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人谷胱甘肽硫转移酶M1基因在CHO细胞中的表达

陈萍萍;张朝武;谢东;吴逸明;韩良峰

摘要: 目的构建人谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)的CHO细胞表达体系.方法重组质粒pcDNA3.1-GSTM1用LipofectamineTM2000转染CHO细胞,用G418筛选细胞的阳性克隆,并用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定,测定GSTM1酶活性.结果 GSTM1基因已转染到CHO细胞的基因组,并转录表达,生成GSTM1蛋白,经测定活性达到28mmol/(min·mg prot).结论通过CHO-GSTM1细胞表达,为基因工程生产具有完整功能GSTM1的进一步纯化提供了材料,为研究化学致癌物在真核细胞中的代谢,作为遗传药理学、毒理学研究的候选细胞株奠定了基础.

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