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CVB3VP1蛋白和重组腺病毒单独及联合应用的免疫效果

田新利;李伟;李剑;温婵;李嘉;闫立景;谢立新;王永祥

摘要: [目的]观察柯萨奇病毒B3(coxsackievirus group B type 3,CVB3)VP1蛋白和重组腺病毒Ad/vp1单独及联合应用的免疫效果.[方法]大量扩增重组腺病毒Ad/vp1,制备并纯化CVB3/VP1蛋白,肌肉注射免疫BALB/c小鼠.小鼠随机分为4组:腺病毒组:肌肉注射Ad/vp1,共2次;蛋白组:注射VP1蛋白,共3次;腺病毒/蛋白组:第1次注射Ad/vp1,第2、3次注射VP1蛋白;PBS对照组.各次注射间隔时间为3周.腺病毒每次接种4x107 pfu/只,VP1蛋白每次接种100μg/只.用中和试验法和ELISA法分别检测每次免疫后血清中和抗体和IgG抗体滴度;CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和CTL杀伤活性;用致死量病毒感染后检测血中病毒滴度,并观察小鼠的生存情况.[结果]中和抗体滴度及血清特异性IgG抗体水平随免疫次数增加而提高,末次免疫后,蛋白组(71.26±1.31,33 779.40±1.46)、腺病毒/蛋白组的(56.56±1.44,22 286.09±1.36)中和抗体及IgG抗体滴度明显高于腺病毒组(16.82±1.37,800±1.63) (P<0.05);蛋白组、腺病毒/蛋白组、腺病毒组的CTL杀伤活性明显高于PBS组(P<0.05);用致死量CVB3感染后,蛋白组、腺病毒/蛋白组的血中病毒滴度低于其他组,而生存率高于其他组(P(0.05).[结论]蛋白组、腺病毒/蛋白组免疫小鼠的效果明显优于腺病毒组和PBS组.

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