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脂氧素类似物BML-111对炎症状态人单核细胞株U937氧化应激标志物表达的影响
目的 观察脂氧素类似物BML-111预处理对炎症状态人单核细胞株U937氧化应激标志物表达的影响.方法 培养U937细胞并分为对照组、模型组、实验组.对照组不加入药物;模型组加入1μg/L的脂多糖(LPS)制作炎症模型;实验组先加入200μg/L的BML-111预处理30 min后再加入1μg/L的LPS.采用细胞免疫荧光法检测各组U937细胞中的核因子E2相关因子2(Nrf2);采用RT-PCR法检测各组U937细胞中的Nrf2、醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶1(HO-1)、TNF-αmRNA.结果 对照组细胞中Nrf2蛋白主要定位于胞核与胞质;模型组细胞中Nrf2蛋白主要定位于胞核,即从胞质转位至核内;实验组Nrf2蛋白表达定位与对照组相近.模型组Nrf2蛋白相对表达量高于对照组、实验组Nrf2蛋白相对表达量低于模型组(P均<0.05),模型组中Nrf2、NQO1、HO-1、TNF-αmRNA相对表达量高于对照组、实验组细胞中Nrf2、NQO1、HO-1、TNF-αmRNA相对表达量低于模型组(P均<0.05).结论 BML-111预处理后,炎症状态的U937细胞中Nrf2蛋白核转位受抑制,Nrf2蛋白及其下游基因表达下调,TNF-α基因表达下调;调节Nrf2蛋白及其下游基因表达、下调TNF-α表达可能是BML-111抗氧化应激作用机制的一部分.
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Nrf2-Keap1信号通路对肿瘤生物学行为影响的研究进展
核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,Nrf2与其接头蛋白Keap1是细胞抗氧化反应的中枢调节者.当体内发生氧化应激反应时,Nrf2与锚定蛋白Keap1发生解聚,解聚后的Nrf2与抗氧化反应元件(ARE)相互作用,可增加ARE调控的Ⅱ相氧化还原代谢酶活性并上调抗氧化反应基因表达水平,从而增加细胞抵抗氧化应激的能力.近年来相关领域研究结果发现Nrf2-Keap1在恶性肿瘤表达明显增加,Nrf2-Keap1信号通路在肿瘤发生、进展、迁移以及化疗敏感等方面发挥重要作用,现将其研究进展综述如下.
关键词： 核因子E2相关因子2 锚定蛋白Keap1 信号通路 肿瘤 生物学行为 -
核因子 E2相关因子2与急性肾损伤关系的研究进展
围术期急性肾损伤（AKI）的发病机制与氧化应激紧密相关，AKI患者血清中氧化物活性增加，而抗氧化物活性降低，并伴随肾脏功能障碍。核因子E2相关因子2（Nrf2）是维持细胞氧化应激水平的重要转录因子，正常静止条件下，Keap1在胞质直接与Nrf2结合，使Nrf2泛素化并被蛋白酶体降解，从而抑制Nrf2的核易位。通过活性氧或亲电子物质的作用，Keap1分子构象发生改变，Nrf2与Keap1分离并异位到细胞核内行使功能。 Nrf2-Keap1防御系统对于氧化应激产生的主要作用已经很清楚，且其在AKI中可通过激活潜在的抗氧化产物对抗氧化应激。因此，Nrf2活化剂或其他蛋白酶体降解抑制剂可作为新型治疗候选药物，通过激活Nrf2，减少氧化应激的发生。含硫化合物和酚类抗氧化物是膳食中主要的Nrf2活化剂，普天登包含5个低剂量的天然Nrf2活化成分，可作为一种有效的膳食补充剂。蛋白酶体抑制剂也有望有效抑制Nrf2蛋白酶体降解，从而增加Nrf2活性。
关键词： 核因子E2相关因子2 急性肾损伤 氧化应激 -
漆黄素改善阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆障碍的细胞内信号通路
目的 研究黄酮类化合物漆黄素对Aβ诱发小鼠学习功能障碍的影响.方法 通过侧脑室植入的引导管灌注Aβ (1-42)建立AD小鼠模型.Aβ灌注7d前开始每天进行漆黄素干预并持续至实验结束.Aβ灌注3d后,利用经典的水迷宫观察小鼠学习记忆功能的变化,实验结束后立即分离海马组织,提取核蛋白和总蛋白,分别利用Western blotting和RT-PCR方法检测小鼠海马核内核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白水平及其下游靶基因血红素加氧酶(HO-1)和γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(γ-GCL)催化亚基(GCLC)和修饰亚基(GCLM)的mRNA表达水平.