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微小RNA-148b在乳腺癌中的表达及意义
目的 探讨微小RNA(miRNA)-148b在乳腺癌中的表达及意义.方法 选取2008年3月-2010年3月我院肿瘤外科乳腺癌患者手术切除标本80例(乳腺肿瘤组织)、乳腺癌旁组织标本80例及正常乳腺组织标本20例.采用real-time PCR技术检测miRNA-148b水平;乳腺肿瘤细胞培养,分为空白对照组不加任何药物,阴性对照组加入安慰剂处理细胞,抑制剂组加入5-氟尿嘧啶10 μg/ml预先处理细胞48 h,进行MDA-MB-231细胞培养与转染.结果 正常乳腺组织、乳腺癌旁组织、乳腺肿瘤组织中miRNA-148b表达量比较,差异有统计学意义(P＜0.001);其中乳腺肿瘤组织中miRNA-148b表达量较正常乳腺组织和乳腺癌旁组织均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).转染24 h后,空白对照组、阴性对照组、抑制剂组中miRNA-148b表达量比较,差异有统计学意义(P＜0.001);其中抑制剂组中miRNA-148b表达量较空白对照组和阴性对照组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).3组转染24 h后MDA-MB-231细胞增殖比较,差异无统计学意义(P＞0.05).3组转染48、72 h后MDA-MB-231细胞增殖比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);其中转染48、72 h后抑制剂组较空白对照组和阴性对照组均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 miRNA-148b在人乳腺癌组织及MDA-MB-231细胞株中的表达较正常及癌旁组织低,并且在高表达水平的同时也伴有细胞增殖升高的特点.通过转染miRNA-148b抑制剂后,miRNA-148b表达水平明显上调,细胞增殖现象下降.miRNA-148b可能在乳腺癌的发生及发展阶段都发挥着重要的作用.
关键词： 乳腺肿瘤 微小RNA-148b 细胞增殖 -
微小RNA-148b/微小RNA-152对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-148b和miR-152在胆管癌中的表达及其生物学功能.方法 用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-148b和miR-152在胆管癌与正常胆管组织、胆管癌细胞株QBC939和良性胆管细胞株H-69中的表达;分别用Real-time PCR、噻唑蓝(MTT)检测法、克隆形成实验和流式细胞术检测miR-148b和miR-152的表达及其对细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响.结果 与正常胆管组织比较,miR-148b和miR-152在胆管癌组织中分别下调(2.75±0.16)倍和(3.05 ±0.18)倍,差异均有统计学意义(P=0.013、0.019);与良性胆管细胞比较,miR-148b和miR-152在胆管癌细胞中分别下调(2.52±0.03)倍和(3.96±0.02)倍,差异均有统计学意义(P=0.018、0.012);miR-148b和miR-152过表达显著抑制胆管癌细胞的增殖速率,分别为(38.49±0.31)％和(52.69±1.01)％,同时也能显著抑制克隆形成率(P=0.031、0.023),miR-148b和miR-152均可使细胞周期阻滞于S期(P=0.027、0.017),并且miR-148b和miR-152过表达均可诱导细胞凋亡.结论 胆管癌组织中miR-148b和miR-152表达均下调,过表达miR-148b和miR-152后可抑制胆管癌细胞增殖及诱导胆管癌细胞凋亡.
关键词： 微小RNA-148b 微小RNA-152 胆管癌 增殖 脱噬作用 -
p53通过调控miR-148b抑制肺癌细胞PC-9的增殖
目的：探讨 p53在肺癌 PC-9细胞中对微小 RNA-148b （miR-148b）表达的影响、相应分子机制及对细胞增殖能力的影响。方法：以肺癌PC-9细胞作为研究对象，瞬时转染p53真核表达载体，建立高表达p53的实验模型。通过荧光定量PCR检测p53在PC-9细胞中对miR-148b表达的影响。通过使用miR-148b启动子荧光素酶报告基因表达载体，检测p53对miR-148b 启动子转录活性的影响。通过转染miR-148b 特异性抑制物（Inh-148b）低表达 miR-148b，使用 CCK8法检测 miR-148b 对 p53在肺癌细胞增殖调控过程中的作用。结果：高表达p53可在肺癌PC-9细胞中促进miR-148b的表达；高表达p53可增强miR-148b启动子的活性；低表达miR-148b可减弱p53对肺癌PC-9细胞增殖的抑制作用。结论： p53对肺癌细胞PC-9增殖的抑制作用部分依赖于miR-148b。
关键词： 肺肿瘤 P53 微小RNA-148b 细胞增殖
