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MicroRNA-152下调内脏脂肪AKT基因表达参与肥胖诱导胰岛素抵抗
目的 探讨内脏脂肪微小RNA(miR-152)表达的改变在高脂诱导胰岛素抵抗(IR)发病中的作用.方法 实验分普通饲料(CN)组和高脂饮食诱导胰岛素抵抗(IR)两组;观察小鼠进食量和体质量,进行(IGTT)实验确定IR模型形成,测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和脂联素的含量,检测内脏脂肪miRNA-152、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ,α)、脂肪细胞脂肪酸结合蛋白(aP2)、和胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因表达的改变.结果 (1)两组小鼠喂养8w后进食量无明显改变,IR组体质量明显上升(P＜0.05),内脏脂肪体质量比明显增加(P＜0.05);(2)与CN组比较,IR组FBG无明显差异(P0.05),INS显著升高(P＜0.01),TC和TG明显上升(P＜0.05),而脂联素含量明显降低(P＜0.05);(3) IR较CN组小鼠内脏脂肪组织miR-152表达明显下调(P＜0.05),PPAR Y和aP2基因表达明显增加(P＜0.05),PPARα基因表达无差异,AKT和IRS-1基因表达明显下调(P＜0.05);miR-152表达仅与AKT基因表达呈正相关,与上述其他指标无相关性.结论 内脏脂肪组织miRNA-152表达下调,直接影响AKT表达而不是PPAR信号通路,是高脂诱导IR的重要发病机制之一.
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循环miR-152在多发性骨髓瘤中的表达与临床意义
目的 检测miR-152在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的表达水平,探讨其作为MM肿瘤标志物的潜在价值.方法 以30例缺铁性贫血患者为相关疾病对照组,30例体检健康者为健康人对照组,40例初诊MM患者为MM组,提取各组血清RNA样本;实时荧光定量PCR检测各组血清miR-152的表达水平;PCR扩增产物进行基因测序;ROC曲线分析其诊断MM的临床效能;Beckman Immage特种蛋白分析仪检测MM组血清IgA、IgG和IgM浓度;采用Kaplan-Meier法分析miR-152的表达水平与MM患者预后的关系.结果 MM组血清miR-152的表达水平[1.40(0.90,2.24)]高于相关疾病对照组[1.07(0.60,1.63)]和健康人对照组[0.20(0.07,0.54)],差异有统计学意义(U分别为424.50和85.50,P均<0.05);而MM患者治疗后[0.97(0.41,1.88)]较治疗前[1.66(1.15,2.42)]血清miR-152表达水平明显降低(U=63.00,P=0.027);基因测序结果证实其为成熟miR-152序列;血清miR-152诊断MM的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.79(95％CI:0.70～0.87,P<0.05),当cut-off值为0.62时,其敏感性和特异性分别为90.00％、56.67％;血清miR-152的表达与MM患者总体生存率有关(HR=4.36,95％CI:1.23～15.43,P=0.022);miR-152的相对表达量与IgA、IgG和IgM浓度总和呈正相关(r=0.39,P=0.012),而与IgA、IgG或IgM浓度无明显相关性(r分别为0.30,-0.005和-0.18,P均>0.05).结论 血清miR-152在MM患者血清中的表达水平升高,可能会作为MM的鉴别诊断和预后的标志物.
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微小RNA-152对乳腺癌细胞增殖及阿霉素敏感性影响的实验研究
目的 探讨微小RNA-152(miR-152)对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响及其作用机制.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100、人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平,分别向MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞转染miR-152模拟物mimics(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以未行转染为空白对照组.采用QPCR检测转染后MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中miR-152的表达情况,采用MTT法检测不同浓度阿霉素(10、50、100、200和500 ng/ml)处理后各组的增殖情况,流式细胞术检测转染后各组的凋亡率,Western blotting检测磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)的蛋白水平,双荧光素酶报告实验评价miR-152对PIK3CA的靶向调控作用.结果 QPCR实验结果表明MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平均低于HBL-100细胞,且MCF-7/ADR细胞的miR-152水平均低于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P＜0.05);过表达组转染后的miR-152水平均高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05).与其余两组比较,过表达组的存活率降低而凋亡率升高,且PIK3CA蛋白水平也降低,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-152可抑制野生型PIK3CA 3'UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型PIK3CA 3'UTR的荧光素酶活性无影响.结论 miR-152表达在乳腺癌细胞中降低,且与阿霉素耐药有关,参与乳腺癌细胞的增殖和凋亡过程,在逆转乳腺癌耐药中发挥重要作用,具有一定价值.