结果 (1)水迷宫实验结果显示,漆黄素干预组[10mg/kg:( 17.54±3.56)s；20 mg/kg:( 13.04±2.36)s]较Aβ (1-42)模型组[(25.40±3.33)s；(1.70±0.05)次]能够剂量依赖性明显降低潜伏期,并增加穿过平台所在位置的次数[ 10 mg/kg:(2.50±0.40)次；20mg/kg:( 3.50±0.36)次],差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)；(2) Western blotting和RT-PCR结果显示,漆黄素干预组较Aβ(1-42)模型组能够明显增加海马核内Nrf2蛋白表达水平(10 mg/kg:0.11±0.01;20 mg/kg:0.16±0.02),上调HO-1 (10 mg/kg:0.56±0.06;20 mg/kg:0.79±0.10)、GCLC( 10 mg/kg:0.61±0.04;20 mg/kg:0.86±0.09)和GCLM( 10 mg/kg:0.35±0.04;20 mg/kg:0.51±0.04) mRNA水平,差异均具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 漆黄素可有效缓解Aβ(1-42)诱发的小鼠认知功能障碍,其促智作用很可能与激活内源Nrf2抗氧化中枢信号通路有关.
关键词： 漆黄素 阿尔茨海默病 淀粉样蛋白 核因子E2相关因子2 -
核因子E2相关因子2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1在结直肠癌中表达及临床意义
目的 探讨核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)在结直肠癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测Nrf2和Keap1在60例结直肠癌患者的癌组织(结直肠癌组)及癌旁组织(对照组)中表达水平,分析Nrf2和Keap1与结直肠癌临床病理特征的关系及两者表达的相关性.结果 结直肠癌组组织中Nrf2、Keap1阳性率(76.67％、70.00％)均高于对照组(31.67％、26.67％)(P＜0.05);不同性别、年龄、肿瘤部位、分化程度结直肠癌患者组织中Nrf2、Keap1阳性率比较差异均无统计学意义(P＞0.05),临床分期Ⅰ～Ⅱ期结直肠癌患者组织中Nrf2、Keap1阳性率(64.71％、58.82％)均低于Ⅲ～Ⅳ期患者(92.31％、84.62％) (P＜0.05);Spearman相关性分析显示,结直肠癌组织中Nrf2和Keap1表达无相关性(r=0.155,P=0.238).结论 Nrf2和Keap1异常表达可能参与结直肠癌的发生、发展.
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PKC活化对兔视网膜色素上皮(RPE)细胞Nrf2表达的影响
目的 研究蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活化后是否能引起体外培养的兔视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞内核因子E2相关因子2(nuclear factor enthroid 2-related factor 2.Nrf2)的激活和核转位,探讨PKC活化是否对RPE细胞内的Nrf2表达产生影响.方法 将一定浓度的PKC特异激活剂佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)作用在体外培养的兔RPE细胞(B组)以及Nrf2抑制剂预处理后的RPE细胞(C组),再培养24 h后,应用免疫荧光技术及Western blot测量Nrf2在胞核内的表达情况,并与空白对照(A)组进行对比分析.结果 免疫荧光检测RPE细胞核内的Nrf2蛋白表达结果显示:与A组相比,B、C组RPE细胞核中Nrl2蛋白表达均增加,其中B组增加显著,C组较B组增加幅度低;3组之间差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测RPE细胞核内的Nrf2蛋白经图像分析处理定量,扫描灰度值差异显著(A组0.286±0.013,B组1.304±0.033,C组0.671±0.087;P＜0.05).结论 PKC激活后可使兔RPE细胞浆中Nrf2发生核转位,Nrf2抑制剂能减弱PKC的作用.
