促红细胞生成素促心肌细胞肥大的实验研究

目的 观察促红细胞生成素(Erythropoietin,Epo)对离体乳鼠心肌细胞肥大形态学及分子生物学表现的影响.方法 (1)新生大鼠原代心肌细胞分为空白对照、AngⅡ1×10-6M和Epo 10U/ml干预组,取24 h、48 h和72 h三个时间点固定细胞,cTnI免疫组化染色,比较各组细胞面积;(2)RT-PCR法检测比较空白对照和Epo 10 U/ml干预30min c-fos mRNA和2 h ANP和BNP mRNA表达;(3)Western blot检测Epo10U/ml刺激p-ERK表达的时间变化.4)Western blot检测不同浓度Epo刺激p-ERK表达的差异.结果 (1)AngⅡ和Epo刺激均使心肌细胞面积增大(P＜0.05,24 h、48 h和72 h,AngⅡ组VS Con组;P＜0.05,48 h和72 h,Epo组VS Con组);(2)Epo10 U/ml干预组心肌细胞30min c-fos mRNA表达量与对照组相比差异不明显,2h ANP mRNA和BNP mRNA表达量和对照组相比,明显升高(P＜0.05);(3)Western blot结果显示,Epo干预心肌细胞后p-ERK2表达随时间出现先升高后下降的变化,30 min时达到高峰,与干预前和干预后120min差别具有统计学意义(P＜0.05,30 min VS 0,120min);(4)随Epo干预浓度增大,p-ERK2表达水平升高(P＜0.05,EpolO U/ml和Epo100 U/ml组VS Con组).Epo刺激p-ERK1表达也出现相同的时间浓度趋势,但各组差别无统计学意义.结论 Epo刺激可使心肌细胞表面积增大,促进肥大基因ANP、BNP mRNA表达的升高,并刺激p-ERK出现时间相关性和浓度依赖性表达.

细胞外调节蛋白激酶磷酸化对糖尿病全脑缺血再灌注大鼠海马区Ku70表达的影响

目的 探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)磷酸化对糖尿病全脑缺血再灌注大鼠海马区Ku70表达的影响. 方法 采用STZ诱导联合改良Pulsineli 4血管阻断(4-VO)法制备糖尿病全脑缺血再灌注模型,应用ERK1/2抑制剂U0126对糖尿病全脑缺血再灌注大鼠预处理.分别于缺血灌注1、6、24、48 h应用光镜和电镜观察海马区神经细胞形态变化;免疫印迹法检测磷酸化ERK1/2和Ku70表达水平. 结果 糖尿病全脑缺血再灌注(DCI)组1、6、24、48 h存活神经细胞数量[(26.90土2.30)、(20.26±2.00)、(18.78±2.06)、(16.60±1.70)个/视野]低于血糖正常全脑缺血再灌注(NI/R)组[(30.22±2.28)、(26.00±1.23)、(24.80±2.17)、(18.20±1.48)个/视野],磷酸化ERK1/2和Ku70表达水平低于NI/R组(P＜0.05).应用U0126处理后,存活神经细胞数量及磷酸化ERK1/2和Ku70表达水平NI/R组低于DCI组(P＜0.05). 结论 ERK1/2活性及Ku70表达的降低,参与并介导了糖尿病加重全脑缺血再灌注后神经细胞的丢失.糖尿病加重全脑缺血再灌注神经细胞损伤机制中,ERK1/2活性降低使Ku70表达减少,神经细胞丢失严重.

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾脏ERK/c-fos蛋白表达的影响

目的 观察罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏细胞外信号调节激酶(ERK)、c-fos蛋白表达的影响.方法 应用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,用免疫组化方法检测肾脏ERK、c-fos蛋白表达.结果:(1)成模动物具有高血糖、胰岛素抵抗、肾脏病变等特点.(2)糖尿病组大鼠肾组织中ERK、c-fos表达较对照组明显增加.罗格列酮治疗后ERK、c-fos活性降低,肾功能及组织病理学损害改善.结论 2型糖尿病大鼠模型肾组织ERK/c-fos蛋白表达增加.罗格列酮治疗后ERK/c-fos表达降低,伴肾功能和肾脏病理损害改善.