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循环miR-152与miR-221在前列腺癌患者血清中的表达水平及临床意义
目的 分析循环miR-152与miR-221在前列腺癌患者血清中的表达水平及临床意义.方法 收集2009年1月-2013年4月本院泌尿外科收治的前列腺癌患者48例,前列腺良性增生患者32例,并招募同期健康体检者24例作为对照组,分析各组血清中miR-152与miR-221的表达水平及与PSA、Gleason的相关性关系.结果 前列腺癌患者中miR-152的表达量显著低于正常人群和前列腺良性增生患者(P＜0.05),前列腺良性增生和正常对照组之间差异无统计学意义(P ＞0.05);miR-221在前列腺癌患者中的表达量显著低于正常人群和前列腺良性增生患者,且前列腺良性增生患者中的表达量也较正常人群低,差异均有统计学意义(P＜0.05);前列腺癌患者miR-152血清表达水平与Gleason评分之间存在显著负相关性(P＜0.05),与血清PSA水平无相关性(P＞0.05),miR-221血清表达水平与血清PSA及Gleason评分之间存在显著负相关性(P＜0.05).结论 miR-152及miR-221可能通过复杂的调控过程参与前列腺癌的发生、侵袭与转归,为前列腺癌的早期诊断及病程的判断提供了实验依据.
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微小RNA-148b/微小RNA-152对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-148b和miR-152在胆管癌中的表达及其生物学功能.方法 用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-148b和miR-152在胆管癌与正常胆管组织、胆管癌细胞株QBC939和良性胆管细胞株H-69中的表达;分别用Real-time PCR、噻唑蓝(MTT)检测法、克隆形成实验和流式细胞术检测miR-148b和miR-152的表达及其对细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响.结果 与正常胆管组织比较,miR-148b和miR-152在胆管癌组织中分别下调(2.75±0.16)倍和(3.05 ±0.18)倍,差异均有统计学意义(P=0.013、0.019);与良性胆管细胞比较,miR-148b和miR-152在胆管癌细胞中分别下调(2.52±0.03)倍和(3.96±0.02)倍,差异均有统计学意义(P=0.018、0.012);miR-148b和miR-152过表达显著抑制胆管癌细胞的增殖速率,分别为(38.49±0.31)％和(52.69±1.01)％,同时也能显著抑制克隆形成率(P=0.031、0.023),miR-148b和miR-152均可使细胞周期阻滞于S期(P=0.027、0.017),并且miR-148b和miR-152过表达均可诱导细胞凋亡.结论 胆管癌组织中miR-148b和miR-152表达均下调,过表达miR-148b和miR-152后可抑制胆管癌细胞增殖及诱导胆管癌细胞凋亡.
关键词： 微小RNA-148b 微小RNA-152 胆管癌 增殖 脱噬作用 -
微小RNA-152对肝癌细胞HepB3与SNU449生物学功能的影响
目的:研究微小RNA-152(miR-152)对肝癌细胞生物学功能的影响.方法:将miR-152阻遏物及模拟物转染至HCC细胞系HepB3及SNU449中,检测HCC细胞生长、凋亡及Caspase3/7活性的变化.结果:miR-152阻遏物可抑制HCC细胞生长、诱发凋亡及促进Caspase3/7活性的增加.结论:miR-152在肝癌的发展中发挥重要作用,并有望成为HCC的新的治疗靶标.