关键词： 蛋白激酶C 佛波酯(PMA) 核因子E2相关因子2 核转位 -
Nrf2通路在糖尿病视网膜病变中的研究进展
糖尿病视网膜病变(DR)作为糖尿病的一种严重并发症,可能导致严重的视力下降或丧失.核因子E2相关因子2(Nrf2)是一种在氧化应激及炎症相关组织损伤中发挥重要作用的氧化还原敏感转录因子.越来越多的研究表明,Nrf2在DR的发生和发展中起着重要作用.本文就Nrf2通路在糖尿病、DR发病中的作用及其与血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性进行综述.
关键词： 核因子E2相关因子2 糖尿病视网膜病变 氧化应激 血管内皮生长因子 -
Nrf2/ARE途径在紫草素诱导U937细胞分化中的作用
目的 研究紫草素诱导U937细胞分化及其相关机制.方法 通过网络药理学分析紫草素潜在靶点相互作用.紫草素处理U937细胞,进行细胞活力、形态观察、NBT还原能力、Nrf2分化相关基因及Nrf2途径相关分子mRNA表达和核蛋白含量检测.结果 紫草素靶点影响Nrf2途径,并且Nrf2能通过蛋白质互作影响分化.紫草素显著抑制U937细胞增殖,升高NBT还原能力、CD11b和CD14mRNA表达、Nrf2核蛋白含量、Nrf2及其下游基因mRNA的表达量.上调细胞Nrf2/ARE途径,增加CD11b和CD14mRNA表达,反之则降低其表达.结论 紫草素上调Nrf2/ARE途径增强诱导人急性髓系白血病U937细胞分化.
关键词： 紫草素 细胞分化 急性髓系白血病 NFATC转录因子类 核因子E2相关因子2 -
老年缺血性卒中后继发性癫痫与Nrf2基因多态性的关联性研究
目的:探讨中国北方汉族人群中,老年缺血性卒中后继发性癫痫与核因子E2相关因子2(Nrf2)基因多态性的关系.方法:选择2013-01-2016-06在本科治疗的53例老年缺血性卒中后继发性癫痫患者作为癫痫组,在同期于我科治疗的老年缺血性卒中未合并癫痫的患者中随机选择100例作为卒中组,同时随机选择同期在我院体检的老年健康体检者100例作为对照组,采用SNaPshot法比较Nrf2基因型多态性在各组间的差异.结果:癫痫组与卒中组、对照组比较,Nrf2基因rs35652124位点(AG+ GG)基因型和G等位基因频率均显著高于后2组(均P＜0.05).卒中组与对照组比较,2组患者基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义.多因素Logistic回归分析结果显示Nrf2基因rs35652124位点A＞G是缺血性卒中患者继发癫痫的危险因素(OR=1.230,95％CI:1.008～1.871,P=0.041).结论:对于缺血性卒中患者,Nrf2基因rs35652124位点多态性与继发性癫痫密切相关.
关键词： 缺血性卒中 继发性癫痫 核因子E2相关因子2 基因多态性 -
阿托伐他汀通过激活Nrf2通路对抗大鼠缺血再灌注心肌氧化应激损伤和凋亡
目的:观察阿托伐他汀预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)浓度、心肌细胞内Caspase3和Nrf2表达的影响,探讨阿托伐他汀的心肌保护作用机制.方法:将40只雄性SD大鼠随机等分为4组:假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、阿托伐他汀标准剂量预处理组(C组)和阿托伐他汀强化剂量预处理组(D组).灌胃7d后,第8天制作大鼠在体心肌MIRI模型,结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min后,用比色法检测心肌中MDA和SOD浓度,Western blot检测活化Caspase-3和Nrf2的表达.结果:与B组比较,C组SOD浓度明显增加(P＜0.05),MDA浓度明显减少(P＜0.05),Caspase-3表达明显减少(P＜0.05),Nrf2表达明显增多(P＜0.05);与C组比较,D组SOD浓度、Nrf2表达增加更为明显(P＜0.05),MDA、Caspase-3表达减少更为明显(P＜0.05).结论:阿托伐他汀预处理明显增强抗氧化酶活性,抑制指质过氧化,减少细胞凋亡,减轻MIRI损伤,且呈剂量依赖性,表现较强的心肌保护作用,其机制可能与增加心肌Nrf2表达有关.