PPAR-γ依赖性ERK磷酸化介导吡格列酮引起的钠和碳酸氢根在肾近曲小管的重吸收

目的 噻唑烷二酮类药物是PPAR-γ的选择性配体,用于改善胰岛素抵抗,但因其可引起浮肿、钠潴留而使用受限.本研究探讨该类药物引起浮肿的机制及其传导通路.方法 兔肾近曲小管在吡格列酮(0.03、0.3、3μmol/L)及PPAR-γ拮抗剂(5μmol/L GW9662)或MAPK抑制剂(10μmol/L PD98059)作用下,观察Na+/HCO-3转运活动度及HCO-3重吸收率的变化,Western blot法测定ERK的磷酸化.结果 (1)0.3 μmol/L吡格列酮刺激兔肾近曲小管Na+和HCO-3的转运和重吸收,该刺激作用被MAPK抑制剂或PPAR-γ拮抗剂阻断.(2)0.3 μmol/L吡格列酮引起ERK磷酸化,被MAPK抑制剂或PPAR-γ拮抗剂阻滞.结论 在兔肾近曲小管,通过PPAR-γ依赖的ERK磷酸化介导吡格列酮引起的肾近曲小管Na+和HCO-3的重吸收.

缺血后适应在压力负荷诱导小鼠肥厚心肌晚期心力衰竭中的作用

目的：研究缺血后适应（IPost）对离体小鼠晚期心力衰竭心肌缺血再灌注（IR）损伤中的保护作用，探讨细胞外信号调节激酶（ERK1/2）和磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B （PI3K-Akt）信号通路在IPost心肌保护中的作用。

丙氨酰谷氨酰胺对心肌缺血模型大鼠心肌纤维化及缝隙连接蛋白43重构的影响及其机制

目的：研究丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）诱导热休克蛋白70（HSP70）高表达对心肌缺血模型大鼠心肌纤维化及缝隙连接蛋白43（Cx43）重构的影响及其机制。
　　方法：32只SPF级雄性SD大鼠（200±20）g，按随机数字表法随机等分为4组：对照组、盐酸异丙肾上腺素（ISO）[5mg/（kg·d）]组（模型组）、ISO[5mg/（kg·d）]+Ala-Gln [0.75mg/（kg·d）]组（干预组）、ISO[5mg/（kg·d）]+槲皮素[100mg/（kg·d）]+Ala-Gln [0.75mg/（kg·d）]+二甲基亚矾（DMSO）组（槲皮素组）。每组每天1次给予相应试剂，ISO连续给药7d后停止，余处理继续至第4周时处死大鼠。伊红素（HE）、Masson染色法观察心肌纤维化情况并计算胶原容积分数；免疫组织化学法观察心肌组织中HSP70、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）及Cx43分布，并通过软件进行半定量分析。
　　结果：伊红素、Masson染色结果显示对照组无明显心肌纤维化，模型组和槲皮素组出现明显的纤维化，而干预组较模型组和槲皮素组心肌纤维化程度均减弱（P均<0.01），干预组与对照组的心肌纤维化程度无明显差异（P>0.05）。对照组、模型组、槲皮素组中HSP70的含量差异无统计学意义（P>0.05），而干预组中HSP70的含量较上述各组明显升高,且差异有统计学意义（P均<0.01）。心肌组织中p-ERK1/2的含量干预组较模型组、槲皮素组均降低，差异有统计学意义（P均<0.01）。Cx43含量在对照组与干预组中差异无统计学意义且呈线性规律分布，干预组较模型组和槲皮素组均增加，差异有统计学意义（P均<0.01），分布无规律性，且侧面分布相对增多。
　　结论：Ala-Gln诱导HSP70高表达可减轻ISO诱发的心肌缺血模型大鼠心肌纤维化程度和Cx43的重构，其机制可能与HSP70下调p-ERK1/2的表达，抑制细胞外信号调节激酶通路激活有关。

血管紧张素-(1-7)在拮抗血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞Cx43间隙连接上调中的作用

