分级诊断更加客观可靠.

眼眶MALT淋巴瘤临床病理及形态定量研究

对5例眼眶MALT恶性淋巴瘤(均为男性,平均年龄55.4岁)进行临床病理、免疫组化及形态定量测定研究.标本采用常规石蜡切片,HE染色及ABC法免疫组化染色,用HPIAS-1000彩色图像分析系统对肿瘤细胞核的形态进行定量测定.5例均为小淋巴细胞型恶性淋巴瘤,免疫组化染色瘤细胞表达均为LCA和L26阳性,形态定量测定表明肿瘤细胞与对照组间14项参数具有高度显著性差异(p＜0.001).说明免疫组化染色及形态定量测定对眼眶恶性淋巴瘤的诊断和鉴别诊断具有重要意义,形态定量测定为眼眶恶性淋巴瘤疑难病例的诊断提供了一种新的重要辅助诊断方法.

中子照射小鼠脾脏损伤特点及rhIL-11的治疗作用

目的 探讨中子照射小鼠脾脏的损伤特点及重组人白介素-11(recombinant human interleukin-11,rhIL-11)对小鼠中子照射脾脏损伤的治疗作用.方法 选取二级雄性BALB/c小鼠90只,随机分为对照组、3Gy中子照射组和rhIL-11治疗组.照射组小鼠采用3 Gy中子全身照射,rhIL-11给药剂量为600μg/kg/d,每天1次,连续给药7 d.采用HE染色、电镜、核仁组成区嗜银相关蛋白(argyrophylic nucleolar organizer regions,AgNORs)染色和图像分析等手段,观察小鼠脾脏病理形态变化以及脾脏淋巴细胞增殖活力的改变.结果 3 Gy中子照射后小鼠脾小体内淋巴细胞数量显著减少,以坏死为主,淋巴细胞内AgNORs面积与核面积比显著减少;rhIL-11治疗后3 d小鼠脾小体内见大量淋巴细胞增生,淋巴细胞内AgNOR面积与核面积比高于照射组.结论 3 Gy中子照射可致小鼠脾脏损伤,rhIL-11可减轻其损伤,促进淋巴细胞增生.

碱性成纤维细胞生长因子复合天然型无机骨修复兔下颌骨缺损的形态计量研究

观察了碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)复合天然型无机骨(N.N.B)与单纯天然型无机骨对骨生长的促进作用.在人工兔下颌骨缺损部位置放3组不同的骨组织,17实验单位置入N.N.B,17实验单位置入bFGF+N.N.B,9实验单位置入自体骨,分别于3周、6周、12周观察不同组别单位面积内的成骨面积、血管密度(MVD)、间质细胞增殖指数(PCNA增殖指数).结果发现:bFGF+N.N.B组成骨时间早,成骨面积多,血管增生明显,PCNA增殖指数高,与N.N.B组有明显差异(p<0.001),与自体骨组基本接近(p>0.05).可见,bFGF可促进新骨在无机骨中的生长,可作为临床的一种较为理想的复合型人工植骨材料.

二乙基亚硝胺诱发肝癌前病变大鼠模型的建立

目的:研究二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌前病变的时效关系与量效关系.方法:Wistar♂大鼠100只,体质量均衡随机分5组；每84 h 1次分别腹腔注射二乙基亚硝胺0、25、50、75、100 mg/kg造模.每组体质量排序分10小组,年龄配对；造模时程短0d,间隔14d延长,长126 d,灌注固定肝脏.常规石蜡包埋,6 μm切片,HE染色,观察病变性质后显微照相；使用Image-Pro Plus软件,分别形态计量10、20、40倍物镜下汇管区(R1)、肝索(R2)、肝细胞核(R3)的体积构成比,观察每10个高倍镜视野下的核分裂像；计算各动物异型性指数[Ei=(1-R1)-1·(R3)·(R2)-1].Prism 4软件回归“二乙基亚硝胺导致异型性指数”的时效曲线及曲线下面积,进而导致曲线下面积的量效关系.结果:以异型性指数(肝细胞核/浆体积比校正值),回归0、25、50、75、100 mg/kg二乙基亚硝胺造模的半效时程(95％CI)分别为70 347(0-)、1 734(937-3 211)、1 536(948-2 490)、1 530(890-2 632)、1 183(955-1 466)h,曲线下面积分别为0.0064、0.0084、0.0123、0.0165、0.0167[异型性指数·log(h)].以曲线下面积,回归二乙基亚硝胺诱发肝细胞癌前病变的半效剂量为48.255mg/kg.50.000mg/kg造模各时程的异型性指数与核分裂像总数之间呈直线正相关(y=0.0023x-0.0056,r=0.9217,n=10,P＜0.01).结论:以异型性指数为指标,每84 h腹腔注射1次二乙基亚硝胺,诱发♂大鼠肝细胞癌前病变的佳造模剂量为48.255 mg/kg(约50.000mg/kg),佳造模累积连续时程为64 d.核分裂像计数验证了异型性指数的临床预警价值.