关键词： 心肌缺血-再灌注损伤 阿托伐他汀 氧化应激 凋亡 核因子E2相关因子2 -
奥曲肽对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用
目的 探讨奥曲肽预处理对小鼠肾脏缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制.方法 将24只C57BL/6小鼠编号后应用随机数字表分成3组:假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(I/R组)和奥曲肽预处理+肾脏缺血再灌注组 (OPC+ I/R组),每组8只.收集小鼠肾脏缺血再灌注24h后的血清及肾脏组织.采用相应试剂盒测定各组血清肌酐(SCr)及尿素氮(BUN)水平,苏木素-伊红(HE)染色比较肾脏组织损伤,试剂盒检测各组小鼠肾脏内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot检测肾脏组织内核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)及核因子-κB(NF-κB)的蛋白表达.结果 I/R组SCr及BUN[(113.38±18.39)μmol/L、(32.31±6.66)mmol/L]均显著高于Sham组[(27.61±7.77)μmol/L、(11.82±2.56)mmol/L;t=12.153,P=0.000;t=8.124,P=0.000].OPC+I/R组SCr及BUN[(72.39±11.97)μmol/L、(22.12±3.75)mmol/L]均低于I/R组(t=5.285,P=0.000;t=3.774,P=0.003);HE染色检测肾小管坏死评分,OPC+I/R组[(2.13±0.64)分]较I/R组[(4.13±0.84)分]显著降低(t=5.736,P=0.000);OPC+I/R组MDA水平[(3.92±0.69)μmol/g]低于I/R组[(5.94±1.23)μmol/g,t=5.004,P=0.002],OPC+I/R组SOD活性[(34.64±6.77)kU/g]与I/R组[(24.05±6.15)kU/g]比较明显升高(t=3.276,P=0.006);Western blot检测结果显示OPC+I/R组Nrf2和HO-1相对表达量(4.60±0.88、4.76±0.87)高于I/R组(2.35±0.50、2.67±0.54;t=6.294,P=0.000;t=5.737,P=0.000),OPC+I/R组NF-κB相对表达量(2.51±0.21)低于I/R组(5.02±0.75;t=7.434,P=0.000).结论 奥曲肽可激活肾脏Nrf2/HO-1通路提高抗氧化应激能力以及抑制NF-κB通路减轻炎性反应从而对小鼠肾脏I/R损伤起到保护作用.
关键词： 奥曲肽 肾脏缺血 再灌注损伤 核因子E2相关因子2 核因子-κB -
Kelch样ECH相关蛋白1-核因子E2相关因子2-抗氧化反应元件信号通路在七氟烷减轻大鼠缺血再灌注肺损伤中的作用
目的 观察Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrt2)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路在七氟烷减轻大鼠缺血再灌注肺损伤中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,体质量200 ～240 g,随机分为4组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟烷组(Sev组)和七氟烷+Nrf2小干扰RNA (siRNA)质粒组(SNS组).阻断右肺门60 min后再灌注120 min制备大鼠肺缺血再灌注模型,Sev组和SNS组气管插管成功后吸入七氟烷,SNS组进行模型制备前5d,采用腺病毒包装的Nrf2-siRNA液小鼠吸入3次(1次/天).右肺门再灌注120 min时处死大鼠,取肺组织,测定肺湿干重比(W/D)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量、Nrf2和血红素氧合酶-1(HO-1)的表达.结果 与S组比较,I/R组和Sev组肺组织W/D值(6.18±0.42、5.21 ±0.27)及MDA含量[(1.792 ±0.309)、(1.585±0.256) mmol/mg蛋白]明显增加,SOD活性[(297±41)、(344±47) U/mg蛋白]下降,Nrf2 (80.8±10.2、122.3±16.9)和HO-1 (98.1±10.0、121.8±15.6)表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,Sev组肺组织W/D值(5.21±0.27)及MDA含量[(1.585±0.256) mmol/mg蛋白]降低,SOD活性[(344±47) U/mg蛋白]上升,Nrf2(122.3 ±16.9)和HO-1 (121.8±15.6)表达上调(P＜0.05);与Sev组比较,SNS组肺组织W/D值(5.77±0.30)及MDA含量[(1.606 ±0.287) mmol/mg蛋白]明显增加,SOD活性[(266±38) U/mg蛋白]下降,Nrf2 (28.0±5.3)和HO-1 (81.4±9.7)表达下调(P＜0.05).结论 Keap1-Nrf2-ARE信号通路参与了七氟烷减轻大鼠肺组织缺血再灌注损伤.