目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞Cx43间隙连接中作用.方法 AngⅡ处理培养心肌细胞24h.PD98059和Ang-(1-7)在AngⅡ刺激细胞前1h加到培养基中,对照组加等体积药物溶剂DMSO.用Western blot分析和电镜观察心肌细胞Cx43表达和间隙连接.结果 Western blot分析显示用10-9～10-6mol/LAngⅡ刺激细胞24h,Cx43的表达与对照组相比呈浓度依赖性增加;用AngⅡ0.1μmol/L刺激心肌细胞24h,与对照组相比Cx43表达上调、磷酸化ERK1/2活性增加(P＜0.01),ERK1/2激酶特异性抑制剂1μmol/LPD98059和0.1μmol/LAng-(1-7)能阻断AngⅡ上调Cx43表达和磷酸化ERK1/2活性增加.电镜观察证明用AngⅡ0.1μmol/L刺激心肌细胞24h,AngⅡ处理组细胞间隙连接数目和大小较对照组增加(P＜0.05),0.1μmol/LAng-(1-7)能阻断AngⅡ增加心肌细胞间隙连接数目和大小.结论 Ang-(1-7)通过抑制磷酸化ERK1/2活性增加,从而拮抗AngⅡ上调培养新生鼠心肌细胞Cx43间隙连接.

丝裂原活化蛋白激酶与γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病肺组织中的表达

我们前期的研究表明了γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支气管哮喘(简称哮喘)中的重要作用[1,2].本组实验探讨细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-p38与γ-GCS在大鼠COPD中的作用.

慢性支气管哮喘模型大鼠气道中细胞外信号调节激酶1/2表达及活性变化的研究

细胞外信号调节激酶(ERK)属于有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)家族,它是细胞内重要的信号传递分子,并有多种亚型,在平滑肌中主要有ERK1、ERK2(ERK1/2)两种,该通道在支气管哮喘(简称哮喘)病理生理发生和发展过程中的作用得到越来越多的关注.我们研究ERK1/2在慢性哮喘模型大鼠气道中表达及活性的变化,探讨ERK信号通道在哮喘气道重塑发病机制中的意义,为进一步阐明哮喘气道重塑的发生机制和找寻新的哮喘治疗途径提供实验依据.

转化生长因子β1和磷酸化细胞外信号调节激酶在胃癌中的表达

转化生长因子β1(TGF-β1)是一种具有多种生物活性的多肽,与肿瘤的发生及发展密切相关.细胞外信号调节激酶是丝裂素活化蛋白激酶家族的一个亚族,磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)是其活化形式.我们应用免疫组化技术检测TGF-β1和p-ERK蛋白在胃癌中的表达情况,旨在探讨它们与胃癌发生及发展的关系.

地塞米松对急性肺损伤大鼠信号转导细胞外信号调节激酶的影响

目的 观察地塞米松对急性肺损伤(ALI)大鼠细胞信号转导中细胞外信号调节激酶(ERK)表达的影响,从而为临床治疗提供理论依据.方法 健康雄性SD大鼠随机分为脂多糖(LPS)模型组(静脉注射5.0 mg/kg LPS)、LPS+地塞米松低、中、高(0.2 mg/kg、1.0 mg/kg、5.0 mg/kg)3个剂量组和对照组,每组5只,4 h时测定动脉血气,肺湿/干(W/D)比值,Bradford法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)和血浆中蛋白浓度并计算肺通透指数(LPI=BALF蛋白含量/血浆蛋白含量),Western blot法检测不同剂量地塞米松对p-ERK蛋白表达的影响;另取大鼠,在注射LPS后1 h、4 h、8 h、12 h和0 h(对照组:注射生理盐水)5个时相点(每个时相点5只)分别用Western blot法检测地塞米松对p-ERK蛋白表达的影响.结果 LPS模型组大鼠动脉血气各项指标、肺W/D比值、LPI及肺组织p-ERK表达显著高于对照组(P<0.05或P<0.01).地塞米松中、高剂量组能显著降低LPS诱导的ALI大鼠动脉血气分析、肺W/D比值、LPI(P<0.05或P<0.01),同时还能显著抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织p-ERK蛋白表达(P<0.05);地塞米松在注射LPS后4 h时能显著抑制p-ERK的蛋白表达.结论 地塞米松抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织通透性增加和ERK的表达,可能这种通过抑制ERK活化的作用,对ALI的预后有益.