深低温冷冻家兔皮质骨生物力学及骨形态计量改变的实验研究

目的探讨深低温冷冻法对家兔皮质骨的生物力学变化及骨形态计量的影响.方法将 150只家兔随机分为新鲜标本组(对照组)30只,深低温冷冻4周、8周、12周、16周各30只,取左股骨皮质骨测定极限弯曲强度(BS)、极限压缩强度(CS).取右胫骨进行骨形态计量分析.结果深低温冷冻后家兔皮质骨的生物力学(极限弯曲强度和极限压缩强度)及骨形态计量分析(骨小梁体积、宽度以及平均骨小梁间距)均无明显改变.结论深低温冷冻骨的生物力学稳定,骨形态计量无明显改变,且随冷冻时间延长亦无改变,为深低温冷冻骨库的建立提供了有力的实验依据.

卵巢癌定量研究

目的应用日本产Luzex-F型图像分析仪,对31例卵巢上皮性癌(浆液性癌19例、粘液性癌12例)与7例正常卵巢上皮组织进行形态定量测定.方法应用DNA特异染色(Feulgen染色),测量每例50～70个细胞核的面积、周长、大直径、等效圆直径、形状因子5项参数.经统计学分析.结果在卵巢上皮性癌组织分级中,癌细胞核大小较核形态规则程度具有更重要的鉴别意义,癌细胞核越大则组织分级越高;粘液性癌细胞核较浆液性癌细胞核大;临床分期愈晚,癌细胞核愈大,但核形状无明显改变.结论形态计量对卵巢癌的病理学鉴别诊断具有客观评价.卵巢癌细胞核大小较核形状在临床工作中具有更重要的价值.

间歇性低氧训练对急性运动大鼠心肌超微结构的影响

对SD大鼠进行4周的间歇性低氧训练后,电镜下观察其急性运动后心肌组织的超微结构变化,并进行形态计量学分析.结果显示:间歇性低氧训练和有氧运动相结合,可对心肌肌原纤维间线粒体的数量和体积产生一定影响,并通过线粒体体积密度的增高和线粒体内膜及嵴的表面密度的增大,提高有氧代谢能力.

腮腺主导管结扎后腺体的组织改变

目的 观察腮腺主导管结扎后腺体组织的变化.方法 用SD大鼠建立动物模型,将其右侧腮腺主导管结扎;定期获取标本,制备组织切片,HE染色、形态计量等方法,观察术后不同阶段腮腺组织中腺泡、导管及间质的形态变化及体积分数.结果 腮腺主导管结扎后,腺体组织开始萎缩,其中腺泡体积分数逐渐减少,至30d时已完全消失;间质、导管及体积分数增加;各时间组中各组织成分的体积分数与对照组均有显著差异(P<0.05);萎缩后的腺体终由扩张及增生的导管、问质(主要含纤维结缔组织)构成.结论 腮腺主导管结扎后可促使腺体发生萎缩,失去分泌功能从而避免腮腺区域术后涎瘘等并发症的发生.