关键词： 七氟烷 肺缺血 再灌注损伤 核因子E2相关因子2 -
大鼠液压冲击脑损伤核因子E2相关因子2-抗氧化反应元件通路的时程表达变化
目的 观察大鼠液压冲击脑损伤核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路及其下游因子血红素氧化酶-1(HO-1) 和磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1(NQO-1)时程表达变化.方法 成年雄性SD大鼠56只,制作液压冲击颅脑损伤模型,术后1、6、12、24h、3、7d对大鼠进行神经功能评分,用干湿重法测定脑含水量;Western blot测定胞质、胞核Nrf2蛋白以及HO-1、NQO-1蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定Nrf2-mRNA表达.结果 创伤性脑损伤(TBI)组脑含水量于冲击伤后6h开始增加[(78.98±0.12)%],24h达高峰(82.98±0.62)%],3d开始下降[(82.26±0.72)%],神经功能评分趋势与之相反,24h下降至低值(2.78±0.66),差异均有统计学意义(F=98.712、78.806,P=0.000).Western blot证实TBI组胞核Nrf2于1h开始升高(0.82±0.18),24h达到高峰(1.87±0.82),3d时降低(1.42±0.55),而胞质Nrf2自12h开始持续走低(1.14±0.22),呈相反趋势,差异均有统计学意义(F=11.566、17.928,P=0.001).HO-1和NQO-1蛋白表达与胞核Nrf2蛋白趋势一致(F=16.175、12.694,P=0.001).FQ-PCR结果显示TBI组冲击伤后各时间点Nrf2-mRNA表达水平无明显变化(F=0.802,P=0.968).结论 大鼠脑液压冲击伤Nrf2-ARE通路激活,可能在创伤性颅脑损伤中发挥抗氧化应激损伤作用.
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Nrf2和ERK通路在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义
目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)及ERK信号通路在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及临床意义.方法:免疫组织化学法检测PTC组织芯片中Nrf2、ERK2和p-ERK1/2的表达;Western blot检测Nrf2、ERK2、p-ERK1/2蛋白在PTC、癌旁组织及正常甲状腺组织中的相对含量;实时定量PCR检测Nrf2 mRNA在PTC、癌旁组织及正常甲状腺组织中的转录水平.结果:Nrf2、ERK2、p-ERK1/2蛋白在PTC中高表达,在癌旁组织中弱阳性或阴性表达(P＜0.01).Nrf2、ERK2、p-ERK1/2蛋白在淋巴结转移和临床Ⅲ～Ⅳ期组明显高于无淋巴结转移组和临床Ⅰ～Ⅱ期组(P＜0.05),且Nrf2蛋白与ERK2和p-ERK1/2蛋白呈正相关(r=0.723 2和r=0.668 6,P＜0.05).Western blot结果显示PTC组织Nrf2、ERK2、p-ERK1/2含量高于癌旁和正常组织(P＜0.01).PTC组Nrf2 mRNA转录水平明显高于癌旁及正常组织(P＜0.01).结论:Nrf2与PTC的进展有关,推测Nrf2高表达与ERK2通路有关.