慢性间歇缺氧对大鼠心房结构重构的影响

目的 通过建立慢性间歇缺氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)大鼠实验模型,探讨CIH对大鼠心房结构重构的影响及其相关的纤维化信号传导通路.方法 15只健康雄性 SD大鼠,分为对照组(n=4)、CIH组(n=6)和 CIH+依那普利(enalapril,EN)组(n=5).CIH组和CIH+EN组给予每日间歇缺氧5 h处理,连续间歇缺氧3周,CIH+EN组每日缺氧前给予依那普利10 mg· kg-1·d-1灌胃,CIH组和对照组给予等量生理盐水灌胃.3周后,取大鼠心房肌组织,HE染色法观察大鼠心房肌组织的病理变化;Masson染色法计算心房胶原容积分数(CVF),评价大鼠心房肌组织胶原纤维增生情况.免疫组化染色法检测大鼠心房肌组织细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)和核转录因子kappa B(NF-κB)的蛋白表达水平.结果 ①CIH组导致大鼠心房肌组织细胞核大小不均,排列紊乱,心肌间隙增大,CIH+EN组上述改变明显减轻;②CIH组大鼠心房肌组织CVF较对照组明显增大[(12.80%±4.96%)对(2.04%±0.63%)P<0.05],CIH+EN组较CIH组纤维化程度明显减轻[(12.80%±4.96%)对(5.26%±1.35%),P<0.05];③免疫组化结果显示,与对照组相比,CIH组大鼠心房肌ERK1/2[(0.43±0.02)对(0.36±0.04)]、p-ERK1/2[(0.41±0.03)对(0.31± 0.02)]和NF-κB[(0.35±0.03)对(0.26±0.03)]的蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);CIH+EN组较CIH组ERK1/2[(0.43±0.02)对(0.39±0.03)]、p-ERK1/2[(0.41±0.03)对(0.36±0.04)]的表达减少(P<0.05).结论 CIH可引起心房纤维化而发生心房的结构重构,ERK和NF-κB信号传导通路可能参与心房结构性重构的调控,RAAS阻滞剂可减轻心房结构重构,这可能与其抑制ERK信号通路有关.

家兔慢性冬眠心肌中细胞外信号调节激酶1/2变化及药物干预的影响

蛋白激酶在骨关节炎软骨细胞信号转导中的作用

蛋白激酶,特别是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)和受体酪氨酸激酶(receptor-tyrosine kinases,RTKs)通过调节细胞内信号转导通路,在哺乳动物的细胞内发挥重要的作用,涉及到细胞的增殖、分化、凋亡、细胞因子的反应、基质金属蛋白酶的表达并参与细胞内的信号转导等.在关节软骨的退变和骨关节炎(osteoarthritis,OA)的病程中,蛋白激酶参与的信号转导通路发挥了重要的作用,目前已经证实参与了OA发病的MAPK和RTK有c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK),p38激酶(p38 kinase)和细胞外信号调节激酶(extracellular sigal-regulated protein kinase,ERK).此外,JAK激酶/信号转导和转录激活子(signal transducer and activator of transcription,STAT)通路也可能参与了这一过程.MAPK可以通过自身磷酸化引起活化,而这一过程需要其上游激酶,如MKK、MKKK以及MKKKK的诱导.明确MAPK信号转导通路在关节软骨退变过程中的作用对发现OA治疗的新方法有关键的意义.