SD大鼠及beagle犬肾上腺组织形态计量分析

目的了解SD大鼠及beagle犬肾上腺组织学参数,为肾上腺毒性诊断提供组织学判断依据.方法以40只成年SD大鼠及20只成年beagle犬为研究对象,雌雄各半,大鼠在12周龄处死,beagle犬在12月龄时处死.以10%中性福尔马林固定肾上腺,石蜡包埋,5μm切片,HE染色.以Spot Advanced图像分析软件测量犬、大鼠肾上腺皮质厚度以及球状带、索状带、网状带厚度,并比较雌、雄性动物,犬及大鼠间区别.结果显示beagle犬肾上腺皮质厚度约为1183μm,其中球状带厚度约为212μm,索状带厚度约为446μm,网状带厚度约为525 μm,雌雄beagle犬肾上腺皮质厚度及皮质各带厚度无显著差异.SD大鼠肾上腺皮质厚度约为1021μm;其中球状带厚度约为70 μm,索状带厚度约为553μm,网状带厚度约为398μm,雌雄SD大鼠肾上腺皮质厚度及皮质各带厚度无显著差异.beagle犬与SD大鼠比较,肾上腺皮质以及球状带、网状带均厚于SD大鼠,但SD大鼠索状带明显厚于beagle犬.结论beagle犬肾上腺皮质厚度大于SD大鼠,同时球状带、网状带厚度也大于SD大鼠,但索状带SD大鼠明显宽于beagle犬,显示犬及大鼠肾上腺皮质各带所占比例不同.性别对犬及大鼠肾上腺皮质厚度及各带厚度均无影响.

耐药性小鼠乳腺癌细胞的超微结构及形态计量研究

目的:探讨小鼠乳腺癌经化疗后存活的耐药性癌细胞的超微结构和形态计量特征以及这类癌细胞的种类.方法:对TAⅡ小鼠乳腺癌联合化疗,进行光镜、电镜观察,用图像分析系统进行细胞及细胞器的形态计量分析.结果:坏死癌组织的碎屑中有残留的癌细胞存在.从超微结构上分析,这些癌细胞仍存活.残留癌细胞体积小,具有低分化细胞的形态特征.结论:化疗后残留的小鼠乳腺癌细胞可能是具有特殊的超微结构及形态计量特征的异质性癌细胞群,对多种化疗药物具有强大的抵抗力,它们可能是肿瘤局部复发的潜在因素.

小鼠乳腺癌化疗放疗后顿抑癌细胞超微结构研究

目的:探讨小鼠乳腺癌化疗、放疗后存活顿抑癌细胞的超微结构特征.方法:TAⅡ乳腺癌小鼠36只,随机分为对照组、化疗组(环磷酰胺、5-氟脲嘧啶、氨甲喋呤)和放疗组(X射线),用电镜及电脑图像分析系统对治疗后残留的存活癌细胞进行形态分析.结果:有效化疗和放疗后的癌组织绝大多数癌细胞已死亡,在坏死癌组织中仍残留着形态完好的癌细胞.结构上分析这类细胞仍然存活,将其命名为顿抑癌细胞,并分为两类:Ⅰ型顿抑癌细胞和Ⅱ型顿抑癌细胞.顿抑癌细胞的平均体积明显小于对照组(P<.001),线粒体和粗面内质网的体密度也明显少于对照组(P<.001或P<.01),残留的顿抑癌细胞在对照组中也找到了同形的相应的副本对应细胞.结论:化疗、放疗后小鼠乳腺癌的顿抑癌细胞可能是癌局部复发的潜在危险因素.

医学体视学在小儿神经系统疾病研究中的应用

体视学作为一种形态计量的方法学, 在医学领域的各个方面几乎都有应用. 体视学的定义即是根据结构的随机截面或切片, 定量研究结构的几何特征(体积、表面积、长度、厚度、曲率和数目等)的方法学[1]. 换言之, 体视学就是从二维平面测得的图象数据, 获取三维空间内结构的定量信息的科学. 或者说, 体视学就是要研究观察到的局部结构与欲分析的全部结构之间的联系. 是六十年代创立的一种全新的方法, 近年来得以发展和完善并逐渐拓宽了应用领域. 本文主要分析体视学在小儿神经系统疾病研究中的应用.

MIAS-300图像分析仪在形态计量学研究中的应用

介绍了MIAS(micro image analysis system)图像分析仪的系统构成、测量的主要步骤以及定标操作方法；介绍了目标参数及体视学参数的定义及算法。结果显示，MIAS-300图像分析仪适用于从二维或三维角度进行形态计量学研究。

成熟卵泡形态特征的研究

目的:研究成熟卵泡的形态特征.方法:对72例自然排卵周期内卵泡,测量面积、周长、大直径、等效圆直径、似圆度5个形态参数,予以统计学分析.结果:获得成熟卵泡形态指标的参考指标.结论:卵泡形态参考指标的标准化对生殖医学有重要的临床应用价值.