关键词： 核因子E2相关因子2 甲状腺乳头状癌 Erk2 P-ERK1/2 -
Nrf2在促进肿瘤生长及化学治疗耐药中的作用
化学治疗(化疗)在肿瘤的综合治疗中占据着不可替代的地位,但化疗耐药已经成为临床治疗的主要障碍。核转录因子 E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)是 Nrf2-Keapl-ARE 信号转导通路中调控氧化应激反应的关键性转录因子。近年来研究发现,Nrf2能促肿瘤生长,与化疗耐药相关。该文综述了 Nrf2与化疗耐药的研究进展。
关键词： 核因子E2相关因子2 肿瘤 耐药 化学治疗 信号通路 -
姜黄素诱导急性高脂血症大鼠动脉核因子E2相关因子2表达
目的 观察姜黄素对急性高脂血症大鼠血脂、血管内皮功能及氧化应激状态的影响,探讨其抗氧化作用与核因子E2相关因子2(Nrf2)表达水平的关系.方法 将雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、高脂组、姜黄素低剂量组[125 mg/(kg·d)]、姜黄素高剂量组[250 mg/(kg·d)]、阿托伐他汀组[(2.1 mg/(kg· d)].正常对照组、高脂组用给药溶质玉米油预处理,其他组用相应药物预处理.预处理10天后采用腹腔注射蛋黄乳液的方法建立急性高脂血症大鼠模型,腹腔注射24 h后测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)活力,同时留取主动脉组织测定丙二醛(MDA)含量及行病理学检查.结果 与正常对照组比较,高脂组TC、TG、LDLC、ox-LDL、MDA和Nrf2的表达升高,SOD活力、NO含量降低.与高脂组比较,高、低剂量姜黄素组及阿托伐他汀组TC、TG、ox-LDL、MDA降低,Nrf2、SOD活力、NO含量增加.高剂量姜黄素组上述作用优于低剂量姜黄素组.结论 姜黄素通过降低血脂及诱导Nrf2的表达,提高主动脉的抗氧化能力,发挥内皮保护作用.
关键词： 姜黄素 急性高脂血症 阿托伐他汀 核因子E2相关因子2 氧化应激 -
沉默Nrf2基因的骨髓间充质干细胞移植对大鼠心肌梗死后心室重构和纤维化的影响
目的 探讨以siRNA为载体沉默骨髓间充质干细胞(MSC)中核因子E2相关因子2(Nrf2)基因后细胞移植对大鼠心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能机制.方法 建立心肌梗死大鼠模型,随机分为沉默Nrf2基因的MSC移植组(MSCNd2-/-组)、过表达Nrf2基因的MSC移植组(MSCNrf2+/+组)和生理盐水转染MSC移植组(对照组),每组12只.细胞移植后28天,采用Masson染色检测心肌梗死边缘区胶原沉积含量和纤维化程度,Westernblot检测梗死心肌Nrf2和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达水平,超声心动图评价梗死后心功能.结果 siRNA-Nrf2转染MSC后,Nrf2蛋白表达明显减少.移植后第28天,MSCNrf2-/-组心肌组织纤维化程度较对照组加重,MSCNrf2+/+组心肌组织纤维化程度较对照组减轻(P＜0.05);MSCNr2-/-组梗死心肌中Nrf2、HO-1蛋白表达较对照组下降(P＜0.05),而MSCNrf2+/+组梗死心肌中Nrf2、HO-1蛋白表达较对照组增加(P＜0.05);超声心动图结果显示,与对照组比较,MSCNrf-2-组左心室舒张期末内经(LVEDD)和左心室收缩期末内经(LVESD)增大,左心室射血分数(LVEF)下降(P＜0.05),MSCNrf2+/+组LVEDD和LVESD均减小,LVEF无下降(P＜0.05).结论 siRNA-Nrf2可有效干扰MSC中Nrf2蛋白的表达,降低外源性MSC对梗死心脏的修复能力,增加心肌梗死区胶原沉积,进而促进心室重构,降低心功能.由此推测Nrf2信号通路在干细胞移植治疗心肌梗死后心肌重构和纤维化中起了关键作用.