孕酮和米非司酮对前列腺癌PC-3细胞作用机理的研究

目的探讨孕酮和米非司酮促进前列腺癌PC-3细胞增殖作用的机理.方法细胞培养观察孕酮和米非司酮对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响.RT-PCR检测PC-3细胞孕激素受体mRNA的表达.Western blot检测孕酮对PC-3细胞细胞外信号调节激酶ERK1/2活性的影响,并观察米非司酮对孕酮的阻断效果.结果细胞培养7 d,孕酮(100 nmol/L)组细胞数量为(3.2±0.3)×105,明显高于正常培养组[(1.9±0.2)×105](P＜0.05);米非司酮(10 μmol/L)组为(1.3±0.2)×105,明显低于正常培养组(P＜0.05).PC-3细胞有孕激素受体mRNA的表达.孕酮可以激活ERK1/2,而米非司酮阻断孕酮对ERK1/2的激活,孕酮组与孕酮+米非司酮组p-ERK1/2条带强度差异有统计学意义(吸光度A值分别为70752±16377和12493±3478,P＜0.05).结论孕酮对PC-3细胞的促进增殖作用与激活细胞ERK1/2有关;米非司酮阻断孕酮对PC-3细胞ERK1/2的活化,从而抑制细胞增殖.

细胞外信号调节激酶在内毒素休克大鼠生物喋呤诱生中的作用机制探讨

目的观察细胞外信号调节激酶 (ERK) 通路抑制剂对生物喋呤 (BH4)和一氧化氮(NO)表达及核因子-κB (NF-κB) 活化的影响,探讨内毒素休克时ERK信号通路与NF-κB的交汇作用及其对BH4诱生NO的调控机制.方法采用内毒素休克模型,60只大鼠随机分为正常对照组(n=8)、内毒素休克组(n=32)和ERK抑制剂PD98059拮抗组(n=20).留取动物肝、肺、肾组织进行NF-κB活性分析以及三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ(GTP-CHⅠ)、诱生型一氧化氮合酶 (iNOS) 基因表达的检测,并测定组织及血浆中BH4、NO水平.结果内毒素攻击可导致动物肝、肺、肾组织GTP-CHI基因表达和BH4水平明显升高,至伤后24 h仍持续于较高水平;与之相应,组织iNOS基因表达和NO水平亦明显升高;各组织NF-κB 迅速活化,并于2 h达峰值.采用PD98059处理后,内毒素休克动物肾组织GTP-CHⅠ mRNA表达明显受抑,肝、肺组织GTP-CHⅠ mRNA表达仅呈现降低趋势;血浆及肝、肾组织中BH4水平12 h显著降低;同样,各组织iNOS mRNA表达及NO水平早期亦显著降低.此外,PD98059处理组动物肝组织2～6 h、肺组织2 h、24 h和肾组织24 h时相点 NF-κB活性显著降低.结论内毒素休克时抑制ERK通路,能部分下调BH4和NO表达与NF-κB的活化,表明ERK与NF-κB通路间可能存在交汇作用,共同参与了BH4诱生NO的调控作用.

表皮黑素细胞专用培养基组分与细胞外信号调节激酶蛋白磷酸化关系初步观察

目的 了解表皮黑素细胞专用培养基HU16中维持细胞生长的主要物质人重组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、FBS和环腺苷酸激动剂与细胞外信号调节激酶(ERK1/2)蛋白磷酸化的关系.方法 从环切包皮原代培养人表皮黑素细胞,用western blot检测去bFGF、去FBS以及去环腺苷酸激动剂培养基培养后ERK1/2蛋白磷酸化水平的改变.结果 去bFGF和去FBS处理后,表皮黑素细胞ERK1/2蛋白的磷酸化水平明显下降(P<0.05),恢复完全培养基培养后0.5 h,ERK1/2蛋白的磷酸化水平即重新上升至处理前水平.去环腺苷酸激动剂处理后,ERK1/2蛋白的磷酸化水平无明显改变.结论 HU16培养基中bFGF和FBS的浓度可影响体外培养的人表皮黑素细胞中ERK1/2蛋白的磷酸化水平.