关键词： 核因子E2相关因子2 小分子RNA 心肌梗死 骨髓间充质干细胞 心室重构 -
苦参碱对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠中Nrf2表达的影响
目的 观察Nrf2在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化中的表达及作用,以及苦参碱干预对大鼠肺组织中Nrf2表达的影响.方法 按随机数字表法将120只SD大鼠分为正常空白对照组(C)、模型组(M)、泼尼松处理组(P)、苦参碱50处理组(M50)、苦参碱100处理组(M100).采用免疫组化法(SP)分析每组不同时间点肺组织中Nrf2蛋白水平,RT-PCR检测大鼠肺组织中Nrf2 m-RNA的表达.结果 四组实验组动物肺系数在造模后第7、14、28天均高于空白对照组动物(P＜0.05)；MI00组动物肺系数明显低于M组及P组、M50组动物(P＜0.05)；图像定量分析显示Nrf2在M组、P组、M50组和M100组造模后Nrf2表达高于C组,其中M组的表达量低于P组、M50组、M100组,且其表达在第7、14和28天依次降低(P＜0.05).结论 Nrf2表达在博来霉素诱导的大鼠肺间质纤维化有一定抑制作用,其机制之一可能与早期抑制氧化应激反应有关；苦参碱有抑制博来霉素诱导的大鼠肺纤维化作用,可能与早期上调Nrf2表达调节氧化应激有关.
关键词： 核因子E2相关因子2 肺纤维化 苦参碱 博来霉素 -
姜黄素对纳米二氧化硅致A549细胞氧化损伤影响
目的 研究姜黄素对纳米二氧化硅(SiO2)刺激A549细胞所致氧化应激的影响,探讨相关作用机制.方法 取A549细胞随机分6组.纳米SiO2组细胞予终质量浓度为20 mg/L的纳米SiO2溶液刺激;姜黄素低、中、高剂量组细胞分别予含终浓度为5、10、20 μmol/L姜黄素和终质量浓度为20 mg/L纳米SiO2溶液处理,溶剂对照组细胞予体积分数为0.10％的二甲基亚砜处理,空白对照组细胞不予上述任何处理.6组细胞经12 h孵育后,以分光光度计检测细胞内丙二醛(MDA)水平和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力,分别以实时荧光定量聚合酶链式反应和免疫印迹法检测细胞核因子E2相关因子2(NRF2)、硫氧还蛋白(TRX)1、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的mRNA和蛋白相对表达水平.结果 与空白对照组和溶剂对照组比较,纳米SiO2组A549细胞内MDA水平升高(P＜0.05),T-SOD活力下降(P＜0.05),NRF2、TRX1的mRNA和蛋白相对表达水平均上调(P＜0.05),TXNIP的mRNA和蛋白相对表达水平均下调(P＜0.05).予姜黄素干预后,随姜黄素浓度的增加,A549细胞内MDA水平下降,T-SOD活力升高,NRF2 mRNA相对表达水平和TRX1的mRNA、蛋白相对表达水平均上调,TXNIP的mRNA和蛋白相对表达水平均下调,均呈剂量-依赖性关系(P＜0.01).结论 姜黄素对纳米SiO2所致A549细胞氧化应激具有保护作用;其可能通过调控NRF2/抗氧化反应元件通路,激活TRX系统,发挥抗氧化作用,保护细胞免受过度的氧化损伤.
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不同级别脑胶质瘤细胞中Nrf2、MGMT表达的临床意义及其相关性分析
目的:研究核因子E2相关因子2(Nrf2)、O6-甲基乌嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在不同病理级别人脑胶质瘤中的阳性表达情况,分析其临床预后与病理分级之间的关系.方法:收集76例脑胶质瘤组织及14例正常脑组织中作为研究对象,采用免疫组织化学(SP法)分析Nrf2及MGMT表达情况,并分析其与临床预后之间的相关性.结果:Nrf2在胶质瘤组织中阳性表达率较正常组增高,其阳性表达强度与肿瘤病理分级之间呈正相关关系(Z=2.843,P＜ 0.01),Nrf2与MGMT的阳性表达强度呈正相关(r=0.683,P＜0.01);Nrf2表达强度中度或强阳性者3年预后生存率明显低于Nrf2表达阴性或者弱阳性(-～+),P＜0.01.结论:胶质瘤组中的Nrf2的阳性表达增高,且与患者的预后生存率负相关.Nrf2和MGMT可作为胶质瘤病理分级及临床预后判断的指标.