鸦胆子油乳对增生性瘢痕成纤维细胞的增殖影响及其机制研究

目的 观察鸦胆子油乳(brucea javanica oil emulsion,B JOE)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSFs)增殖、胶原合成和ERK1/2 MAPK信号通路的影响.方法 收集人来源增生性瘢痕组织,行HSFs体外培养及鉴定;终浓度为0.5、1、5、10、20、50 mg/ml浓度的BJOE作用HSFs 24 h后,计算出24 h半数抑制浓度(IC50).以近IC50浓度的BJOE作用HSFs 24、48、72 h为实验组,对照组为常规培养的HSFs,CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞术(FCM)进行细胞的周期检测.观察近IC50浓度的BJOE作用HSFs 24 h后细胞的形态学变化.Western blot法检测Ⅰ型胶原、波形蛋白、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化蛋白p-ERK1/2的表达.结果 BJOE的IC50为1.176 mg/ml,故选择1 mg/ml浓度进行后续实验.以1 mg/ml浓度的BJOE作用24、48、72 h后,BJOE对HSFs的抑制率分别为(53.13±2.40)％、(75.07±2.67)％、(88.65±0.32)％,差异具有统计学意义(P＜0.05).BJOE作用下HSFs数目明显减少,细胞间隔增宽,细胞突起明显缩短,甚至消失,细胞变圆.实验组的S期细胞百分数逐渐减少.HSFs中Ⅰ型胶原、波形蛋白和p-ERK1/2的表达明显受到抑制(P＜0.05),而ERK1/2的表达无明显变化(P＞0.05).结论 鸦胆子油乳对HSFs的增殖及Ⅰ型胶原的合成具有抑制作用,其机制与抑制ERK1/2磷酸化及波形蛋白的表达有关.

胰岛素相关微环境因子对子宫内膜癌细胞MAPK/ERK通路活化的时间和浓度效应研究

目的 检测胰岛素样生长因子(IGF)及胰岛素(insulin)在子宫内膜癌Ishikawa及HEC-1-A细胞中激活MAPK/ERK通路的佳时间和浓度.方法 采用蛋白免疫印迹技术分别检测IGF-1、IGF-2及Insulin不同时间(浓度为10 nmol/L时,分别刺激5min、10 min、20 min、30 min和60 min)和不同浓度(2 nmol/L、5 nmol/L、10 nmol/L、20 nmol/L和100 nmol/L)作用后,子宫内膜腺癌Ishikawa及HEC-1-A 细胞中MAPK通路关键分子ERK1/2磷酸化水平的变化,以确定各因子的佳刺激时间和佳刺激浓度.结果 ① IGF-1、IGF-2及Insulin均能刺激Ishikawa及HEC-1-A细胞ERK通路的激活.②在Ishikawa细胞中,IGF-1浓度为2 nmol/L,刺激20 min时,ERK磷酸化水平高;IGF-2浓度为10 nmol/L,刺激30 min时,ERK磷酸化水平高;胰岛素浓度在10 nmol/L刺激5 min作用强.③在HEC-1-A细胞中,IGF-1浓度为10 nmol/L,刺激10 min时,ERK磷酸化水平高;IGF-2浓度为10 nmol/L,刺激30 min作用强;胰岛素浓度在10 nmol/L,刺激10 min作用强.结论 IGF-1、IGF-2及Insulin能够激活Ishikawa及HEC-1-A细胞的ERK通路,且各种微环境因子的作用均有时间和浓度依赖性.

酸性成纤维细胞生长因子在宫颈癌中的表达及其信号传导途径

目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)在宫颈癌发生发展中的作用及其信号传导机制.方法应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)对36例宫颈癌组织aFGF 及其受体FGFR1的表达进行了分析;并以不同浓度的aFGF 和酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂genistein诱导宫颈癌细胞株HeLa细胞,[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定蛋白激酶C(PKC)及细胞外信号调节激酶(ERK)的活性.结果 aFGF mRNA 和FGFR1 mRNA在宫颈癌组织中的半定量检测结果分别为(1.233±0.064)和(1.168±0.103),与正常宫颈组织相比,差异有显著性(P<0.05),且在Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌中的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05);随着aFGF浓度的增加,HeLa细胞PKC及ERK 活性随之升高,与aFGF浓度呈剂量依赖效应;genistein抑制细胞内PKC及ERK 活性,与genistein 浓度亦呈剂量依赖效应.结论提示aFGF 与宫颈癌的发生、发展、浸润呈正相关,其受体具有TPK活性,TPK激活后可进一步激活PKC和ERK,进一步证明PKC及ERK确是TPK的下游信号分子.